曾国敏
- 作品数：19 被引量：13H指数：2
- 供职机构：甘肃农业大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划甘肃省教育厅研究生导师科研项目甘肃省高等学校基本科研业务费项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- ‘合作猪’TDRP1基因的克隆及生物信息学分析被引量：4
- 2017年
- 【目的】丰富猪TDRP1基因研究的基础数据.【方法】以猪NM_001198925序列为参考,设计特异性引物,通过克隆测序获得‘合作猪’TDRP1基因完整CDS序列,并进行生物信息学分析,同时采用实时荧光定量PCR方法检测TDRP1基因在不同组织中的表达特性.【结果】获得了TDRP1基因完整的CDS序列(GenBank登录号:KU743254),共684bp,其编码186个氨基酸多肽.与参考序列相比,在编码区第33、348位点处发生了同义突变(C→G、C→T).TDRP1基因分子式为C_(897)H_(1421)N_(259)O_(287)S_2,理论等电点(PI)为5.86,不稳定系数为62.66,疏水指数为64.03,平均亲水性为-0.939,属不稳定可溶性酸性蛋白质.二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主,属混合类蛋白质.亚细胞定位结果显示,TDRP1编码的蛋白质在遗传物质复制和转录、翻译过程中发挥功能的可能性分别为26.3%、14.3%,明显高于发挥其它功能的可能性.mRNA表达分析表明,TDRP1基因在垂体和睾丸中高表达,肺、肾、小脑、卵巢中度表达,肝、脾、大脑、胃、小肠中低表达,心脏组织中不表达.【结论】成功克隆了‘合作猪’TDRP1基因的完整CDS区序列,并发现了2个SNP位点;多组织转录表达分析表明TDRP1在垂体和睾丸中表达较高,可为深入研究TDRP1基因的功能提供参考.
- 蒋应弟滚双宝袁慧芳曾国敏高景波
- 关键词：合作猪精子生物信息学分析
- 甘肃金昌西门塔尔牛MSTN基因外显子多态性研究
- 2014年
- [目的]为分析金昌地区西门塔尔牛MSTN基因三个外显子的遗传多态性及变异特征。[方法]采用PCR-SSCP方法检测了61头西门塔尔牛MSTN基因三个外显子的多态性。[结果]显示:金昌西门塔尔牛MSTN基因的第1外显子存在A、B两个等位基因以及AA、AB两种基因型,其基因型频率分别为0.7705和0.2295;第2外显子存在A、B两个等位基因以及AA、AB、BB三种基因型,其基因型频率分别为0.0328、0.3443和0.6229;第3外显子只有AA一种基因型。序列分析表明,金昌地区的西门塔尔牛MSTN基因第1外显子在269bp发生了A→G的突变和第2外显子在41bp发生了C→T的突变,但都未导致氨基酸发生改变,属于同义突变;外显子3并未检测到突变。[结论]统计结果表明,金昌地区的西门塔尔牛MSTN基因第1外显子呈低度多态,第2外显子呈中度多态。
- 刘霞李积友曾国敏孙雪婧韩登武杜晓华
- 关键词：MSTN基因遗传多态性
- 表达hCD47小型猪创建及其在异种移植中抗吞噬研究
- 目的猪是人类异种器官移植的理想供体。然而,异种移植物进入受体后将被受体巨噬细胞清除,其主要原因是巨噬细胞表面的受体-信号调节蛋白(signal regulatory proteinα,SIRPα)不能识别异种细胞表面的整...
- 龙川石宁宁曾国敏冯冲潘登科
- 关键词：异种移植巨噬细胞巴马小型猪
- 减少异种肝移植血小板吞噬的ASGR1基因敲除猪
- 肝移植是解决临床供体肝短缺的有效途径之一.猪的肝脏作为"过渡肝"移植给急性肝衰病人,可以有效缓解急性肝衰病人的病情.敲除猪α-1,3半乳糖基转移酶基因(GGTA1已基本解决了异种肝移植的超急性免疫排斥...
- 李西睿魏静冯冲龙川纪慧丽石宁宁蒋应弟曾国敏潘登科
- 关键词：异种肝移植基因敲除
- α1,3半乳糖转移酶基因敲除巴马克隆猪与核供体巴马猪心、肺解剖学与组织学的比较
- 2016年
- 目的探讨α1,3半乳糖转移酶(GGTA1)基因敲除巴马克隆猪与核供体巴马猪心、肺解剖学与组织学发育变化的异同。方法选取GGTA1基因敲除巴马克隆猪2头(BM164和BM155)及核供体巴马猪1头(BMM2),利用大体解剖学和常规石蜡切片HE染色技术,对其心脏和肺脏进行解剖学与组织学比较研究。结果核供体成年健康巴马猪心脏呈倒置圆锥形,前缘凸,后缘短而直,心表面冠状沟和左右纵沟清晰可见;心壁结构完整,可分3层,心内膜较薄,心室内膜下有较多浦肯耶纤维,心肌排列紧密,横纹清晰,闰盘少且不清楚,心外膜较厚,无髓神经纤维明显。GGTA1基因敲除巴马克隆猪与核供体巴马猪相比较,心脏在解剖学与组织学构造上均未见明显差异。核供体成年健康巴马猪肺脏呈粉红色海绵状,质软而轻,富有弹性;肺脏小支气管软骨丰富,黏膜下层内气管腺明显,可见炎性细胞,细支气管黏膜皱褶呈指状向管腔凸起,周围有炎性细胞浸润,肺泡大小较一致,肺泡壁较厚,尘细胞少见。GGTA1基因敲除巴马克隆猪肺脏解剖学与组织学结构与核供体巴马猪基本一致。结论 GGTA1基因敲除巴马克隆猪与核供体巴马猪心、肺解剖学构造无明显差异,组织学结构正常,心、肺发育良好。
- 韩晓娜曾国敏杨阳潘登科杜晓华
- 关键词：基因敲除大体解剖学
- 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
- 潘登科龙川石宁宁冯冲李西睿于淑珍曾国敏唐雨婷高景波
- 牦牛FAM134B基因CDS区克隆与生物信息学分析被引量：2
- 2015年
- 为了丰富牦牛FAM134B基因研究的基础数据,进一步探讨FAM134B基因的生理功能,通过PCR扩增和测序技术并结合生物信息学分析软件,对牦牛FAM134B基因进行克隆、测序以及相关生物信息学分析。克隆获得1 079 bp的牦牛FAM134B基因,其中CDS区全长1 071 bp(Gen Bank登录号:KM587693),编码356个氨基酸残基组成的蛋白质。与普通牛比对,牦牛FAM134B基因在CDS区存在3个碱基突变,其中第727位上碱基C→T的突变导致密码子CCC→TCC,使编码的氨基酸由脯氨酸变成丝氨酸。牦牛FAM134B基因编码蛋白的分子式为C1705H2686N448O575S13,分子量为39.077 5 k Da,理论等电点(p I)为4.46,消光系数为24 450。不稳定系数为46.85,疏水指数为79.47,平均亲水性为-0.439,属不稳定可溶性酸性蛋白质。二级结构以无规卷曲和α-螺旋为主,其中α-螺旋占23.88%,无规卷曲占74.72%,属混合类蛋白质。亚细胞定位结果显示:FAM134B编码的蛋白在内质网、细胞质膜、空泡、细胞核、高尔基体、细胞骨架和线粒体中分别占30.4%,21.7%,17.4%,17.4%,4.3%,4.3%,4.3%,推测其可能在物质的运输以及辅因子的生物合成等过程中发挥离子通道载体以及信号转导和转录调控的作用。系统发育树分析表明,牦牛FAM134B氨基酸序列与普通牛、绵羊、小鼠、褐家鼠、猕猴、黑猩猩、人、非洲爪蟾的FAM134B氨基酸序列的同源性分别为99.7%,97.2%,87.1%,86.8%,90.4%,90.2%,90.4%,57.9%,物种间的同源性较高,其系统进化的情况与亲缘关系的远近相一致,说明FAM134B基因的编码区在进化的过程中比较保守。FAM134B基因的成功克隆和分析为揭示牦牛FAM134B基因的遗传特性提供了理论依据。
- 曾国敏杜晓华杨阳梁春花孙雪婧刘霞
- 关键词：牦牛生物信息学分析
- TALEN介导GGTA1基因敲除猪的繁育遗传分析
- LEN是一类新型基因组编辑技术,因其特异性强打靶效率高而被广泛应用于多种生物的基因组编辑.传统的基因打靶是利用外源DNA分子与染色体DNA之间的同源重组实现基因敲除,外源DNA片段整合在基因组内可以稳定遗传给后代.TAL...
- 李西睿冯冲龙川纪慧丽石宁宁魏静蒋应弟曾国敏潘登科
- 人源化小型猪组织器官的基因改造进展
- 潘登科龙川石宁宁冯冲李西睿于淑珍曾国敏唐雨婷高景波
- GGTA1^(-/-)五指山小型猪SLAI类基因分子特征及与HLA相似性分析
- 2016年
- 目的明晰α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除(GGTA1-/-)的五指山小型猪SLA经典I类基因分子结构特征及其与人HLA的相似性,对研究异种器官移植细胞性排斥反应具有重要意义。方法采集6头祖代GGTA1-/-五指山小型猪耳组织,利用RT-PCR对SLA I类基因(SLA-1、SLA-3、SLA-2)扩增、克隆及测序,对序列进行BLAST分析,并采用生物信息学方法对SLA I类基因分子结构特征及其与人HLA的同源性进行分析。结果测序分析表明,共获得6条等位基因序列,其中4条为已公布的等位基因(SLA-1*0703、SLA-2*1102、SLA-3*0401、SLA-3*0403),另2条为新等位基因(SLA-1*0401wz01、SLA-2*11wz01)。五指山小型猪与人HLA同源性为70.5%~72.1%。SLA-1*0401wz01、SLA-1*0703、SLA-2*11wz01、SLA-2*1102和SLA-3*0401的CD8+分子识别的关键结合域与人HLA氨基酸序列比对,均仅在位点225、228处发生了突变(T→S、T→M),其他位点高度保守。SLA-2*11wz01和SLA-2*1102与人HLA I类基因NK细胞抑制性受体(killer inhibitory receptor,KIR)结合区氨基酸同源性较高,在NKTA-1亚型结合域内仅有1个氨基酸差异,而在NKTA-2和NKTA-3亚型结合域内有2个氨基酸差异。结论从免疫细胞介导的异种排斥反应角度出发,GGTA1-/-五指山小型猪SLA I类基因氨基酸序列与人HLA高度相似,可作为未来猪-人异种器官移植的良好供体之一。
- 蒋应弟曾国敏石宁宁李西睿纪慧丽潘登科滚双宝
- 关键词：五指山小型猪SLA异种移植免疫排斥
