公共文化服务平台

共 1 条记录，以下是 1-1

全选清除导出

排序方式：

用等位基因特异性PCR／限制性片段长度多态性策略构建原发性青光眼致病基因CYP1B1的单倍型被引量：1: 2015年; 目的建立等位基因特异性PCR／限制性片段长度多态性（allele-specific PCR／restriction fragment length polymorphism，AS-PCR／RFLP）法检测原发性先天性青光眼（primary congenital glaucoma，PCG）致病基因CYP1B1常见单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）及其单倍型的方法。方法收集20例原发性先天性青光眼患者和20名正常对照为研究对象，首先经测序筛查SNP位点后，再分别以PCR-RFLP和AS-PCR／RFLP策略构建CYP1B1基因rs10012（S1）和rs1056827（S2）及rs1056836（S3）和rs1056837（S4）位点的单倍型，并对这两种策略进行评价。结果测序共发现4个SNP位点，为第2外显子rs10012G／C（s1）及rs1056827T／G（S2）、第3外显子rs1056836C／G（S3）及rs1056837T／C（S4）。这些位点在PCG患者和正常对照中的分布呈现不同特点，同时存在rs10012（S1）和rs1056827（S2）位点的PCG患者和正常对照分别为10例（50％）和5人（25％）；同时存在rs1056836（S3）和rs1056837（S4）位点的PCG患者和正常对照分别为5例（25％）和2人（10％）；均未发现上述SNP位点单独存在。确定各位点的分布特点后，首先用PCR-RFLP策略构建rs10012（S1）和rs1056827（S2）位点单倍型，显示杂合突变型除出现目的条带外还存在底物条带，虽提示同时存在rs10012（S1）和rs1056827（S2），但仍不能证实存在位点间的连锁；AS-PCR／RFLP构建的结果显示，AS-PCR扩增rs10012（S1）位点获得阳性结果的同时，针对rs1056827（S2）位点的特异性RFLP分析也获得阳性结果。AS-PCR／RFLP对位点rs1056836（S3）和rs1056837（S4）的分析获得了类似的结果。应用AS-PCR／RFLP成功构建了C-GErs10012（S1）-rs1056827（S2）]和G-C[rs1056836（S3）～rs1056837（S4）]两种单倍型。结论应用AS-PCR／RFLP策略成功构建PCG致病基因CYP1B1单倍型，该方法准确高效特异可用于构建遗传性疾病基因的单倍型。; 张爱平李圣杰欧阳琦汤荔王晓蕾吉建曹文俊; 关键词：原发性先天性青光眼 CYP1B1基因单倍型

全选清除导出

共1页<1>

欧阳琦

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

欧阳琦

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈