于杰淼
- 作品数:3 被引量:8H指数:1
- 供职机构:江苏省中医药研究院更多>>
- 发文基金:江苏省国际科技合作项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 东亚钳蝎蝎毒素AGAP的生产方法
- 本发明属于医药生物技术领域,具体涉及一种说重组蝎毒蛋白AGAP的生产方法。该方法是先利用重叠PCR技术获得带有His6标签的SUMO-AGAP融合基因;然后构建含SUMO-AGAP基因的重组表达载体;再将构建的表达载体转...
- 曹鹏卢悟广王志刚于杰淼
- 文献传递
- SUMO-BMP7融合蛋白的表达及纯化被引量:8
- 2009年
- 采用融合表达技术,将BMP-7与SUMO(Small ubiquitin-related modifier)基因通过PCR技术连接起来,组成SUMO-BMP7基因片段,双酶切后插入到pET28a载体中克隆,挑取单克隆进行酶切及菌落PCR检测,提取检测结果为阳性的质粒,转化进大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。SUMO属于小泛素样修饰因子,具有帮助蛋白质折叠的作用,可提高目的蛋白的表达量和增加目的蛋白的可溶性,经特异性酶切后,目的蛋白能够得到天然的N末端;结果:表达后经超声、Ni-NTA纯化得到SUMO-BMP7融合蛋白。确定了可溶性SUMO-BMP7适宜的诱导温度、诱导时间和IPTG浓度,得到了电泳纯度大约98%的SUMO-BMP7融合蛋白;获得的可溶性融合蛋白,具有很高的表达量。分离纯化后,SDS-PAGE纯度可达到98%左右。为其下一步的酶切和活性研究提供基础。
- 于杰淼曹鹏卢悟广蔡雪婷张娟王旻
- 关键词:骨形态发生蛋白7克隆纯化
- 东亚钳蝎蝎毒素AGAP的生产方法
- 本发明属于医药生物技术领域,具体涉及一种说重组蝎毒蛋白AGAP的生产方法。该方法是先利用重叠PCR技术获得带有His6标签的SUMO-AGAP融合基因;然后构建含SUMO-AGAP基因的重组表达载体;再将构建的表达载体转...
- 曹鹏卢悟广王志刚于杰淼
- 文献传递