黄红丽
- 作品数：5 被引量：27H指数：4
- 供职机构：宁波大学海洋学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省科技厅项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 大黄鱼microRNA荧光定量PCR中内参基因的选择与评价被引量：8
- 2017年
- 为筛选适用于大黄鱼miRNA研究的内参基因,选取饥饿试验组(EG)中饥饿21d及正常投喂组(CG,对照)的大黄鱼肌肉组织进行miRNA高通量测序,初步筛选得到稳定表达的6个miRNA:miR-23a-3p,miR-4508,miR-1961,miR-1297,miR-1956-3p和Let-7。采用实时荧光定量PCR法检测这6个miRNA和3个传统的内参基因(U6,5S和18S)在大黄鱼6种组织(肌肉、肝脏、肾、脾、脑和心脏)以及不同饥饿时间段的肌肉组织中的表达,并利用Ge Norm,Best Keeper以及Norm Finder对数据进行分析。结果表明,miRNA的表达稳定性优于传统内参基因。在CG组大黄鱼不同组织中,最稳定单内参基因是miR-23a-3p,最佳内参基因组合为miR-23a-3p和Let-7。在不同饥饿时间的EG组大黄鱼肌肉组织中,最稳定单内参基因是miR-23a-3p,最佳内参基因组合为Let-7和miR-1961。本试验结果为研究大黄鱼miRNA时内参基因的选择提供了参考。
- 赵亚运张玉曹明月黄红丽李娟薛良义
- 关键词：大黄鱼MICRORNA内参基因实时荧光定量PCR
- 饥饿对大黄鱼肌肉组织脂肪酶表达及活性的影响
- 黄红丽薛良义沈伟良吴雄飞
- 饥饿胁迫对大黄鱼激素敏感性脂肪酶和乙酰辅酶A羧化酶mRNA表达及酶活性的影响被引量：6
- 2018年
- 激素敏感性脂肪酶(hormone sensitive lipase,HSL)和乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase,ACC)是脂代谢的关键酶,肌肉和肝脏是鱼类脂代谢的主要场所。为研究饥饿过程中这两种酶的作用,本实验采用实时荧光定量PCR技术以及ELISA技术检测了在35 d饥饿过程中这两种酶在大黄鱼肌肉和肝组织中mRNA表达水平和酶活性的变化。结果显示,饥饿胁迫显著降低大黄鱼肌肉和肝组织中脂肪含量,以及脂肪合成关键酶ACC mRNA表达水平(P<0.05);显著提高脂肪分解关键酶HSL mRNA表达水平(P<0.05)。饥饿胁迫对肌肉和肝组织中HSL和ACC酶活性均有显著影响(P<0.05),肌肉和肝组织HSL(相关系数r分别为0.598 2和0.539 6)以及肌肉组织ACC酶活性(r=0.677 7)与对应mRNA表达水平呈中度正相关(0.5
- 钱宝英钱宝英黄红丽李娟曹明月张玉薛良义
- 关键词：大黄鱼激素敏感性脂肪酶乙酰辅酶A羧化酶MRNA表达酶活性
- 蓝点马鲛mstn克隆及表达分析被引量：7
- 2015年
- 利用同源克隆和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了蓝点马鲛肌肉生长抑制素基因(mstn),并分析了mstn的结构特征和亲缘关系。克隆的蓝点马鲛mstn共3870 bp,包括3个外显子1131 bp和2个内含子1201 bp。外显子Ⅰ379 bp,内含子Ⅰ374 bp,外显子Ⅱ371 bp,内含子Ⅱ827 bp,外显子Ⅲ381 bp,5'UTR 108 bp,3'UTR 1430 bp。3'UTR含有加尾信号AATAAA。mstn共编码376个氨基酸包括信号肽(1 aa^22 aa)、TGF-β前肽区域(37 aa^257 aa)和TGF-β功能域(282 aa^376 aa)。在内含子Ⅱ和3'UTR发现微卫星序列,分别为(CA)_5和(CA)_(10)TG(CA)_6CT(CA)_(10)。蓝点马鲛MSTN具有脊椎动物MSTN的共同特征,含一个蛋白酶水解位点RARR和9个保守的半胱氨酸残基。脊椎动物MSTN氨基酸序列的亲缘关系分析发现,蓝点马鲛与鳜鱼亲缘关系最近与其他鲈形总目鱼类聚为一簇。以β-actin为内参基因,qPCR分析表明,蓝点马鲛mstn在二龄鱼不同组织表达情况不同,在鳃、肝和肾中表达较高,而在肌肉、肠、胃、脾和性腺中表达量较低。这些结果可为蓝点马鲛肌肉生长和发育的分子机制研究提供信息。
- 史钧信薛良义黄红丽郑春静
- 关键词：蓝点马鲛肌肉生长抑制素基因克隆RACE
- 饥饿及复投喂对大黄鱼肠型脂肪酸结合蛋白b基因表达的影响被引量：6
- 2016年
- 为从分子水平研究肠型脂肪酸结合蛋白基因(intestines fatty acid-binding protein,IFABP)在鱼类脂代谢中的作用,该研究克隆并获得了1 362 bp大黄鱼I-FABPb基因序列,采用实时荧光定量PCR技术检测了I-FABPb基因在肌肉、肝、肠、胃、性腺、鳃、脑和心脏等8个不同组织中的表达情况,研究了饥饿和复投喂对大黄鱼I-FABPb基因在肠、肌肉和肝中表达的影响。结果显示,I-FABPb基因在8个被检测组织中均有表达,但在肠中表达量最高。饥饿对大黄鱼肠、肌肉和肝中I-FABPb基因表达影响显著,均呈现了先上升后下降的趋势,但在肠中变化最显著;长期饥饿后复投喂,I-FABPb基因在肠、肌肉和肝中的表达量均显著升高(P<0.05),且显著高于饥饿0 d的水平(P<0.05)。结果表明,饥饿及复投喂明显影响大黄鱼的脂肪代谢,I-FABPb在肠道脂肪代谢中起重要作用。
- 黄红丽薛良义王俊
- 关键词：大黄鱼饥饿
