林卫萍
- 作品数：12 被引量：0H指数：0
- 供职机构：广东工业大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学一般工业技术更多>>
- 一种可增强目的基因表达的非融合表达载体及其制备方法
- 本发明公开了一种可增强目的基因表达的非融合表达载体及其制备方法，属于生物工程技术领域。所述的可增强目的基因表达的非融合表达载体，以pETduet‑1质粒为骨架载体，插入pETduet‑1质粒克隆位点1的氨基酸序列如SEQ...
- 王华倩何华锋林丹敏林卫萍王甜甜潘春杏杜志云赵肃清张焜
- 一种具有脑靶向作用的多亚基蛋白质及其制备方法、用途
- 本发明公开了一种具有脑靶向作用的多亚基蛋白质及其制备方法、用途。利用不相容的双质粒系统在大肠杆菌中表达霍乱毒素B亚基，和增强型绿色荧光蛋白、霍乱毒素A亚基、穿膜肽三种蛋白的融合蛋白EGFP-CTA2-TAT，通过PCR扩...
- 王华倩周小芬林卫萍张焜王真史杜志云郑希方岩雄赵肃清黄宝华
- 文献传递
- 一种复方抗癌药物
- 本发明公开了一种复方抗癌药物，旨在提供一种使用浓度低、副毒作用小，对肿瘤尤其是前列腺癌具有良好治疗效果的复方抗癌药物；其技术要点是：该药物由他汀类药物和异硫氰酸酯类药物组成；属于医药技术领域。
- 黄华容郑希杜志云张焜陈萱林卫萍谭伟陈迁
- 文献传递
- 醛还原酶的原核表达、纯化及活性测定
- 2015年
- 醛还原酶(aldehyde reductase AKR1A1,EC1.1.1.2)是醛酮还原酶家族成员,能将有毒醛还原成相应的醇。构建含有组氨酸标签、肠激酶切位点与AKR1A1基因的原核重组表达载体p ET-22b-(His)6-DDDDKAKR1A1。将该质粒转化至Rosetta宿主菌中,通过对表达条件的优化,确定表达条件为0.25 mmol/L IPTG、16℃、80 r/min诱导14 h,重组蛋白以可溶形式表达。采用亲和纯化得到纯度为90%的pel B-(His)6-DDDDKAKR1A1融合蛋白。重组蛋白用肠激酶特异性剪切,经过Ni-NTA、Sephadex G-75再次纯化,得到纯度为98%的野生型AKR1A1蛋白。使用Western blotting和蛋白质序列分析对蛋白质进行鉴定。利用体外酶动学方法测定(His)6-DDDDK-AKR1A1的比活力为(41.3依0.1)U/mg、AKR1A1比活力为(79.4依0.15)U/mg。使用该蛋白建立醛还原酶抑制剂筛选方法,对已上市的13种非甾体抗炎药(non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)的抑制活性进行测定。结果表明奥沙普秦、酮基布洛芬、托芬那酸、氟灭酸等对AKR1A1有很高抑制作用。本研究表达纯化了高比活力的野生型醛还原酶,并应用该酶研究已上市的非甾体抗炎药对AKR1A1的抑制活性,所获得结果为非甾体抗炎药的副作用提供了参考。
- 周小芬王华倩王真史林卫萍杜志云张焜
- 关键词：原核表达非甾体抗炎药
- 一种复方抗癌药物
- 本发明公开了一种复方抗癌药物，旨在提供一种使用浓度低、副毒作用小，对肿瘤尤其是前列腺癌具有良好治疗效果的复方抗癌药物；其技术要点是：该药物由他汀类药物和异硫氰酸酯类药物组成；属于医药技术领域。
- 黄华容郑希杜志云张焜陈萱林卫萍谭伟陈迁
- 多功能嵌合蛋白CTB5/EGFP-CTA2-TAT的纯化与表征
- 穿膜肽(CPPs)是一种阳离子短肽,通过与细胞膜上的负离子相互作用,从而高效将药物递送到细胞内.反式转录激活因子(TAT)是一种常用的穿膜肽,且因为其具有低毒、高效性而成为研究的热点.然而,近年研究表明,TAT输送药物的...
- 林卫萍何华红喻琳陈宣杜志云张焜郑希王华倩
- 不相容双质粒共表达霍乱毒素类似嵌合蛋白
- 2015年
- 霍乱毒素由5个B亚基(CTB)和l个A亚基(CTA)(包括CTA1和CTA2)组成。该蛋白结构可帮助有毒的CTA1分子进入细胞。本研究拟利用原核不相容双质粒共表达系统获得霍乱毒素类似嵌合蛋白,用于大分子蛋白质黏膜给药的载体研究。将CTB基因片段克隆至载体p ET-28a中,获得重组质粒p ET-28a-CTB;以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)代替有毒的CTA1,在CTA2序列N端融合穿膜肽(TAT),将EGFP-CTA2-TAT基因克隆至载体p ET-22b(+)中,获得重组质粒p ET-22b-EGFP-CTA2-TAT。利用p ET-28a-CTB和p ET-22b-EGFP-CTA2-TAT二者不同抗性,将双质粒分步转化到大肠杆菌BL21中。表达条件为0.75 mmol/L IPTG、20℃、200 r/min诱导20 h,重组嵌合蛋白能以可溶形式表达。经过Ni-NTA、Sephadex G-75纯化,Western blotting对蛋白质特异性进行鉴定,确定获得(CTB)5/EGFP-CTA2-TAT嵌合蛋白。
- 周小芬林卫萍何华红李想张焜杜志云王华倩
- 关键词：霍乱毒素增强型绿色荧光蛋白嵌合蛋白
- 一种可增强目的基因表达的非融合表达载体及其制备方法
- 本发明公开了一种可增强目的基因表达的非融合表达载体及其制备方法，属于生物工程技术领域。所述的可增强目的基因表达的非融合表达载体，以pETduet‑1质粒为骨架载体，插入pETduet‑1质粒克隆位点1的氨基酸序列如SEQ...
- 王华倩何华锋林丹敏林卫萍王甜甜潘春杏杜志云赵肃清张焜
- 文献传递
- 基于霍乱毒素CT结构递药载体蛋白及体外构建方法和应用
- 基于霍乱毒素CT结构递药载体蛋白，为嵌合蛋白CTB5/EGFP-CTA2-TAT，其体外构建的方法，构建的载体petduet-CTB和pet22b-EGFP-CTA2-TAT；然后导入宿主菌，纯化或复性，然后再体外组装A...
- 郑希林卫萍王华倩杜志云张焜
- 文献传递
- 一种联合布雷非德菌素A的抗癌复方药物
- 本发明公开了一种联合布雷菲德菌素A的抗癌复方药物，旨在提供一种使用浓度低、副毒作用小，对肿瘤尤其是前列腺癌具有良好治疗效果的联合布雷菲德菌素A的抗癌复方药物；其技术要点是：该药物是布雷菲德菌素A联合紫杉烷类药物组成；属于...
- 黄华容郑希杜志云张焜林卫萍吴晓凤王艳磊
- 文献传递
