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修饰的反义寡脱氧核苷酸对胰腺癌细胞生长和靶基因表达的抑制作用被引量：8: 1997年; 目的观察修饰过的反义寡脱氧核苷酸（ＡＳＯＮＤ）对人胰腺癌细胞生长和靶基因表达的抑制作用。方法用人工合成与ｃ－ｍｙｃ和Ｋｉ－ｒａｓ帽区互补的修饰的反义寡脱氧核苷酸，即反义硫代正磷酸寡脱氧核苷酸（ａｎｔｉｓｅｎｓｅｐｈｏｓｏｐｈｏｒｏｔｈｉｏａｔｅｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ，ＡＳＰＯＤＮ）处理人胰腺癌细胞系ＰＣ－２和ＰＣ－３。多次小剂量（１０μｇ）或一次性剂量（１５μｇ）ＡＳＰＯＤＮ处理细胞后计数细胞生长率和３Ｈ掺入率，并用逆转录聚合酶链反应检测靶基因表达。结果多次小剂量ＡＳＰＯＤＮ处理后，细胞生长、３Ｈ掺入和靶基因表达的抑制可长达２周以上，到第１４天时实验组的细胞生长率仅为对照组的３８％～４３％，３Ｈ掺入率为对照组的１８％～３３％；靶基因表达明显受抑或下调，经一次性１５μｇＡＳＰＯＤＮ处理后，细胞生长、３Ｈ掺入和靶基因表达的抑制可达４天。结论与以往的研究比较，表明ＡＳＰＯＤＮ较ＡＳＯＤＮ有更强的抑制细胞生长、３Ｈ掺入、靶基因表达的作用。; 刘彤华王志永张雷; 关键词：胰腺肿瘤寡核苷酸类原癌基因

EB病毒的组织趋向性及其相关疾病被引量：4: 1996年; ＥＢ病毒主要感染静止的上皮细胞和移动的淋巴细胞，人体内部分组织器官上皮组织与淋巴组织联系密切。与ＥＢ病毒相关的疾病发生部位广泛，有Ｂｕｒｋｉｔｔ淋巴瘤、鼻咽癌、淋巴上皮瘤样癌、何杰金氏病、非何杰金氏淋巴瘤、免疫抑制个体及获得性免疫缺陷综合征患者的淋巴增生性疾病、传染性单核细胞增多症、口腔粘膜白斑等。不同疾病的ＥＢ病毒存在状态及基因表达产物种类不同，对这些问题的研究有助于ＥＢ病毒致瘤机制的阐明。; 张雷刘鸿瑞; 关键词：EB病毒人疱疹病毒鼻咽肿瘤淋巴瘤

人神经母细胞瘤中bcl-2基因表达与肿瘤细胞凋亡间的关系及p16基因的表达被引量：4: 1997年; 目的探讨人神经母细胞瘤中ｂｃｌ－２基因表达状况及与细胞凋亡的关系，以及ｐ１６基因的表达况状。方法应用原位杂交和免疫组化技术检测神经母细胞瘤中ｂｃｌ－２及ｐ１６两种基因的表达，并采用凋亡细胞原位检测方法对神经母细胞瘤组织切片中凋亡细胞数进行检测。结果原位杂交检测发现，２０例人神经母细胞瘤中，ｂｃｌ－２和ｐ１６基因表达阳性率均为９５％；免疫组化检测发现ｂｃｌ－２和ｐ１６蛋白表达阳性率均为１００％。χ２检验表明两种方法检测阳性率差异无显著性。凋亡细胞原位检测结果显示，肿瘤组织凋亡细胞数量随ｂｃｌ－２基因表达增强而减少。结论人神经母细胞瘤中ｂｃｌ－２基因有较普遍的表达，直接影响神经母细胞瘤中凋亡细胞的数量，ｐ１６基因未见明确的表达缺失。; 折晓宁陈杰刘彤华张雷张雷张雷; 关键词：神经母细胞瘤基因表达脱噬作用

不同药物敏感基因对人胰腺癌细胞PC-2的杀伤作用被引量：6: 1998年; 目的比较单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶（ＨＳＶＴＫ）／丙氧鸟苷（ＧＣＶ）和胞嘧啶脱氨基酶（ＣＤ）／５氟胞嘧啶（５ＦＣ）两系统对人胰腺癌ＰＣ２细胞的杀伤作用。方法构建表达ＨＳＶＴＫ和ＣＤ基因的重组逆转录病毒载体，将其直接导入胰腺癌细胞；噻唑蓝法检测转化细胞对前体药物的敏感度及５０％细胞受抑制时的药物浓度，即ＩＣ５０值，并对旁观者效应进行观察比较。结果ＨＳＶＴＫ基因转化细胞ＩＣ５０值为（１０６±０１２）μｍｏｌ／Ｌ，比未转化细胞下降５５８倍；ＣＤ基因转化细胞ＩＣ５０值为（３３００±０９５）μｍｏｌ／Ｌ，比未转化细胞下降２５８倍；混合细胞中含１０％的转化细胞时，ＨＳＶＴＫ／ＧＣＶ系统的生长抑制率为３９％，ＣＤ／５ＦＣ系统为５０３％。结论两系统对胰腺癌细胞ＰＣ２均有很好的杀伤和抑制细胞生长作用，ＨＳＶＴＫ／ＧＣＶ系统的治疗指数较高。; 张雷刘彤华崔全才; 关键词：HSV-TK GCV 5-FC

含胸苷激酶的不同细胞对丙氧鸟苷敏感性的差别及死亡途径初探: 2000年; 目的　探讨含单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶 (HSV TK)基因细胞对丙氧鸟苷 (GCV)敏感度不均一的原因以及在GCV作用下细胞被杀伤的途径———坏死或凋亡。方法　将表达HSV TK基因的重组逆转录病毒载体 ,分别直接导入生长速度不同的 3个细胞系 ,胰腺癌细胞系 (PC 2 ,PC 7)和猪肾小管上皮细胞系 (LLC PK1) ,计算转染前后细胞倍增时间 ,MTT法检测 5 0 %细胞生长受抑制时的GCV浓度 (IC5 0 值 ) ;流式细胞术检测细胞周期 ;对GCV作用细胞和 (或 )移植瘤进行光镜和电镜的形态观察及原位凋亡检测。结果　倍增时间分别为 (31.2± 0 .1)、(48.3± 0 .1)、(5 3.9± 0 .1)h的细胞 ,其转染细胞IC5 0 值分别为 (0 .73± 0 .12 )、(0 .93± 0 .16 )、(1.2 2± 0 .0 6 ) μmol L ,呈正相关 ;细胞被阻滞在S期 ;经GCV作用的细胞肿胀崩解坏死 ,个别细胞表现凋亡 ;经GCV作用的移植瘤显示大片坏死。结论　HSV TK GCV系统对增殖旺盛的细胞作用更为显著 ,GCV作用的 3个转染细胞系细胞的死亡途径主要为坏死。; 张雷刘彤华崔全才高洁; 关键词：胰腺肿瘤胸苷激酶丙氧鸟苷 HSV-TK/GCV

培养细胞及石蜡切片中凋亡细胞的检测被引量：2: 1997年; 培养细胞及石蜡切片中凋亡细胞的检测郭洪涛张雷折小宁陈杰刘彤华编程性细胞死亡或称凋亡是机体自己启动由细胞本身主动调控的、具有一定程序的死亡，见于胚胎器官发育、成熟老化细胞的新老交替、肿瘤发生发展等许多过程中。准确、灵敏地对组织细胞的凋亡状况进行原位检测...; 郭洪涛张雷折小宁陈杰刘彤华; 关键词：细胞凋亡细胞培养石蜡切片

胸腺嘧啶核苷激酶/丙氧鸟苷自杀基因系统旁观者效应机制的探讨被引量：1: 1999年; 目的　探讨用单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶（ＨＳＶＴＫ）／丙氧鸟苷（ＧＣＶ）系统进行基因治疗时发生的旁观者效应机制。方法　构建表达ＨＳＶＴＫ和β半乳糖苷酶（ＬａｃＺ）基因的重组逆转录病毒载体，将其分别直接导入胰腺癌细胞；细胞计数检测ＧＣＶ对ＨＳＶＴＫ基因转化细胞的抑制作用；以ＬａｃＺ基因转化细胞为旁观细胞，噻唑蓝法检测旁观者效应，并通过上清移换实验、维拉帕米抑制实验及电镜观察超微结构。结果　ＧＣＶ对ＨＳＶＴＫ基因转化细胞的生长抑制率达９２．１％，明显高于未转化细胞和对照转化细胞的４．９％和３．２％（均Ｐ＜０．０１）；混合细胞中只含１０％的ＨＳＶＴＫ转化细胞时，生长抑制率已达３９．０％，即存在明显的旁观者效应；ＧＣＶ作用的ＰＣ２／ＮＴＫ细胞上清对ＰＣ２细胞生长无影响，维拉帕米则对旁观者效应具有抑制作用，提示该效应需要细胞间接触；电镜观察可见细胞间存在缝隙连接。结论　ＧＣＶ代谢产物通过细胞间缝隙连接进行转运可能是ＨＳＶＴＫ／ＧＣＶ系统旁观者效应的主要机制。; 张雷刘彤华崔全才高洁; 关键词：胰腺肿瘤 HSV-TK 丙氧鸟苷

肺癌中EB病毒的原位杂交检测被引量：13: 1996年; 为观察EB病毒在肺癌组织中的分布并探讨EB病毒感染与肺癌的关系，对87例肺癌组织中经多聚酶链反应（PCR）检测52例EB病毒阳性的石蜡包埋组织，用原位杂交技术进行定位检测。癌组织及癌旁肺组织原位杂交EB病毒阳性率分别为37．9％（33／87）和11．5％（IO／87）；中、低分化癌与高分化癌EB病毒阳性率有显著差异，强阳性病例均为分化较差的肿瘤；累及胸膜、肋骨、隔肌的肺癌，其EB病毒阳性率明显高于未侵及者；随着EB病毒感染的加重，淋巴细胞浸润增多。结果表明：EB病毒感染与肺癌细胞的生物学特性及肺癌的发展有关。; 张雷刘鸿瑞王志永张淑华; 关键词：肺肿瘤原位杂交 E-B病毒

肺癌中Ki-ras癌基因突变的检测及其临床意义被引量：3: 1996年; 肺癌中Ｋｉ－ｒａｓ癌基因突变的检测及其临床意义张雷刘鸿瑞王志永张淑华我们用多聚酶链反应－限制性内切酶片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）技术，检测肺癌及邻近正常肺组织中Ｋｉ－ｒａｓ基因第１２密码子突变，以探讨Ｋｉ－ｒａｓ基因突变在肺癌发生中的作用及其临...; 张雷刘鸿瑞王志永张淑华; 关键词：肺肿瘤癌基因基因突变

用于PCR检测的病理标本处理方法被引量：8: 1994年; 用于ＰＣＲ检测的病理标本处理方法王志永，张雷，张淑华，刘彤华（北京协和医院病理科１００７３０）目前在国内，聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术已逐步应用于病理诊断和辅助诊断中，并显示出良好的应用前景。病理标本中核...; 王志永张雷张淑华刘彤华; 关键词：病理标本 PCR

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张雷

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