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扩增内标在副溶血弧菌多重PCR检测方法中的应用被引量：11: 2010年; 建立扩增内标存在下同时检测副溶血弧菌tlh基因和trh基因的多重PCR方法。以细菌16SrDNA片段为扩增内标对照(internal amplification control,IAC),副溶血弧菌不耐热溶血毒素(thermolabile hemolysin,TLH)基因tlh和相对耐热直接溶血毒素(thermostable related hemolysin,TRH)基因trh为检测基因,设计引物,并优化多重PCR体系。特异性及灵敏度试验结果表明:该多重PCR体系检测致病性副溶血弧菌表现出极好的特异性。纯培养条件下,扩增内标存在时tlh基因和致病基因trh的检测灵敏度分别为1.3×102 cfu.mL-1和1.3×103 cfu.mL-1;人工污染牡蛎样品,不经富集培养,扩增内标存在时tlh基因和致病基因trh的检测灵敏度分别为2.6×103 cfu.mL-1和2.6×104 cfu.mL-1;经过6h的富集培养,tlh基因和trh基因的检测限均能达到2.6×102 cfu.mL-1。该检测体系特异性强、灵敏度高,并且扩增内标的存在可排除PCR检测致病性副溶血弧菌可能导致的假阴性结果,可提高检测的速度和精准度。; 吕淑霞祝儒刚刘月萍张喆胡英; 关键词：多重PCR 副溶血弧菌特异性灵敏度

Vc二步发酵超滤弃渣液的深度脱水工艺: 本发明公开一种Vc二步发酵超滤弃渣液的深度脱水工艺，取内含渣物浓度为3~5g/100ml、古龙酸浓度为70~120mg/ml的超滤尾液，调pH 2~4，静置20分钟，加热升温至70~90<Sup>o</Sup>C,保温2...; 吕淑霞陈宏权胡昊曹桂环杨伟超韩利涛刘红心张良王天晓张喆张忠泽徐慧; 文献传递

γ射线对副溶血性弧菌辐射效应的PCR检测: 2010年; 目的:研究γ射线对副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的辐射效应。方法:采用0kGy^7.0kGy内不同剂量的60Co-γ对浓度为2.0×108CFU/mL的副溶血性弧菌进行辐射,通过菌落计数计算该菌的致死率与存活率,并采用菌液PCR和常规PCR间接检测DNA浓度研究其致死效应。结果:菌落计数表明,在0kGy^3.0kGy内,该菌致死率随辐射剂量增加而呈线性增长;3.0kGy以上可全部杀灭试验浓度的副溶血性弧菌。常规PCR和菌液PCR结果表明,PCR扩增条带亮度都随着辐射剂量的增大而增强。常规PCR中,辐射剂量3.0kGy以上,电泳条带的亮度明显增加。结论:γ射线辐射剂量与存活副溶血性弧菌数、DNA的释放量都有明显的剂量-反应关系,辐射致死的主要原因是由射线对菌体细胞膜造成损伤、DNA外流造成的。; 吕淑霞刘月苹张喆张良祝儒刚; 关键词：副溶血性弧菌

桃小食心虫产卵的寄主选择特性被引量：1: 2011年; 为了解桃小食心虫产卵对果实的选择特性,采用固相微萃取(SPME)与气质联用(GC-MS)测定不同苹果挥发性成分。选取易受桃小食心虫危害的金冠苹果具有代表性的挥发物质(乙醛、丁醛、丁醇、己醇、糠醛、庚酸、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸戊酯、乙酸己酯、丙酸丙酯)的不同浓度进行桃小食心虫引诱试验。结果表明,0.1和1.0 mg/mL的乙酸乙酯、0.1 mg/mL的乙酸丁酯、1.0 mg/mL的乙酸戊酯、6.0和60.0mg/mL的乙酸己酯、0.1 mg/mL的丙酸丙酯具有显著的效果;并利用正交试验方法得出几种效果较好的混合配比。再利用人工气候箱进行产卵引诱试验,得出0.1 mg/mL乙酸乙酯、1.0 mg/mL乙酸丁酯、10.0mg/mL乙酸戊酯、5.0 mg/mL乙酸己酯、0.1 mg/mL丙酸丙酯的混合配比为试验的最佳引诱物质。; 王晓明王洪平吕淑霞杨奉仪张喆; 关键词：桃小食心虫寄主选择性引诱产卵

基于DNA染料EMA的PCR技术检测鉴别副溶血性弧菌死活细胞被引量：15: 2010年; 将一种DNA染料(ethidium bromide monoazide,EMA)与传统的PCR技术相结合,建立了一种能有效检测纯培养条件下副溶血弧菌死活菌细胞的新方法(EMA-PCR)。研究结果表明,当用1.4μg/mL或更高浓度的EMA渗透处理含有108 CFU/mL的副溶血弧菌死细胞菌悬液后再经20 min曝光处理,其PCR结果呈阴性,而不经EMA处理的对照组其PCR结果则呈阳性;当EMA的用量等于或者小于2μg/mL时,副溶血弧菌活细胞的PCR扩增不会受到抑制。经EMA处理,含有不同比例的副溶血弧菌死细胞和活细胞的混合液中活的副溶血弧菌能够通过PCR被选择性的定量,最小的检测水平为10 CFU/PCR。而且,经研究发现在(10～2×105)CFU/PCR范围内,DNA相对荧光强度与死活细胞混合液中活细胞的对数具有线性关系。; 祝儒刚吕淑霞刘月萍张喆; 关键词：ETHIDIUM BROMIDE 副溶血弧菌

Vc二步发酵超滤弃渣液的深度脱水工艺: 本发明公开一种Vc二步发酵超滤弃渣液的深度脱水工艺，取内含渣物浓度为3~5g/100ml、古龙酸浓度为70~120mg/ml的超滤尾液，调pH2~4，静置20分钟，加热升温至70~90<Sup>o</Sup>C,保温20...; 吕淑霞陈宏权胡昊曹桂环杨伟超韩利涛刘红心张良王天晓张喆张忠泽徐慧; 文献传递

单增李斯特菌基因组DNA提取方法比较被引量：7: 2011年; 为了选择一种简单、快速、有效的单增李斯特菌基因组DNA的提取方法,采用溶菌酶-蛋白酶K法、氯仿/异戊醇法、液氮冻融法提取单增李斯特菌基因组DNA,利用PCR扩增结果判断所得DNA样品的质量。结果为,3种不同方法均能扩增出234 bp条带,溶菌酶-蛋白酶K法提取的DNA模板检出限最低,为1.25×102CFU/mL。结论为,溶菌酶-蛋白酶K法提取的DNA模板进行PCR扩增检出限最低,该方法提取的基因组DNA适用于PCR扩增和其他分子生物学研究。; 张喆吕淑霞祝儒刚徐斌金雪花; 关键词：单增李斯特菌 DNA提取

乡村振兴战略背景下农林高校研究生就业情况调查分析--以某农林高校为例被引量：4: 2022年; 全面服务乡村振兴战略,强化“大国三农”思政教育,培育具有“三农”情怀的“一懂两爱”高素质农业专业人才是新时代农林高校的重要任务。本研究以某农林高校在读研究生为例,调研和分析乡村振兴战略背景下研究生就业存在的问题及其产生的原因,并针对农林高校研究生面对的就业形势提出解决对策,探索乡村振兴战略背景下农林高校研究生就业教育的新路径和新方法,推动农林高校人才培养教育与国家乡村振兴战略有效衔接。; 邹林林刘洋张喆; 关键词：研究生就业

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张喆