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一种表达并纯化可溶性屋尘螨主要过敏原Der p 2蛋白的方法: 本发明涉及一种在大肠杆菌中高可溶性表达并纯化屋尘螨主要过敏原Derp2蛋白的方法。本方法以大肠杆菌伴侣蛋白触发因子(Trigger Factor，TF)作为融合标签实现了Derp2的高可溶性表达并优化出高效的纯化工艺，用...; 魏准于波曹拓杨旸窦侠张伟; 文献传递

一种通过TARC/CCL17评估特异性皮炎病情的诊断方法: 本发明公开了一种通过TARC/CCL17评估特异性皮炎病情的诊断方法。本发明方法是利用病人血清中TARC/CCL17蛋白含量和一般诊断中所用SCORAD评分法的高度相关性，使用Elisa测定特异性皮炎患者血清中的TARC...; 张伟魏准于波窦侠杨旸章东生; 文献传递

一种血浆游离miRNAs绝对定量的方法: 本发明公开了一种血浆游离miRNAs绝对定量的方法。本发明方法是通过对血浆游离RNA的提取、引物与探针的灵敏度和特异度评价、内参基因的选择、标准曲线的建立、数据的计算和校正这一整个过程，提供一种稳定、可靠的血浆游离miR...; 万峻王奕诺张伟魏准杨旸; 文献传递

一种通过CTACK/CCL27评估特异性皮炎病情的诊断方法: 本发明公开了一种通过CTACK/CCL27评估特异性皮炎病情的诊断方法。本发明方法是利用病人血清中CTACK/CCL27蛋白含量和一般诊断中所用SCORAD评分法的高度相关性，使用Elisa测定特异性皮炎患者血清中的CT...; 张伟魏准于波窦侠杨旸欧国敏; 文献传递

肿瘤特异性抗原人天冬氨酸β羟化酶(HAAH)羧基末端蛋白制备工艺及其在癌症诊断中的应用: 本发明公开了一种人类肿瘤早期诊断方法。该方法是通过天冬氨酸β羟化酶（HAAH）抗体和人体细胞或体液中的天冬氨酸β羟化酶结合的抗原抗体反应来诊断早期癌症。本发明亦包括产生HAAH羧基末端重组蛋白和制备HAAH特异性单克隆抗...; 魏准杨旸董小林张伟; 文献传递

一种体外重组表达人CTACK/CCL27可溶性蛋白的方法: 本发明公开了一种体外重组表达人CTACK/CCL27蛋白的方法。本发明方法是通过大肠杆菌融合表达人CTACK/CCL27蛋白，再使用蛋白酶切，亲和层析，凝胶层析和离子交换层析的方法纯化得到纯净的人CTACK/CCL27蛋...; 魏准张伟杨旸于波万峻刘小娟; 文献传递

人CC趋化因子配体17重组蛋白的原核表达、纯化及趋化活性分析被引量：1: 2020年; 目的原核表达人CC趋化因子配体17(CC chemokine ligand 17,CCL17)重组蛋白,纯化并分析其趋化活性。方法根据GenBank中登录的人CCL17基因序列(NM002987.2)设计特异性引物,扩增人静脉全血CCL17基因,将其PCR产物与pCold-TFM载体连接构建重组表达质粒pCold-TFM-CCL17,转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达;表达产物经镍亲和层析,酶切移除融合蛋白的6×His-TF标签后,进行离子交换亲和层析纯化;凝胶过滤层析分析其聚合特性,分光光度法分析蛋白浓度,应用表达CCL17受体的Hut78细胞进行趋化试验。结果经双酶切及测序鉴定证明,重组表达质粒pCold-TFM-CCL17构建正确;融合蛋白以可溶性形式表达;纯化的人CCL17重组蛋白相对分子质量约为11000,纯度达95%以上,其蛋白峰呈均匀、对称的单个色谱峰,色谱峰面积占总曲线面积95%以上,蛋白表达量≥6 mg/L,其可趋化Hut78细胞发生迁移。结论成功表达了可溶性、高纯度、高产量、具备一定趋化活性的人CCL17重组蛋白,为其工业化生产及科研应用提供了参考。; 曹拓魏准彭湘明; 关键词：原核细胞纯化趋化活性

一种体外表达人IgE高亲和力受体蛋白的方法: 本发明公开了一种体外重组表达人IgE高亲和力受体蛋白的方法。本发明方法是通过大肠杆菌融合表达人IgE高亲和力受体蛋白，再使用蛋白酶切，亲和层析，凝胶层析和离子交换层析的方法纯化得到纯净的人IgE高亲和力受体蛋白。使用本发...; 魏准张伟杨旸于波万峻张杰; 文献传递

一种检测自身免疫性荨麻疹的诊断方法: 本发明公开了一种检测自身免疫性荨麻疹的诊断方法。本发明方法是利用IgE高亲和力受体蛋白和患者血清中的IgE高亲和力受体抗体相结合的方法，检测患者血清中的IgE高亲和力受体抗体的量，以确定其是否为自身免疫性荨麻疹。使用本发...; 张伟魏准于波杨旸窦侠邵勇; 文献传递

屋尘螨变应原Derp 5在大肠埃希菌中的表达及纯化: 2017年; 目的克隆表达屋尘螨(Dermatophagoides pteronyssinus,Derp)第5组变应原Derp 5基因,在E.coli中表达、纯化重组Derp 5蛋白,并分析其血清Ig E反应原性。方法以合成的Derp 5核酸序列为模板进行PCR扩增,产物经双酶切后与载体pCold-TFM连接,构建重组表达质粒pCold-TFM-Derp 5,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。用镍离子亲和层析柱和凝胶过滤层析柱纯化目的蛋白,尘螨过敏患者血清鉴定其IgE反应原性。结果重组表达质粒pCold-TFM-Derp 5经双酶切、PCR及测序鉴定证明构建正确;在E.coli BL21(DE3)中实现了目的蛋白的可溶性高表达,毎升细菌表达产物经纯化可得到纯度95%以上的Derp 5蛋白约6 mg。纯化的重组Derp 5蛋白与尘螨过敏患者血清IgE有结合活性。结论成功构建了Derp 5原核表达载体,高效表达并纯化了目的蛋白,纯化的重组Derp 5蛋白具有良好的IgE反应原性,为屋尘螨变态反应性疾病的特异性诊断和治疗以及致敏蛋白的进一步研究奠定了基础。; 王罗贺鹏飞窦侠张杰张伟魏准; 关键词：屋尘螨原核细胞特异性免疫治疗反应原性

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魏准