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吴瑛

作品数：1 被引量：9H指数：1
供职机构：复旦大学上海医学院更多>>
发文基金：上海市科学技术发展基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇逆转
  • 1篇逆转录
  • 1篇逆转录聚合酶...
  • 1篇全长CDNA
  • 1篇转录
  • 1篇酶链反应
  • 1篇聚合酶
  • 1篇聚合酶链反应
  • 1篇克隆
  • 1篇合酶
  • 1篇肝炎
  • 1篇肝炎病毒
  • 1篇丙型
  • 1篇丙型肝炎
  • 1篇丙型肝炎病毒
  • 1篇病毒

机构

  • 1篇复旦大学上海...

作者

  • 1篇胡芸文
  • 1篇兰水云
  • 1篇袁正宏
  • 1篇吴瑛
  • 1篇毛红霞

传媒

  • 1篇中华实验和临...

年份

  • 1篇2004
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
丙型肝炎病毒全长cDNA模板的构建及鉴定被引量：9
2004年
目的　构建具有功能的丙型肝炎病毒 (HCV)全长cDNA克隆。方法　应用长模板RT PCR法扩增 1份上海地区HCV感染者血清的RNA(基因型为 1b) ,分段扩增、融合拼接成 9 2kb的基因片段 ,克隆入含有HCV基因两端非编码区序列的载体作为模板。为检测此过程是否发生对特定变异株的选择 ,分析 4个独立克隆的HVR1序列。对原核细胞中表达的HCV核心蛋白、NS3蛋白酶及解旋酶 ,以蛋白印迹实验确证其免疫反应性。并构建NS3 4A SEAP表达系统检验NS3的蛋白酶活性。结果　获得丙型肝炎病毒全长cDNA模板。不同克隆间HVR1序列存在较大差异 ,提示长模板RT PCR所制备HCVcDNA具有HCV基因准种 (quasispecies)的特性。该模板编码基因在原核细胞内得到高效表达 ,并具有良好的免疫反应性。在NS3 4A SEAP表达系统内 ,NS3可切割、释放其下游的SEAP ,具有蛋白酶活性。结论　本工作为构建全长功能性HCVcDNA模板及感染性克隆奠定了基础。
毛红霞胡芸文吴瑛兰水云袁正宏
关键词：丙型肝炎病毒全长CDNA克隆逆转录聚合酶链反应
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