- 一种基于CRISPR/Cas9技术介导绒山羊VEGF基因定点敲入的方法
- 本发明利用CRISPR/Cas9系统介导完成绒山羊VEGF基因定点敲入,其是依据绒山羊的CCR5基因序列,构建基于CRISPR‑Cas9系统的gRNA表达载体及VEGF同源重组载体。然后将优化后的三种载体共同转入绒山羊胎...
- 梁红宇刘东军梁浩呼啸王辉王志刚
- 文献传递
- 一种基于CRISPR/Cas9技术介导绒山羊VEGF基因定点敲入的方法
- 本发明利用CRISPR/Cas9系统介导完成绒山羊VEGF基因定点敲入,其是依据绒山羊的CCR5基因序列,构建基于CRISPR‑Cas9系统的gRNA表达载体及VEGF同源重组载体。然后将优化后的三种载体共同转入绒山羊胎...
- 梁红宇刘东军梁浩呼啸王辉王志刚
- 文献传递
- CRISPR/Cas9技术介导绒山羊VEGF基因定点整合的研究
- 内蒙古阿尔巴斯白绒山羊是我国一种独特的生物资源,经过长期的自然选择和人工选育成为目前世界上产绒量最高、绒纤维品质最好的品种之一。提高绒山羊产绒量,培育高产、优质的绒山羊新品种是绒山羊育种工作目标。本实验室已获得转VEGF...
- 梁红宇
- 关键词:绒山羊VEGF基因体细胞核移植技术显微注射
- 文献传递
- 阿尔巴斯绒山羊胎儿皮肤干细胞的分离培养及鉴定被引量:2
- 2016年
- 该研究旨在体外分离培养和鉴定阿尔巴斯绒山羊胎儿皮肤干细胞,为绒毛生长相关研究提供实验材料。以阿尔巴斯绒山羊胎儿皮肤为样本,酶消化和IV型胶原黏附法获得较纯的皮肤干细胞。通过形态学观察、生长曲线、细胞免疫组化、实时定量PCR和体外分化等方法探讨皮肤干细胞体外培养方法和生物学特性。结果发现,皮肤干细胞形态较小,铺路状生长,折光度高且黏附能力强,在体外培养至20代未出现明显细胞形态变化。免疫组化染色显示,胎儿皮肤干细胞阳性表达Krt15、CD34和Itgβ1。Krt15、CD34和Itgβ1 m RNA相对水平分别为绒山羊角质细胞的5.56、24.37和7.22倍(P<0.01)。体外成骨诱导Von Kossa染色呈阳性;成软骨诱导阿尔新蓝染色呈阳性;成肌诱导后,Hoechst 33342染色观察到细胞融合的发生,Myo G免疫组化染色呈阳性。结果表明,成功建立了阿尔巴斯绒山羊胎儿皮肤干细胞系。
- 乃门塔娜梁红宇仓明郭旭东刘东军旭日干
- 关键词:阿尔巴斯绒山羊皮肤干细胞实时定量PCR体外分化