刘素霞
- 作品数：6 被引量：11H指数：1
- 供职机构：华北制药集团新药研究开发有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：理学医药卫生生物学农业科学更多>>
- 检测重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体甲氨蝶呤残留量的反相高效液相色谱法的建立及验证被引量：1
- 2018年
- 目的建立重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体中甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)残留量检测甲反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)法,并进行验证。方法样品经饱和硫酸铵法沉淀蛋白,取上清液进样检测。色谱柱为Waters/ACQUITY UPLC BEH C18(1. 7μm,2. 1 mm×100 mm),流动相为乙腈-甲醇-0. 054 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(体积比6∶2∶92),pH 6. 5,检测波长302 nm,柱温:30℃,流速:0. 25 mL/min,进样体积:10μL,洗脱时间:15 min。同时验证方法的线性、特异性、准确度、定量限、精密性及耐用性。结果该方法特异性良好;MTX浓度在4~200 ng/mL范围内线性良好,R2> 0. 999;检测限为4 ng/mL;MTX浓度为20. 0、50. 0、100. 0 ng/mL 3个加标样品的回收率分别为102. 83%、100. 33%、99. 23%,3次重复检测结果RSD分别为1. 56%、1. 50%、0. 42%,两位实验员6次检测结果的RSD分别为2. 46%、1. 27%、1. 49%;MTX浓度为50. 0 ng/mL的加标样品在流动相p H 6. 3、6. 5、6. 7条件下测定结果的RSD为2. 02%。结论本实验建立的方法具有良好的特异性、精密性及准确度,且操作简便,可用于重组蛋白药物研发及生产过程中残留MTX的监测。
- 刘素霞杜力任华景
- 关键词：甲氨蝶呤人肿瘤坏死因子单克隆抗体反相高效液相色谱
- 一种检测CHO培养细胞中支原体污染的试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及一种检测CHO培养细胞中支原体污染的试剂盒及其检测方法，属于生物技术检测领域。该试剂盒包括置于同一PCR体系中的特异性扩增CHO细胞甘油醛-3-磷酸脱氢酶DNA序列的引物对与特异性扩增支原体16srRNA保守区...
- 刘晓志周兴军董向峰常亮陈雪静刘素霞赵伟高健段宝玲
- 文献传递
- 蛋白药物生产中支原体检测方法的建立及应用
- 2013年
- 为检测中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞培养过程中的支原体污染,以CHO细胞的管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶作为内参基因,将内参引物和支原体引物同时放置在一个PCR体系中,确立了一种快速、准确、稳定的PCR检测方法。通过优化两种引物的浓度配比,确定内参基因引物浓度为5μmol/L,支原体引物浓度为10μmol/L。与DNA荧光染色法相比,PCR法检测结果一致,减少了假阴性结果,缩短了检测时间,可以满足生产过程中的支原体污染的监测。
- 刘素霞刘晓志杨立霞赵伟常亮周兴军高健
- 关键词：中国仓鼠卵巢细胞支原体PCR反应
- 重组单克隆抗体生产的宿主细胞系的研究进展被引量：1
- 2018年
- 许多表达系统可以表达单克隆抗体,并且也在研究中。CHO细胞是最常用于研究的细胞系,直到今天仍然是单克隆抗体生产的主力。对宿主细胞系进行改造提高产品产量及质量,不同的宿主细胞系生产的产品质量存在差异。
- 刘素霞
- 关键词：单克隆抗体
- 实时定量PCR法检测生物技术药物中宿主基因组DNA残留被引量：9
- 2014年
- 利用基于SYBR GreenⅠ荧光染料的实时定量PCR方法检测酵母表达生物技术药物产品中宿主DNA残留量。该方法检测灵敏度可达到1.0 fg/μL,DNA浓度在1.0 fg/μL^1.0 ng/μL范围内线性良好,其标准曲线的相关系数为0.99以上。应用该方法对3批不同实验样本进行测定,宿主DNA残留量分别为8.635×105fg/μL、6.265×102fg/μL和1.436 fg/μL。实验表明该方法操作简便、灵敏度高,可用于生物技术药物产品中酵母DNA残留的定量测定。
- 曹晨华刘晓志段月娇刘素霞刘素霞常亮赵伟高健
- 关键词：实时定量PCR生物技术药物
- 分光光度法检测重组蛋白药物中PF68残留量
- 2018年
- 目的建立能够定量检测重组蛋白药物中PF68残留量的分光光度法,并进行验证。方法采用TCA沉淀蛋白方法,上清中PF68与硫氰酸钴铵盐反应形成蓝色复合物,于酶标仪波长624 nm处测定吸光度值,通过标准曲线计算样品中PF68的含量。对方法进行线性、准确度、精密度验证,并确定定量限。结果分光光度法检测重组蛋白中PF68含量,PF68浓度在0.1~1.6 mg/mL范围内,标准曲线的线性较好,相关系数R^2>0.99,定量限低至0.1 mg/mL。各浓度水平验证样品的加样回收率在88%~100%之间;浓度为1.2、0.6、0.3 mg/mL样品重复性试验的RSD分别为4.0%、5.2%、3.9%,中间精密度试验的RSD分别为7.0%、5.7%、4.8%。结论分光光度法准确度和精密度良好,可用于重组蛋白药物研发及生产过程中残留PF68的监测。
- 刘素霞杜力王志明
- 关键词：重组蛋白分光光度法
