王睿男
- 作品数：26 被引量：59H指数：5
- 供职机构：中国动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划国家肉羊产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- PRRSV GP5和M抗原中和表位的融合表达与纯化以及间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2022年
- 为建立检测猪血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体的间接ELISA方法,分析了PRRSV结构蛋白GP5和M的二级结构抗原指数、抗原性、亲水性、表面可及性以及潜在中和表位等参数,选取GP5的47~61、143~156和186~199位氨基酸,M蛋白的63~70、133~146和156~169位氨基酸作为免疫原,构建带接头序列的GP5/M中和表位融合表达质粒;通过优化大肠杆菌表达和蛋白纯化条件,免疫印迹鉴定GP5/M特异抗原,获得了可溶性的GP5/M中和表位融合蛋白。基于纯化的GP5/M中和表位融合抗原,建立了检测猪血清中PRRSV中和抗体的间接ELISA方法。采用建立的间接ELISA方法对6种其他猪源病原阳性血清进行检测,结果均无交叉反应;敏感性试验显示,将血清中和试验鉴定的PRRSV阳性对照血清稀释到1:12800时仍呈阳性;重复性试验显示,批内重复变异系数为2%~10%,批间重复变异系数小于15%;符合性试验显示,同时用建立的间接ELISA方法和血清中和试验对420份临床血清样品进行检测,结果符合率为95.24%。结果表明,该方法操作简单、耗时短,敏感性、特异性、重复性及符合性均良好,具有较好的应用推广价值。
- 李雷斌李晓霞王睿男周智刘玉良赵柏林孙航冯冰陈玲王传彬李义平孙雨
- O型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法的建立被引量：4
- 2020年
- 为建立动物血清中O型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,通过获得的O型口蹄疫病毒VP1融合蛋白与相关单克隆抗体,制备了O型口蹄疫病毒抗体竞争化学发光检测试剂盒。结果表明:该方法能够定量检测猪、牛、羊血清中的O型口蹄疫病毒VP1蛋白抗体,与其他偶蹄类动物病原无交叉反应,具有良好的重复性;对该方法的特异性指标、敏感性指标进行了验证,同国产O型口蹄疫抗体检测试剂盒进行了比较,阳性样品符合率92.62%,阴性样品符合率92.14%,总符合率92.45%;重复性试验组内与组间变异系数分别低于10%和15%。综上,该研究建立的O型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法特异性高、敏感性强,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。
- 孙雨宋晓晖肖颖王睿男李秀梅任雪建李雪刚魏巍杨林王传彬
- 关键词：O型口蹄疫病毒化学发光免疫分析
- 小反刍兽疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法的建立被引量：3
- 2020年
- 为了建立动物血清中的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)抗体化学发光免疫分析检测方法,采用PPRV N融合蛋白与相应单克隆抗体对化学发光抗体检测方法进行了研究。结果显示:建立的检测方法能够特异性地定量检测羊血清中的PPRV N蛋白抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的动物病原无交叉反应,组内与组间变异系数分别低于10%和15%,具有良好的重复性;对该方法的特异性指标、敏感性指标进行了验证,与法国IDVET公司的PPRV抗体检测试剂盒进行比较,阳性样品符合率为95.02%,阴性样品符合率为82.08%,总符合率为90.33%。结果表明:建立的PPRV抗体化学发光免疫分析检测方法,特异性高、敏感性强,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。
- 孙雨宋晓晖肖颖王睿男李秀梅任雪建李雪刚魏巍杨林王传彬
- 关键词：小反刍兽疫病毒化学发光免疫分析
- 一种评估鸡蛋营养价值的组合物及应用和评估方法
- 本发明提供一种评估鸡蛋营养价值的组合物，所述组合物包含异亮氨酸、酪氨酸和/或维生素B1；利用所述组合物评估鸡蛋营养价值的方法，所述方法是通过检测鸡蛋中是否含有异亮氨酸、酪氨酸和/或维生素B1，或者异亮氨酸、酪氨酸和/或维...
- 田亚平王海侯东军雷春娟刘勇军王睿男姜艳彬
- 文献传递
- 动物疫病防控净化新型监测模式——现场快速诊断检测与远程监测云平台的构建与应用被引量：8
- 2021年
- 当前,我国动物疫病防控领域实验室存在现场实时快速诊断技术落后、检测工作滞后、疫病监测数据不能实时共享分析、重大动物疫病预警不及时、应急处置协调复杂困难等问题。探索建立重大动物疫病远程实时监测预警大数据云平台等新型监测模式是当前动物疫病防控信息化的当务之急。本文介绍了目前动物疫病防控净化的新型监测模式——现场快速诊断检测与远程监测云平台的构建与实际应用情况。上述平台的构建与应用,在创新推动我国重大动物疫病净化工作的同时,重点解决了当前动物疫病防控净化过程中传统实验室检测效率较低、检测数据不能够互联互通等问题,为创新我国动物疫病防控净化新型监测模式提供了借鉴,同时也为我国动物疫病防控净化提供了强而有力的技术支撑。
- 孙雨宋晓晖王瑞红王睿男马英李硕李晓霞孙航冯冰毕一鸣杨林顾小雪王传彬
- 关键词：远程监测
- A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法的建立被引量：7
- 2020年
- 为建立动物血清中的A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,通过获得的A型口蹄疫病毒VP1融合蛋白与相关单克隆抗体建立了A型口蹄疫病毒抗体竞争化学发光检测试剂盒。该方法能够特异性的定量检测猪、牛、羊血清中的A型口蹄疫病毒VP1蛋白抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的偶蹄类动物病原无交叉反应,批内变异系数小于10%,批间变异系数小于15%,具有良好的重复性。对该方法的特异性指标和敏感性指标进行了验证,同国产的A型口蹄疫抗体检测试剂盒进行了比较,阳性样品符合率为92.63%,阴性样品符合率为93.98%,总符合率为93.17%。建立的A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,特异性高,敏感性强,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。
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- 关键词：A型口蹄疫病毒化学发光免疫分析
- 一起猪圆环病毒病的诊断和防治被引量：1
- 2019年
- 猪圆环病毒是猪场常见的免疫抑制病,感染后常导致疫苗免疫效果差,甚至免疫失败。该病常与其他病毒病混合感染,且感染该病后易继发其他细菌性疾病,使疫病控制变得困难与复杂。近年来,猪圆环病毒病单独致病的病例逐渐增多,症状和病理变化更加典型,具有较高的致死率,应引起足够的重视。(一)发病情况北京房山某猪场,存栏210头.
- 李晓霞亢文华原霖王睿男韩焘
- 关键词：症状致死率病毒猪场免疫抑制
- 我国27个省份牛恶性卡他热病毒抗体的血清学检测被引量：2
- 2021年
- 为摸清我国牛恶性卡他热(BMCF)的流行情况,用间接ELISA(i-ELISA)方法对采自新疆、青海和甘肃等27个省(市)养殖场、屠宰场和散养户的2731份牛血清进行了抗体检测。同时对选用试剂盒检测质控血清的性能、检测分析敏感性、检测方法的交叉反应等指标进行了验证。结果表明,共检测出阳性牛血清样本29份,阴性牛血清2702份,阳性率1.06%;按不同牛血清来源统计,牛恶性卡他热的规模场阳性率0.56%,散养户阳性率1.18%,屠宰场阳性率1.93%;按不同饲养方式统计,牛全舍饲饲养方式的牛恶性卡他热病毒抗体阳性率0.41%,半舍饲饲养方式的牛恶性卡他热病毒抗体阳性率0.35%,放牧饲养方式的牛恶性卡他热病毒抗体阳性率0.35%。说明我国养殖的牛群中存在牛恶性卡他热的感染,但感染流行率较低,个别省(市)呈散发状态。
- 孙雨王睿男李晓霞孙航魏巍刘颖昳冯冰陈玲顾小雪王传彬
- 关键词：牛恶性卡他热抗体检测血清学调查
- 利用激光捕获和高效液相色谱质谱对石蜡包埋口腔黏膜癌变组织的蛋白组学分析
- 2015年
- 目的：对口腔黏膜癌变的蛋白组学分析和分子标志物筛选可能为早期诊断、预防和分子治疗提供依据和帮助。方法：对3例石蜡包埋口腔黏膜癌变组织样本,利用激光显微切割技术捕获口腔黏膜癌变上皮和癌旁正常黏膜上皮,抽提组织样本蛋白,利用高效液相色谱-质谱联用进行口腔黏膜癌变组织的蛋白组学分析。结果：激光显微切割-高效液相色谱质谱联用可以分析400~700个多肽序列,鉴定出100~200个蛋白,涉及到细胞骨架、细胞代谢、信号转导、细胞周期等各个方面。结合文献,对其中的角蛋白表达变化进行了分析和验证。结论：显微切割结合高效液相色谱质谱可以实现对石蜡包埋组织的蛋白组学研究,具有较高的重复性和可靠性。角蛋白表达谱的变化验证了该平台的作用和价值,也可作为口腔黏膜癌变的潜在标志物。
- 耿宁王睿男周玉乔张敦房张乐薇吉宁周敏梁新华陈宇李敬陈谦明
- 关键词：石蜡包埋组织蛋白组学激光显微切割
- 口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测方法的建立被引量：4
- 2019年
- 为建立快速定量检测羊血清中口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的方法,本研究通过优化抗原表达条件等步骤,在大肠杆菌原核表达系统中获得了可溶性的3A-3B1-3B2融合蛋白,基于纯化的可溶性融合蛋白建立了口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测试剂盒。该方法能够检测羊血清中的口蹄疫病毒非结构蛋白抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的羊类病原无交叉反应,其组内与组间变异系数分别低于10%和15%,具有良好的重复性。对300份临床血清样品进行检测,同Procheck公司的口蹄疫非结构蛋白抗体试剂盒进行比较,阳性样品符合率为98%,阴性样品符合率为92%,总符合率为95%。重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测方法同传统的ELISA方法相比,特异性相当、敏感性更高,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。
- 孙雨宋晓晖肖颖毕一鸣王睿男蒋菲张存瑞王旭杨林王传彬
- 关键词：口蹄疫病毒非结构蛋白时间分辨荧光免疫分析
