李玉倩 作品数:5 被引量:2 H指数:1 供职机构: 昆明医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 云南省科技计划项目 云南省科技厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
G6PD过表达型ACHN稳转细胞株及其构建方法 本发明涉及医学分子生物学相关技术,尤其是采用siRNA干扰技术构建细胞研究模型。本发明所述的G6PD过表达型ACHN稳转细胞株是一种G6PD过表达型ACHN稳转细胞株,是将pBABE-puro-G6PD转染人肾细胞腺癌细... 朱月春 张巧 王艳玲 况应敏 狄勇 李玉倩 杨惠鑫敲减NADPH氧化酶4能降低STAT3活性抑制人黑色素瘤A375细胞的增殖 被引量:1 2015年 NADPH氧化酶参与细胞活性氧族(ROS)的生成过程,而ROS与肿瘤细胞增殖密切相关.为了阐明NADPH氧化酶影响黑色素瘤A375细胞增殖的分子机制,本文首先应用荧光定量PCR和Western印迹证实NOX4为人黑色素瘤A375细胞的NADPH氧化酶功能核心亚基;随后根据NOX4基因设计3条干扰序列和对照序列并连接到p Super-retro-puro载体,经鉴定后转化E.coli DH5α感受态细胞、筛选有效干扰序列并用于逆转录病毒包装,病毒液感染A375细胞并经嘌呤霉素筛选10d,构建了NOX4缺陷的A375稳转细胞珠(A375-NOX4Δ),其NOX4的mRNA和蛋白表达分别下降了66.02%和77.35%,伴随NADPH氧化酶活性和ROS水平分别下降了79.17%和64.16%;MTT、Ed U法检测显示,A375-NOX4Δ细胞的增殖能力比A375-WT细胞明显降低、倍增时间延长,增殖细胞数量下降了68.27%(P<0.01),呈现G1→S期阻滞;Western blot检测表明A375-NOX4Δ细胞的cyclin D1、CDK4分别下降了55.7%(P<0.01)和64.8%(P<0.01),而P53、P21分别增加了6.89倍(P<0.01)和3.27倍(P<0.01),STAT3、P-STAT3分别下降了51.80%(P<0.05)和82.58%(P<0.01);电泳迁移率变动分析(EMSA)表明,A375-NOX4Δ细胞的STAT3-DNA结合活性明显降低.上述结果提示,敲减A375细胞的NOX4表达可能通过减少ROS生成使得STAT3磷酸化水平及其结合DNA的活性下降,最终导致A375-NOX4Δ细胞增殖减少、呈现G1→S期阻滞,这为黑色素瘤发病机制研究提供了新思路及可能的药物作用靶点. 蔡天池 王艳玲 张春华 张正 陈龙 李玉倩 朱月春关键词:NADPH氧化酶 黑色素瘤 长链非编码GAS5缺陷的人A375稳转细胞株及构建方法 本发明属于医学分子生物学领域。本发明所述的长链非编码GAS5缺陷的人A375稳转细胞株是将设计合成的F链5’-GATCCTGGCACAAGAAGATTAAAACTCGAGTTTTAATCTTCTTGTGCCATTTTTG... 朱月春 陈龙 况应敏 蔡天池 王艳玲 李玉倩长链非编码GAS5缺陷的人A375稳转细胞株及构建方法 本发明属于医学分子生物学领域。本发明所述的长链非编码GAS5缺陷的人A375稳转细胞株是将设计合成的F链5’-GATCCTGGCACAAGAAGATTAAAACTCGAGTTTTAATCTTCTTGTGCCATTTTTG... 朱月春 陈龙 况应敏 蔡天池 王艳玲 李玉倩肿瘤细胞中ROS与STAT3/5的相互调控 被引量:1 2016年 活性氧(reactive oxygen species,ROS)在肿瘤的发生和发展进程中有重要作用,但其分子机制尚未阐明。信号传导和转录激活子3/5(signal transducers and activators of transcription 3/5,STAT3/5)在肿瘤细胞中高表达,其靶基因产物可调控肿瘤的增殖、侵袭、血管形成等生物学特性。研究显示,肿瘤细胞中ROS水平与STAT3/5的表达与活性密切相关。本文综述了近年ROS与STAT3/5相互调控的可能分子机制,这为肿瘤的治疗提供了一个新的思路。 李玉倩 蔡天池 朱月春关键词:ROS 肿瘤 STAT3 STAT5