王致娟 作品数:4 被引量:7 H指数:2 供职机构: 重庆医科大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家临床重点专科建设项目 重庆市卫生局医学科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
靶向敲低肿瘤转移相关基因1可减缓裸鼠喉鳞癌移植瘤生长并降低其转移能力 被引量:3 2015年 目的通过RNA干扰(RNAi)技术,观察肿瘤转移相关基因1(MTA1)对裸鼠喉鳞癌移植瘤生长和转移能力的影响。方法设计MTA1的短发夹RNA(shRNA)慢病毒干扰载体,进行包装与转染Hep-2细胞。将无关shRNA对照组和MTA1shRNA感染的Hep-2细胞接种于裸鼠爪垫,每组5只。复制人喉癌移植瘤淋巴转移模型,9周后处死裸鼠,取下肿瘤组织及腹股沟淋巴结,进行HE染色形态学观察,反转录PCR检测MTA1、β联蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)mRNA的水平,Western blot法检测MTA1、β-catenin、MMP-9、cyclin D1蛋白水平。结果慢病毒MTA1干扰载体筛选成功;2组人喉癌裸鼠爪垫移植瘤100%成瘤;MTA1 shRNA转染细胞裸鼠肿瘤体积在同一时间点均明显小于无关shRNA对照组;MTA1 shRNA转染细胞5只裸鼠爪垫肿瘤未发现淋巴结转移;无关shRNA对照组5只裸鼠腹股沟淋巴结切片均可见喉癌细胞;与无关shRNA对照组相比,MTA1 shRNA转染细胞MTA1、β-catenin、MMP-9、cyclin D1的mRNA和蛋白水平明显降低。结论抑制MTA1基因能够减缓裸鼠喉鳞癌的生长并降低其转移能力。 刘舟 周建荣 王致娟 柏露关键词:肿瘤转移相关基因1 基质金属蛋白酶9 细胞周期蛋白D1 下调Cyclophilin A对喉鳞癌裸鼠移植瘤模型肿瘤生长和转移的影响 被引量:3 2017年 目的通过RNA干扰技术,研究亲环蛋白A(Cyclophilin A,CypA)基因对喉鳞癌裸鼠移植瘤模型在肿瘤生长和肿瘤转移方面的影响。方法构建沉默CypA基因慢病毒颗粒,转染Hep2喉癌细胞,将15只裸鼠完全随机分为3组,分别为空白对照组、阴性对照组、基因沉默组,每组5只,建立喉鳞癌裸鼠移植瘤转移模型,观察肿瘤生长情况及淋巴结转移情况。PV二步法免疫组化检测CypA、细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN、CD147)、细胞外基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在肿瘤组织的表达,RT-PCR检测CypA、CD147、MMP-9 m RNA的表达水平,Western blot法检测CypA、CD147、MMP-9蛋白的表达水平。结果基因沉默组肿瘤体积较空白对照组、阴性对照组小,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化观察肿瘤为中分化鳞状细胞癌,CypA主要表达在细胞质,CD147主要表达在细胞膜,MMP-9主要表达在肿瘤间质;在m RNA水平和蛋白水平基因沉默组CypA、CD147、MMP-9的表达都明显降低(P<0.05)。结论下调CypA可以通过调节CD147、MMP-9的表达水平抑制喉癌的生长,延缓肿瘤转移。 柏露 周建荣 王致娟 刘舟关键词:CYPA 慢病毒 裸鼠 白介素-21在喉癌组织中的表达与意义 被引量:1 2014年 目的观察白介素(interleukin-21,IL-21)在喉癌(laryngeal carcinoma)肿瘤组织及癌旁周围正常组织中的表达,探讨炎症因子IL-21的表达与喉癌发病机制的关系。方法随机收集病理检测确诊为喉癌患者的喉癌组织及癌旁正常组织,记录患者一般情况和临床病理特征等资料。应用RT-PCR、Western blot方法检测IL-21在喉癌及癌旁正常组织中的基因和蛋白表达水平。然后采用免疫组化、免疫荧光等方法检测IL-21在喉癌及癌旁正常组织结构中的分布情况,观察其在组织中的表达特点,并结合临床参数探讨IL-21与喉鳞状细胞癌临床病理特征的相关性。结果 RT-PCR显示,与癌旁正常组织相比,喉癌组织IL-21 mRNA表达明显增高,差异具有统计学意义(P<0.01);Western blot显示,与癌旁正常组织相比,喉癌组织IL-21表达明显增高,差异具有统计学意义(P<0.01);IL-21表达与肿瘤的部分临床参数如肿瘤分化程度、淋巴结转移程度等因素密切相关。免疫组化显示IL-21呈微弱阳性表达于癌旁正常组织中。与此相比,喉癌组织中IL-21则呈现高表达;部分肿瘤细胞及炎性细胞在细胞核和细胞浆中均有高表达和分布。免疫荧光提示HLA-DR阳性的炎症细胞可能是IL-21因子分泌的重要来源。结论 IL-21在喉癌组织中基因水平和蛋白水平表达都明显增加,与临床进展密切相关,说明IL-21在喉癌病理形成过程中起到一定的作用,可能作为判断临床预后的重要指标。 张跃东 周建荣 杨旋 冯明亮 薛莲 刘舟 王致娟关键词:喉癌 炎症免疫 IL-21 siRNA抑制Cyclophilin A基因对喉鳞癌细胞Hep-2增殖和转移的影响 2016年 目的:研究小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)抑制亲环素A(cyclopilin A,CypA)的表达对喉癌细胞株Hep-2增殖和侵袭迁移的影响及相关机制。方法:实验分为3组:化学合成的靶向CypA的si RNA转染喉癌细胞Hep-2(CypA si RNA组),转染阴性对照NC si RNA的细胞(NC si RNA组)和对照组(control组)。运用real-time PCR(RT-PCR)检测CypA及CD147m RNA的表达,Western blot检测CypA、CD147的蛋白表达。MTT法检测CypA对细胞生长曲线的影响;平板克隆形成实验检测CypA在喉癌细胞增殖中的作用;Transwell法检测CypA在喉癌细胞侵袭迁移中的作用。结果:CypA si RNA转染后的喉癌细胞株Hep-2中CypA、CD147的m RNA和蛋白表达水平均明显降低(P=0.000)。CypA si RNA转染后的Hep-2细胞生长缓慢,克隆形成被抑制,control组克隆数为(235.00±23.90)、NC si RNA组为(240.67±10.07)、CypA si RNA组为(129.33±14.22)(F=40.460,P=0.000);转染后Hep-2细胞的迁移(F=497.124,P=0.000)、侵袭(F=129.787,P=0.000)能力明显降低。结论:CypA表达下调后可抑制喉癌细胞株Hep-2的增殖和侵袭迁移能力,其机制可能与抑制CD147的表达有关。 王致娟 张跃东 刘舟 柏露 周建荣关键词:小干扰RNA 亲环素A HEP-2细胞株 增殖