李玉辉
- 作品数:4 被引量:10H指数:2
- 供职机构:唐山市人民医院更多>>
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- DNA甲基化介导乳腺癌细胞内Mfn2基因沉默
- 2015年
- 目的探讨人乳腺癌细胞中线粒体融合蛋白(mitofusin2,Mfn2)基因沉默的表观遗传学机制。方法实时荧光定量PCR法检测人乳腺癌细胞系MCF-7及乳腺癌组织中Mfn2的mRNA水平;细胞免疫化学染色法和Western印迹法检测其蛋白水平;甲基化特异性PCR法检测Mfn2启动子区甲基化状态;MTF法及流式细胞仪检测细胞增殖及周期。结果与对照组相比,MCF-7细胞及癌旁组织中Mfa2均呈低水平表达(P〈0.05),而Mfn2启动子区均呈高甲基化状态(P〈0.05)。5-氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-2‘deoxycytidine,5-aza.CdR)处理可降低Mfn2启动子区甲基化水平,其表达水平相应增高,细胞生长受到抑制。结论Mfn2启动子区甲基化是其在乳腺癌细胞内沉默的重要的表观遗传学调控机制。
- 李玉凤洪慧李玉辉韩素桂刘艳坤刘岩张景华
- 关键词:乳腺癌基因表达调控DNA甲基化
- Ras-PI3K信号负性调节的H3K56乙酰化促进乳腺癌细胞MCF-7的增殖和迁移能力被引量:1
- 2016年
- Ras蛋白常见的第12、13氨基酸残基突变引起的Ras信号通路异常与人类恶性肿瘤发生相关。然而,Ras致瘤信号通路是否涉及表观遗传学因素尚不明了。本研究旨在阐明人乳腺癌MCF-7细胞中组蛋白H3第56位赖氨酸残基乙酰化修饰(H3K56ac)水平是否受Ras信号通路调控,以及H3K56ac水平对MCF-7细胞增殖和迁移能力的影响。点突变结合基因转染揭示,与野生型比较,第12位氨基酸突变的Ras质粒(p EGFP-H-Ras G^(12V))转染导致MCF-7细胞内H3K56ac水平明显降低。采用可特异激活Ras下游3条通路(Ras-Raf、Ras-Ral GEF和Ras-PI3K)的3种质粒(p EGFP-HRas G^(12V T35S),p EGFP-H-Ras G^(12V E37G)和p EGFP-H-Ras G^(12V Y40C))转染证明,只有转染p EGFP-HRas G^(12V Y40C)的MCF-7细胞内不仅有Ras-PI3K-AKT通路被激活,且与H3K56ac水平下调相伴;而其他两条通路的激活不影响H3K56ac水平。MTT法结合Transwell、软琼脂克隆形成能力实验证明,RasG^(12V Y40C)转染增强细胞增殖、迁移和克隆形成能力。上述结果表明,MCF-7细胞中H3K56ac水平受Ras-PI3K通路的负性调控,但不受Raf和Ral GEF通路影响。Ras-PI3K激活导致的H3K56ac水平降低可增强乳腺癌MCF-7细胞的增殖和迁移能力。总之,这些结果提示,组蛋白H3K56ac是Ras-PI3K致瘤信号通路中的重要成员。Ras信号通路与组蛋白修饰相结合研究将会加深对乳腺癌细胞增殖和迁移调控机制的认识。
- 李玉凤刘岩李玉辉韩素桂刘艳坤张景华
- 关键词:乳腺癌组蛋白乙酰化
- 高压氧联合放化疗同期治疗对胶质瘤术后患者康复疗效的评估被引量:6
- 2013年
- 脑恶性胶质瘤是最常见的颅内肿瘤,目前的治疗方法主要为外科手术切除、放疗和化疗。恶性胶质瘤具有浸润性生长的特点,手术仅能做到次全切除或部分切除,而且肿瘤细胞对放、化疗的敏感性不一,肿瘤复发率高。胶质瘤中微环境的变化,
- 刘志强李玉辉石文建汪洪江张利董伟
- 关键词:颅内肿瘤放化疗高压氧恶性胶质瘤
- 人乳腺癌干细胞中PIWI基因及piRNAs的表达分析被引量:3
- 2016年
- piRNAs是一类与Piwi蛋白家族相互作用的非编码小RNA。Piwi-piRNA通路的主要功能是调控生殖干细胞内转座子沉默,且该通路从果蝇到哺乳动物高度保守。然而,人乳腺癌干细胞中PIWI基因和piRNA的表达尚不明了。本研究采用流式细胞仪分选乳腺癌MCF-7细胞中的侧群细胞(SP)和非侧群的乳腺癌细胞(NSP),采用RT-PCR法及软琼脂克隆形成实验鉴定SP细胞的干细胞特性,采用实时荧光定量PCR法检测SP及NSP细胞中3种PIWI基因(HIWI,HILI和HIWI2)以及4种piRNA(piR-4987,piR-20365,piR-20485和piR-20582)的表达水平。结果显示:SP细胞亚群富含肿瘤干细胞样细胞;HIWI和HIWI2在SP细胞中的水平显著高于NSP细胞(p<0.05);piR-4987、piR-20365和piR-20582在SP细胞中的表达显著高于NSP细胞(p<0.01)。结果提示乳腺癌干细胞内可能存在类似生殖干细胞内的Piwi-piRNA通路,HIWI、HIWI2、piR-4987、piR-20365、piR-20485和piR-20582可能参与调控乳腺癌干细胞的生物学特性。
- 李玉凤刘岩李玉辉韩素桂刘艳坤张景华
- 关键词:乳腺癌干细胞PIRNA