高洁
- 作品数：74 被引量：437H指数：11
- 供职机构：北京协和医院更多>>
- 发文基金：卫生部科学研究基金国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 人胰腺混合性导管-内分泌癌细胞系的建立
- 1999年
- 目的 建立胰腺混合性导管内分泌癌细胞系。方法 从一男性患者胰头切除的肿瘤组织取材，切割为细小的组织块接种于裸鼠皮下，经过裸鼠的两次过渡后，再取第二次裸鼠皮下的肿瘤组织，切割为非常小的组织块，用含有１０ ％ 胎牛血清的培养基接种至培养瓶进行体外培养。结果该细胞系目前已传至５５ 代。这一细胞系（ＰＣＥＮ）同时具有内、外分泌胰腺癌的形态特征，并得到了免疫组化标记和组织化学染色的证实。电镜下，部分细胞内含有神经分泌颗粒。生长特性表现为群体倍增时间相对较长。染色体核型说明ＰＣＥＮ有两个细胞群，一个细胞群的染色体众数为４８ 条，另一个的为５６ 条。癌基因Ｋｉｒａｓ１２ 密码子突变。应用放免法在ＰＣＥＮ 细胞匀浆及培养上清液中均检测到多种胃肠激素和癌胚抗原。结论 ＰＣＥＮ细胞系的细胞、分子生物学的特点充分说明，该细胞系不仅同时具有内、外分泌胰腺的形态特征，还具有其独特的生长特性、染色体核型及癌基因的变化，更重要的是ＰＣＥＮ同时具有内、外分泌胰腺的功能。ＰＣＥＮ的建立，为深入研究内、外分泌胰腺肿瘤的各种细胞和分子生物学特性提供了一个较有价值的体外模型。
- 侯敏高洁刘彤华崔全才
- 关键词：胰腺肿瘤癌细胞系建系
- 成人心血管外科围术期患者血液管理研究进展被引量：2
- 2022年
- 患者血液管理是指以患者为中心,遵守预防为主和循证医学的原则,应用多学科技术和方法,为可能需要输血的患者提供最佳治疗的系列措施。本文从术前纠正贫血及改善凝血功能、术中减少出血的措施、术后出血防治以及限制性输血策略4个方面对成人心血管外科围术期患者血液管理的最新研究进展进行综述,为改善成人心血管手术患者术后转归提供参考。
- 高洁纪宏文
- 关键词：心血管外科手术输血
- 胸腺嘧啶核苷激酶/丙氧鸟苷自杀基因系统旁观者效应机制的探讨被引量：1
- 1999年
- 目的 探讨用单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶（ＨＳＶＴＫ）／丙氧鸟苷（ＧＣＶ） 系统进行基因治疗时发生的旁观者效应机制。方法 构建表达ＨＳＶＴＫ和β半乳糖苷酶（Ｌａｃ Ｚ） 基因的重组逆转录病毒载体，将其分别直接导入胰腺癌细胞；细胞计数检测ＧＣＶ 对ＨＳＶＴＫ 基因转化细胞的抑制作用；以Ｌａｃ Ｚ基因转化细胞为旁观细胞，噻唑蓝法检测旁观者效应，并通过上清移换实验、维拉帕米抑制实验及电镜观察超微结构。结果 ＧＣＶ 对ＨＳＶＴＫ 基因转化细胞的生长抑制率达９２．１％ ，明显高于未转化细胞和对照转化细胞的４ ．９ ％ 和３ ．２％ （ 均Ｐ＜ ０．０１） ；混合细胞中只含１０％ 的ＨＳＶＴＫ转化细胞时，生长抑制率已达３９．０％ ，即存在明显的旁观者效应；ＧＣＶ 作用的ＰＣ２／ＮＴＫ 细胞上清对ＰＣ２细胞生长无影响，维拉帕米则对旁观者效应具有抑制作用，提示该效应需要细胞间接触；电镜观察可见细胞间存在缝隙连接。结论 ＧＣＶ代谢产物通过细胞间缝隙连接进行转运可能是ＨＳＶＴＫ／ＧＣＶ系统旁观者效应的主要机制。
- 张雷刘彤华崔全才高洁
- 关键词：胰腺肿瘤HSV-TK丙氧鸟苷
- Survivin在乳腺腺病、乳腺管状腺瘤、乳腺癌组织中的表达差异及其意义被引量：1
- 2009年
- 目的检测Survivin(SVV)蛋白在乳腺腺病、乳腺管状腺瘤、乳腺癌组织(乳腺导管内癌、浸润性乳腺导管癌)和乳腺癌细胞系细胞中的表达,及浸润性乳腺导管癌中SVV的表达与肿瘤大小,Her-2、ER、PR、p53、及ki-67蛋白表达及细胞凋亡情况的相关性,研究SVV在乳腺良性病变和良恶性肿瘤中的表达情况对鉴别诊断及乳腺癌预后的意义。方法选择乳腺腺病、乳腺管状腺瘤各20例、乳腺导管内癌、乳腺浸润性导管癌各30例,5个乳腺癌细胞系。免疫组化方法检测SVV、Her-2、ER、PR、p53、及ki-67在组织和细胞系的表达情况;应用TUNEL原位凋亡检测细胞的凋亡。结果SVV在乳腺腺病、乳腺管状腺瘤、乳腺导管内癌和浸润性乳腺导管癌组织的表达比例分别为7/20、6/20、20/30和24/30;其相应的高表达比例为3/20、1/20、14/30及16/30。与乳腺腺病、乳腺管状腺瘤组织相比,SVV在乳腺癌组织的表达具有明显增强(P<0.05)。在浸润性乳腺导管癌组织中,SVV的表达与肿瘤大小、淋巴结转移、细胞凋亡以及Her-2、ER、PR、p53、及ki-67的表达无明显的相关性(P>0.05)。结论SVV在乳腺导管内癌及乳腺浸润性导管癌组织中的表达明显增强,对乳腺腺病、乳腺管状腺瘤与乳腺癌的鉴别具有一定临床意义。
- 关健陈杰罗玉凤曹金玲高洁赵和
- 关键词：SURVIVIN腺瘤乳腺癌
- 单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶基因对人胰腺癌细胞的杀伤作用被引量：3
- 1995年
- 构建了能表达单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶（ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓｔｈｙｍｉｄｉｎｅｋｉｎａｓｅ，ＨＳＶ－ＴＫ）的逆转录病毒质粒ｐＮＴＫ，经病毒包装细胞ＰＡ３１７包装后成为具有感染力的重组病毒，用该病毒感染人胰腺癌细胞系ＰＣ－２细胞，经Ｇ４１８筛选得到稳定的转化细胞系。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交证实转化ＰＡ３１７细胞及转化的ＰＣ－２细胞中均有重组病毒的表达。ｐＮＴＫ转化的ＰＣ－２细胞能使无毒性前身药物ａｃｙｃｌｏｖｉｒ（无环鸟苷，ＡＣＶ）或ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ（ＧＣＶ）具有明显的细胞毒性，细胞杀伤率＞９０％，而对照组ＰＣ－２细胞杀伤率＜１０％。同时还观察到“旁观者效应”现象。
- 李和伟刘彤华王志永陈杰崔全才高洁
- 关键词：胰腺肿瘤单纯疱疹病毒杀伤作用
- 中国人群胰腺癌与胃癌HER2/neu基因表达被引量：4
- 2012年
- 目的探讨胰腺癌与胃癌组织中HER2/neu基因表达状态及其在治疗与评估临床结局中的作用。方法应用免疫组织化学和多色荧光原位杂交技术,检测北京协和医院手术切除的81例胰腺导管癌及癌旁胰腺组织和100例胃癌及癌旁胃组织标本中HER2/neu蛋白表达及基因状态的变化,分析HER2/neu蛋白表达与基因状态间的关系及其与胰腺癌和胃癌临床病理改变间的关系。结果免疫组织化学显示,81例胰腺癌组织中9例(11.1%)HER2/neu蛋白表达阳性(2+及3+),100例胃癌组织中13例(13%)HER2/neu蛋白表达阳性(2+及3+);荧光原位杂交结果显示,81例胰腺癌组织中15例(18.5%)HER2/neu基因扩增,100例胃癌组织中11例(11%)HER2/neu基因扩增。胰腺癌HER2/neu基因扩增与淋巴结转移有显著相关性(P=0.001)。胃癌组织中6例HER2/neu蛋白3+病例均显示HER2/neu基因扩增,且胃癌组织HER2/neu蛋白表达与其基因扩增有显著相关性(P<0.0001)。无论是癌旁胰腺组织还是癌旁胃组织均未检测到HER2/neu蛋白表达及基因扩增。结论胰腺癌组织HER2/neu蛋白表达与基因扩增不一致,而胃癌组织HER2/neu蛋白表达与基因扩增有显著相关性。HER2/neu基因异常可能在胰腺癌及胃癌的发生发展中起着重要作用,对胰腺癌及胃癌患者进行HER2/neu基因状态检测可能对其靶向治疗具有一定的指导意义。
- 任新瑜尹玉峰高洁武莎斐王可王文泽曾瑄梁智勇
- 关键词：胰腺癌胃癌HER2/NEU荧光原位杂交
- 结直肠癌EGFR和HER2蛋白表达及其基因拷贝数分析被引量：8
- 2007年
- 目的探索结直肠癌 EGFR 和 HER2蛋白表达和基因拷贝数增加的频率,以及蛋白表达与基因拷贝数增加之间的相关性。方法以石蜡包埋组织芯片为材料,分别采用免疫组织化学(EGFR pharmDx^(TM)和 HercepTest^(TM)试剂盒)和荧光原位杂交(FISH,ISI EGFR SpectrumOrange/CEP7SpectrumGreen 探针组合和 Path Vysion^(TM)试剂盒)方法,检测42例中国人结直肠癌 EGFR 和 HER2蛋白表达和基因状态。结果 EGFR 免疫组织化学0者18例、1+者10例、2+者5例、3+者9例;HER2免疫组织化学0者39例、1+者1例、2+者1例、3+者1例。通过 FISH 分析,EGFR 基因拷贝数无明显增高18例(42.9%),其中包括二体性14例(33.3%)、低三体性4例(9.5%);EGFR 基因拷贝数相对增高者24例(57.1%),包括高三体性3例(7.1%)、低多体性9例(21.4%)、高多体性12例(28.6%);本组患者中无 EGFR 基因扩增者。HER2基因拷贝数增加者共4例(9.5%),其中包括基因扩增1例(2.4%)。EGFR 的蛋白表达与基因拷贝数增加无相关性,两指标与肿瘤分化之间也无相关性。HER2免疫组织化学3+和基因扩增结果一致,与乳腺癌相似。结论这组患者中,具有较高的 EGFR 蛋白表达和基因拷贝数增加的比率,但蛋白表达与基因状态之间以及二者与肿瘤分化程度之间都没有相关性;HER2表达和基因拷贝数增加的频率较低。
- 曾瑄王鹏武莎斐高洁梁智勇刘彤华
- 关键词：结直肠肿瘤表皮生长因子基因ERBB-2原位杂交
- 胰腺导管腺癌中HER2/neu和拓扑异构酶Ⅱα基因的变化及相关性分析
- HER2/neu基因位于17号染色体长臂17q11.2-q12,编码具有酪氨酸激酶活性的表皮生长因子受体,在多种肿瘤中都有扩增,并且与某些肿瘤尤其是乳腺癌预后密切相关,目前已有多种针对HER2/neu的药物用于肿瘤治疗,...
- 梁智勇王文泽高洁武莎斐曾瑄刘彤华
- 关键词：胰腺导管腺癌拓扑异构酶靶向药物治疗临床病理
- 文献传递
- 康莱特注射液合并健择对移植于裸鼠的人胰腺癌的疗效初步研究被引量：18
- 2006年
- 目的:探讨康莱特注射液合并健择对移植于裸鼠的人胰腺癌的作用。方法:24只裸鼠皮下接种人胰腺癌细胞PANC-1,10d后随机分成4组,每组6只裸鼠。对照组给予生理盐水;康莱特组自接种第10天起连续给药10次,给药剂量为5·0g/kg,静脉推注;健择组在接种第12天给药1次,给药剂量为60mg/kg;合并给药组剂量及给药时间同单独给药组。停药后1周脱颈处死动物,解剖裸鼠,称体质量、瘤质量,测量肿块大小并计算抑瘤率。结果:单独注射康莱特及健择组的抑瘤率分别为12·24%和13·26%;合并用药组抑瘤率为40·11%,明显高于单独用药组。结论:康莱特注射液与健择对移植于裸鼠的人胰腺癌的抑制作用具有协同效应。
- 梁智勇王文泽高洁刘彤华
- 关键词：肿瘤移植脱氧胞苷
- fascin蛋白在结、直肠腺瘤和癌中的表达及意义被引量：22
- 2006年
- 目的探讨fascin蛋白在结、直肠腺瘤和癌中的表达及其临床病理意义。方法用免疫组化方法检测41例结、直肠癌,38例腺瘤及20例正常上皮中fascin蛋白的表达。肿瘤细胞染色>5%的病例定为阳性。结果41例结、直肠癌中有17例(41·5%)表达,而且fascin蛋白的表达和浆膜侵犯(P=0·005)、肿瘤分级(P=0·002)、TNM分期(P=0·011)、淋巴结转移(P=0·011)、p53表达(P=0·047)及Ki-67表达(P=0·034)等因素相关,与年龄、性别、组织学类型无关。27例中、重度异型增生腺瘤中仅3例(11·1%)表达,11例轻度异型增生腺瘤及正常上皮均不表达。结论在结、直肠癌的多步发生过程中,fascin蛋白表达看来是一迟发事件,通常在癌中表达,并与肿瘤侵袭和转移相关,有可能成为新的治疗靶点。
- 杨强卢朝辉罗玉凤万建伟曹金伶高洁武莎菲陈杰
- 关键词：FASCIN免疫组化
