吴凯峰
- 作品数：9 被引量：15H指数：2
- 供职机构：遵义医学院第三附属医院更多>>
- 发文基金：贵州省科学技术基金贵州省省长基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 肺炎链球菌及其中的荚膜多糖合成方法和SPD-0064基因编码产物及该编码产物的用途
- 本专利公开了医药生物技术领域中的肺炎链球菌，包括肺炎链球菌血清型菌株，所述肺炎链球菌血清型菌株中存在整体缺失、部分缺失、序列点突变或序列点缺失的一种或多种的荚膜多糖生成抑制基因。荚膜多糖生成抑制基因存在部分缺失、序列点突...
- 吴凯峰尹一兵张雪梅徐红梅
- 文献传递
- 肺炎链球菌LytR蛋白影响细菌生长和磷壁酸的合成
- 2019年
- 为了初步明确lytR基因的保守性以及探讨LytR蛋白在肺炎链球菌中的生物学功能。本研究利用PCR和测序方法分析lytR基因20种不同序列型肺炎链球菌临床分离株的保守性;利用Western blotting技术分析lytR在细菌不同生长阶段的表达情况;随后,利用红霉素片段替代lytR基因构建D39ΔlytR缺陷菌株,通过生长曲线分析、电镜下形态观察、以及磷壁酸含量测定揭示LytR蛋白在细菌生长、细菌形态以及磷壁酸合成中的作用。研究发现20种不同序列型肺炎链球菌临床菌株的lytR基因序列一致性>99.3%;Western blotting结果显示lytR在细菌不同生长阶段稳定表达;D39ΔlytR缺陷株生长明显变缓,细菌表现为不成熟自溶;D39ΔlytR全菌磷壁酸含量显著减少,而培养基上清中的磷壁酸含量显著增多。本研究表明lytR基因非常保守,在肺炎链球菌不同生长阶段均有表达,并可能通过连接酶的作用影响细菌生长和参与肺炎链球菌磷壁酸的合成,有望成为一种新的抗生素和药物靶点。
- 叶唯洁徐红梅张竞辉张雪梅尹一兵吴凯峰
- 关键词：肺炎链球菌
- 过敏毒素C3a在健康人气道上皮间质转化中的作用研究
- 2017年
- 目的观察过敏毒素C3a在正常人气道上皮间质转化(EMT)中的作用及其相关分子机制。方法培养正常人气道上皮细胞BEAS-2B,分为对照组,重组人(rhC3a)刺激组,rhC3a+C3a受体拮抗剂(C3aRA)的拮抗组,通过显微镜观察细胞形态学变化情况;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力;ELISA检测细胞上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)的蛋白表达情况;RT-PCR检测C3a受体(C3aR)和EMT相关指标mRNA变化情况;Western blot检测C3aR、Smad2/3、p38-MAPK蛋白表达情况。结果 30、50nmol/L rhC3a刺激组细胞形态由正常鹅卵石样变为梭形,加入1μmol/L C3aRA拮抗组细胞形态较对照组比较无明显改变。50nmol/L rhC3a刺激组的细胞增殖较对照组降低(P=0.047);30nmol/L rhC3a刺激组中TGF-β1蛋白水平较对照组升高(P<0.05),C3aR mRNA及蛋白水平较对照组均升高(P<0.05),p-Smad2/3、p-p38-MAPK蛋白水平较对照组升高(P<0.05),加入1μmol/L C3aRA可以降低以上指标表达(P<0.05)。30nmol/L rhC3a刺激组中α-平滑肌肌动蛋白、N-钙黏蛋白mRNA表达上调,E-钙黏蛋白mRNA表达下降,加入1μmol/L C3aRA可以拮抗这一过程(P<0.05)。结论过敏毒素C3a通过结合C3aR,诱导正常人气道上皮细胞发生EMT,其机制可能是通过激活Smad2/3、p38-MAPK通路来参与。
- 李竹刘代顺吴凯峰丁宏伟刘建英
- 关键词：气道重塑纤维化上皮间质转化
- 孕激素诱导封闭因子在先兆流产中的作用被引量：5
- 2018年
- 目的通过研究先兆流产患者用孕激素治疗前后体内孕激素诱导封闭因子、孕激素、白介素2及白介素10在静脉血中的表达情况,了解PIBF对妊娠时Th1/Th2平衡的影响,探讨PIBF在先兆流产中的作用机制。方法选取遵义医学院第三附属医院2016年5月至2017年5月门诊收治的40例先兆流产患者作为研究组,选取同孕期门诊就诊的正常妊娠孕妇为对照组。研究组又分为黄体酮组和地屈孕酮组,黄体酮组20例给予黄体酮治疗,地屈孕酮组20例给予地屈孕酮治疗。对照组包含40例相同孕期的正常妊娠状态的妇女。应用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测研究组及对照组治疗前后静脉血中的P、PIBF、IL-2及IL-10的表达情况。结果 (1)研究组治疗后血清P、PIBF、IL-10较治疗前明显升高,IL-2较前明显降低,差异均有显著性(P<0.05)。(2)研究组PIBF和IL-2呈负相关(r=0.421,P<0.05),和IL-10呈正相关(r=0.439,P<0.05)。(3)研究组不同孕激素治疗对PIBF的影响差异明显(P<0.05),地屈孕酮对PIBF的调控效果强于黄体酮。结论 (1)PIBF表达水平下调可影响Th1/Th2平衡状态向Th1细胞因子方向偏移,在孕激素保胎处理后,PIBF水平上调显著,Thl/Th2平衡状态向Th2细胞因子偏移明显,表明孕激素可以有效减少先兆流产的可能性。(2)孕酮通过影响孕妇体内PIBF的水平,保护胚胎,在一定程度上减免先兆流产的可能。孕早期孕妇体内PIBF水平的检测可用于评估孕激素的治疗效果和先兆流产的风险判断。
- 伍小智刘晓云吴凯峰罗利梅
- 关键词：先兆流产TH1/TH2平衡
- 过敏毒素C3a及白细胞介素-32在慢性阻塞性肺疾病气道炎症中的作用被引量：6
- 2016年
- 目的探讨过敏毒素C3a及白细胞介素-32(IL-32)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道炎症中的作用。方法纳入COPD稳定期患者30例,COPD急性加重期(AECOPD)患者30例,健康对照者10例。收集受试者痰液及静脉血,应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测痰细胞裂解液及静脉血细胞裂解液中C3和IL-32 mRNA的表达,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测痰上清液及静脉血清中C3a和IL-32蛋白的表达,分析C3a与IL-32、IL-32与COPD患者肺功能损伤的相关性。结果 AECOPD患者痰细胞裂解液及静脉血细胞裂解液中C3和IL-32 mRNA水平显著升高,痰上清液及静脉血清中C3a和IL-32蛋白水平显著升高。AECOPD患者静脉血清中IL-32蛋白浓度与C3a蛋白浓度呈显著正相关,IL-32蛋白浓度与1 s用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比(FEV1%预计值)及FEV1/用力肺活量(FVC)呈显著负相关。结论 C3a通过诱导IL-32促进COPD气道炎症,加重肺功能损害,这将为COPD的诊断和治疗提供有效的靶位。
- 钟城垚刘建英刘代顺吴凯峰周定群张巍黄贵川李竹唐洪波
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病
- 尼达尼布减轻脂多糖诱导的小鼠急性呼吸窘迫综合征后肺纤维化被引量：2
- 2016年
- 目的：探讨尼达尼布对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）所诱导的小鼠急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）后肺纤维化的作用。方法：体外实验中,以LPS（O55：B5）刺激C57BL/6小鼠肺成纤维细胞转化为肌成纤维细胞,以不同浓度尼达尼布干预,半定量PCR法检测转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、α-平滑肌激动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、成纤维细胞生长因子-2（fibroblast growth factor-2,FGF-2）、血小板衍生生长因子（platelet-derived growth factor,PDGF）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）mRNA的表达水平;ELISA法检测细胞上清液中TGF-β1蛋白的含量。体内实验中,将SPF级6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为0.9%Na Cl溶液对照组、LPS（O111：B4）模型组（实验d 1气管内滴入LPS,5 mg·kg-1）、LPS＋尼达尼布早期干预组（尼达尼布于实验d 7~d 21,50 mg·kg-1·d-1,ig）、LPS＋尼达尼布晚期干预组（尼达尼布于实验d 14~d 28,50 mg·kg-1·d-1,ig）。实验d 28处死各组小鼠,收集小鼠支气管肺泡灌洗液（brochoalveolar lavage fluid,BALF）,计数炎性细胞总数并分类。HE染色及Masson染色观察肺组织炎性改变及肺纤维化变化;碱性水解法检测肺组织中羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）含量;Western blotting检测肺组织中α-SMA和I型胶原的表达。结果：体外实验中,尼达尼布可抑制TGF-β1,α-SMA,FGF-2,PDGF和VEGF mRNA及TGF-β1蛋白的表达。体内实验中,尼达尼布干预能显著减轻小鼠BALF中炎性细胞总数及各种炎性细胞数量。HE染色及Masson染色结果显示,LPS可诱导小鼠ARDS后肺纤维化形成,而尼达尼布早期和晚期干预均能不同程度减轻小鼠肺纤维化程度,均可降低肺组织中Hyp,α-SMA和I型胶原的含量,且早期干预效果要优于晚期干预效果。结论：尼达尼布可抑制LPS诱导的小鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细
- 黄贵川刘代顺吴凯峰张巍龚玲朱红兰唐洪波钟城垚
- 关键词：急性呼吸窘迫综合征肺纤维化脂多糖
- 肺炎链球菌及其中的荚膜多糖合成方法和SPD-0064基因编码产物及该编码产物的用途
- 本专利公开了医药生物技术领域中的肺炎链球菌，包括肺炎链球菌血清型菌株，所述肺炎链球菌血清型菌株中存在整体缺失、部分缺失、序列点突变或序列点缺失的一种或多种的荚膜多糖生成抑制基因。荚膜多糖生成抑制基因存在部分缺失、序列点突...
- 吴凯峰尹一兵张雪梅徐红梅
- PPARγ在肺纤维化中的研究进展被引量：2
- 2016年
- 肺纤维化是病因各异肺间质疾病的共同结局，以肺泡持续性损伤、成纤维细胞（fibroblast，FB）增殖及大量细胞外基质（extracellularmatrix。ECM）沉积，肺组织反复破坏、修复、最终造成肺组织中大量胶原沉积为病理特点的一类疾病。特发性肺纤维化（idiopathicpulmonaryfibrosis，IPF）是特发性间质性肺炎最常见的类型，发病率、患病率逐年增加，死亡率高。确诊后的平均生存时间3—5年，
- 唐洪波吴凯峰王茜唐洪焱刘代顺
- 关键词：特发性肺纤维化PPARΓ特发性间质性肺炎肺间质疾病胶原沉积病理特点
- 咖啡因对早产鼠高氧肺损伤的影响及其与p38丝裂原活化蛋白激酶信号途径关系的研究
- 2019年
- 目的探讨咖啡因干预对早产鼠高氧肺损伤的影响及其与p38丝裂原活化蛋白激酶(motigen-activated protein kinase,MAPK)信号途径的关系。方法将60只Wistar早产鼠按随机数字表法分为4组(n=15):空气+生理盐水组(A+N组)、空气+咖啡因组(A+C组)、高氧+生理盐水组(H+N组)、高氧+咖啡因组(H+C组),其中H+N组和H+C组持续暴露于高氧中(氧浓度60%~70%),A+C组和H+C组于早产鼠出生后每日腹腔注射咖啡因29 mg/(kg·d),A+N组和H+N组腹腔注射同等体积的生理盐水。各组分别于第3、7、14天时随机对每组5只早产鼠肺组织取材,光镜下观察肺组织病理改变、辐射状肺泡计数(radiated alveolar count,RAC)、肺组织胶原含量;检测肺湿/干重(wet/drg ratio,W/D)比值;二步法免疫组织化学检测p38MAPK在肺组织中的分布;Western blot检测磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白含量变化。结果与A+N组、A+C组相比,H+N组和H+C组早产鼠在第3、7、14天肺组织均可见不同程度炎症改变,高氧暴露时间越长,改变越明显,在第14天时可见肺纤维化;咖啡因干预后有一定改善。H+N组和H+C组早产鼠RAC值较A+N组、A+C组显著降低(P<0.05),W/D比值及肺组织胶原含量显著升高(P<0.05),咖啡因干预后有明显改善(P<0.05)。二步免疫组织化学法结果显示H+N组和H+C组早产鼠肺组织中p-p38MAPK阳性细胞数表达增多,分布广泛;咖啡因干预后p-p38MAPK阳性细胞数减少;Western blot结果显示,H+N组和H+C组早产鼠肺组织中p-p38MAPK蛋白含量明显高于A+N组和A+C组(P<0.05),咖啡因干预后p-p38MAPK蛋白含量降低(P<0.05)。结论高氧可通过激活p38MAPK信号途径促进肺纤维化形成;咖啡因通过阻断p38MAPK的表达而减轻高氧暴露下肺组织纤维化,进而起保护作用。
- 宋亚楠杨义苟恩进宋惠玲李青王欢张翔吴凯峰刘晓丽郑兴惠黄波
- 关键词：高氧肺损伤咖啡因P38丝裂原活化蛋白激酶早产鼠
