王雪娟
- 作品数:3 被引量:10H指数:2
- 供职机构:南方医科大学第五附属医院更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 慢病毒介导shRNA抑制垂体腺瘤PTTG基因表达及对细胞增殖和侵袭能力的影响被引量:5
- 2016年
- 【目的】观察慢病毒介导的sh RNA对GH3和At T20型垂体腺瘤中垂体肿瘤转化基因(PTTG)表达的抑制作用,以及对肿瘤细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制探讨。【方法】筛选最佳抑制效果的干扰序列构建PTTG基因sh RNA的慢病毒表达载体,转染GH3和At T20型垂体腺瘤细胞。流式细胞仪分析细胞转染效率,RT-PCR和Western blot检测细胞PTTG基因m RNA和蛋白的表达水平,MTT和Ed U法分别检测靶向PTTG的sh RNA对肿瘤细胞增殖生长的抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期变化。Transwell小室检测细胞侵袭能力的变化,基因芯片筛查干扰后的基因表达谱差异并进行生物信息学分析。【结果】细胞转染表达PTTG基因sh RNA的慢病毒载体后,能显著抑制肿瘤细胞PTTGm RNA和蛋白的表达,与对照组相比有统计学差异(P<0.05),细胞的增殖能力受到明显抑制,且增殖抑制效应具有时间依赖性;细胞生长显著变慢,G0/G1期细胞比例显著增高,克隆形成能力下降,细胞侵袭能力也显著减弱,均与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。PI3K等信号通路的基因表达也发生显著变化。【结论】慢病毒介导sh RNA沉默PTTG基因表达可能是通过对PI3K信号通路的调控,抑制了GH3和At T20垂体腺瘤细胞的生长,抑制肿瘤细胞的体外增殖和侵袭能力。
- 沈云龙安泰学罗巧灵李和珍杨勇王雪娟刘丽红王芳
- 关键词:短发夹RNA垂体腺瘤垂体肿瘤转化基因
- 胶质瘤中MicroRNA-374的表达及其临床意义被引量:2
- 2016年
- 目的研究人脑胶质瘤组织中微小RNA-374(microRNA-374,miR-374)的表达及其与临床病理特征之间的关系,探讨其在胶质瘤患者中的临床意义。方法采用RT-PCR法检测85例胶质瘤和30例正常脑组织中的miR-374表达;Kaplan-Meier法分析胶质瘤患者的总生存期;观察慢病毒过表达miR-374载体转染U251和U87细胞株后对肿瘤细胞增殖的影响。结果胶质瘤组织中miR-374的表达明显下调;miR-374的表达与WHO分级(P=0.008)、Karnofsky评分(KPS)(P=0.021)和生存时间(P=0.01)显著相关;Kaplan-Meier分析结果表明,miR-374低表达与高表达患者总生存期(P<0.01)的差异有统计学意义,miR-374低表达的患者预后较差。多因素分析显示胶质瘤中miR-374的差异表达是预测胶质瘤患者预后的独立危险因素(HR:5.75,95%CI:3.56-6.93,P=0.005)。体外实验表明,过表达miR-374可以显著抑制胶质瘤细胞的增殖。结论 miR-374在胶质瘤中是低表达的,与胶质瘤患者预后显著相关;miR-374高表达可抑制胶质瘤细胞的增殖。
- 沈云龙安泰学李和珍杨勇王雪娟刘丽红
- 关键词:胶质瘤U251细胞株增殖
- miRNA-374靶向PTTG基因抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力被引量:4
- 2017年
- 【目的】研究微小RNA-374(microRNA-374,miR-374)对胶质瘤细胞增殖和侵袭能力的影响,并探讨其可能的机制。【方法】观察慢病毒过表达miR-374载体转染U251和U87细胞株后对肿瘤细胞增殖和侵袭能力的影响;双荧光素酶报告基因检测miR-374与PTTG基因的靶标关系;Western blot检测PTTG基因下游相关信号通路蛋白的表达水平。【结果】过表达miR-374可以显著抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力。双荧光素酶报告实验证实PTTG基因是miR-374的潜在靶基因,其下游的bFGF和PI3K信号通路等关键基因的表达也相应下调。【结论】miR-374高表达可通过靶向PTTG基因抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭。这一机制有可能为胶质瘤的基因治疗提供新的策略。
- 张媛沈云龙崔玉婷李和珍杨勇王雪娟刘丽红
- 关键词:胶质瘤PTTG