周琳
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结核感染者外周血单个核细胞NLRP3的表达研究被引量：6
- 2016年
- 目的检测NLRP3mRNA在潜伏期、活动期结核患者及健康者中的表达差异,探讨NLRP3在结核感染中的作用。方法选取10例活动期结核患者(活动期结核组),20例潜伏期结核患者(潜伏期结核组),20例健康体检者(正常对照组)作为研究对象,利用反转录PCR方法检测各组研究对象外周血单个核细胞中NLRP3mRNA的表达水平,并比较各组间的差异。结果活动期结核组NLRP3 mRNA表达量是正常对照组的3.71倍,差异有统计学意义(P<0.05);潜伏期结核组NLRP3 mRNA表达量是正常对照组的1.60倍,差异无统计学意义(P>0.05)。结论NLRP3可能参与了结核活动期的炎症反应过程,为进一步研究其在抗结核感染中的作用打下了基础。
- 张燕周琳唱凯陈敏邓少丽陈鸣
- 关键词：结核病外周血单个核细胞NLRP3
- 不对称重组酶介导扩增结合分子信标检测金黄色葡萄球菌方法的建立与应用被引量：1
- 2017年
- 目的建立一种基于重组酶介导扩增技术（RAA）与分子信标相结合的病原菌恒温快速检测方法。方法方法学的建立。通过金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）所对应的基因设计相应引物及分子信标探针，不断调整引物浓度比例以确定最佳引物浓度比来进行不对称扩增，利用不对称重组酶介导扩增并与分子信标探针杂交，通过琼脂糖凝胶电泳及荧光采集观测结果。将阳性质粒以10倍的梯度稀释，检测该方法的灵敏度。利用该RAA杂交法检测大坪医院检验科微生物室保存的2016年12月的72株包含金黄色葡萄球菌及葡萄球菌属其他种细菌的菌株，以检测该方法的特异性。在特异性实验基础上添加我室保存的2016年12月的39例其他菌株进行Kappa一致性检验及临床诊断效能评价。结果当限制性引物与非限制性引物的浓度比例在1∶20时，产生单链DNA（ssDNA）的效率最高。不对称RAA扩增与分子信标探针杂交的效率明显高于对称扩增。该方法的灵敏度为20拷贝/μl。RAA杂交法能够将金黄色葡萄球菌与葡萄球菌属其他菌株区分，与传统金标准相比Kappa为0.860，一致性良好。经过对111株菌株的检测，该方法敏感度为92.5%（37/40），特异度为97.2%（69/71），阳性预测值为94.9%（37/39），阴性预测值为95.8%（69/72），阳性似然比为33.04，阴性似然比为0.077，约登指数为0.897。与传统金标准相比，Kappa为0.902，两种方法一致性良好。结论通过对不对称RAA扩增条件的优化及与分子信标探针的结合，建立了RAA杂交技术检测细菌DNA的新方法，为恒温扩增应用于临床奠定基础。
- 周琳徐欢杨成张峰领罗杰蒋文斌汪超唱凯鲁卫平陈鸣
- 关键词：金黄色葡萄球菌核酸扩增技术分子探针
- 铜绿假单胞菌lasR基因反义肽核酸序列筛选及其抑制生物被膜形成的研究被引量：2
- 2017年
- 目的筛选靶向铜绿假单胞菌lasR基因的反义肽核酸序列,探讨其对铜绿假单胞菌的生物被膜形成能力的影响。方法针对铜绿假单胞菌lasR基因设计4条反义寡核苷酸序列,利用斑点杂交筛选出与lasR基因结合最佳的反义寡核苷酸序列,以此合成与穿膜肽连接的肽-肽核酸序列。分别用不同浓度的肽-肽核酸导入铜绿假单胞菌生物被膜模式菌PAO1中,测定不同时相点细菌生长光密度[D(600)]值并进行菌落计数,观察肽-肽核酸对其生长的抑制作用。利用光学显微镜和扫描电镜观察生物被膜形成情况。q PCR方法检测lasR mRNA表达。结果斑点杂交实验结果显示:4条反义寡核苷酸序列中3条有杂交信号产生,其中第1条序列信号最强,以此为基础合成反义肽核酸。不同浓度的肽-肽核酸对铜绿假单胞菌表现出不同程度的体外抗菌活性,且随着浓度增加,抗菌活性增强。结论有效筛选出高效反义核苷酸序列,经筛选出的靶向铜绿假单胞菌lasR基因的反义肽核酸对铜绿假单胞菌的生长及生物被膜形成能力有明显抑制作用,同时抑制lasR mRNA的表达。
- 张峰领安琳李进李发科徐欢罗杰杨成蒋文斌雷国勤汪超周琳鲁卫平
- 关键词：铜绿假单胞菌反义肽核酸生物被膜
