赵妙妙 作品数:15 被引量:30 H指数:3 供职机构: 山西农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山西省回国留学人员科研经费资助项目 山西省科技攻关计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
牛卵泡ODF1与ODF2转录组发育相关基因筛选及表达差异分析 被引量:5 2015年 旨在从牛发情周期第一卵泡波中最大卵泡ODF1(The largest follicle at onset of deviation)和第二大卵泡ODF2(The second largest follicle at onset of deviation)转录组水平上筛选卵泡发育差异表达基因。采集牛发情周期第一卵泡波ODF1和ODF2,分别分离颗粒细胞并提取总RNA,构建RNA文库,通过Illumina平台对ODF1和ODF2测序;筛选出ODF1与ODF2两个转录本之间比值大于2的差异表达基因,并采用qRT-PCR对筛选出的基因在牛发情周期内第一卵泡波优势卵泡(Dominant follicles,DF)和从属卵泡(Subordinate follicles,SF)颗粒细胞中功能验证。共获得8个卵泡发育差异表达基因,其中7个基因筛选自ODF1/ODF2(BEX2、UBN1、SIK1、SPARCL1、LOC784256、LOC789231和LOC785462),1个筛选自ODF2/ODF1(SAFB2);qRT-PCR结果表明,BEX2、UBN1、LOC784256和LOC789231在DF中mRNA表达量极显著高于SF(P<0.01),SAFB2在SF中mRNA表达量极显著高于DF(P<0.01),SIK1和SPARCL1在SF中mRNA表达量显著高于DF(P<0.05),虽然LOC785462在SF中mRNA表达量高于DF,但差异不显著(P>0.05)。qRT-PCR检测BEX2、UBN1、LOC784256、LOC789231和SAFB2的结果与高通量测序中该基因在ODF1和ODF2的RPKM的差异趋势基本一致,而SIK1、SPARCL1和LOC785462不一致。 李鹏飞 孟金柱 谢建山 朱芷葳 刘岩 姜晓龙 陈建伟 姚晓磊 赵妙妙 吕丽华关键词:转录本 卵泡发育 基因 用于神经肽受体筛选的方法 本发明公开了一种用于神经肽受体筛选的方法,依据统计学原理,要求基因组测序结果FDR校正后的P<0.05,基因差异表达倍数的选择依据是配体‑受体结合产生的效应强度与占领受体的数量成正比;采用蛋白同源建模技术建立蛋白模型;综... 李鹏飞 吕丽华 谢建山 孟金柱 刘岩 姚晓磊 赵妙妙 景炅婕 毕锡麟 王锴文献传递 黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡相关基因表达的影响 被引量:3 2015年 为探讨黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡的影响,本试验通过向大鼠睾丸间质细胞的体外培养体系中添加终浓度为20μg/m L的黄芪提取液,利用荧光定量PCR技术研究黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达量的影响。结果:添加终浓度为20μg/m L黄芪提取液的实验组与不添加黄芪提取液的对照组相比,间质细胞内Bax基因表达量显著降低(P<0.01),Bcl-2基因表达量无显著差异,Bax/Bcl-2比值显著下降(P<0.05)。结论:黄芪在一定程度上能够通过抑制凋亡基因Bax的转录,抑制大鼠睾丸间质细胞凋亡。 曹霞 陈建伟 姜晓龙 赵妙妙 姚晓磊 黄洋 吕丽华关键词:黄芪提取液 间质细胞 细胞凋亡 不同日龄犊牛睾丸中细胞周期调控基因CyclinB1和p34^(cdc2)表达的差异 被引量:1 2015年 旨在探究不同日龄犊牛睾丸中细胞周期调控基因CyclinB1和p34cdc2的表达情况。本试验选取发育正常、体重相似的5~6d荷斯坦哺乳公犊18头,随机分为3组,每组6头,饲喂相同的基础日粮,分别在30(断奶)、60和90d时从各组分别随机抽取2头,采集其睾丸备用;通过qRT-PCR技术检测不同日龄犊牛睾丸中细胞周期调控基因CyclinB1和p34cdc2 mRNA表达规律,免疫组化技术对睾丸CyclinB1和p34cdc2进行定位分析。结果表明:90d时CyclinB1和p34cdc2 mRNA表达量显著高于30与60d(P<0.05),但30与60d两种基因mRNA表达量均差异不显著(P>0.05);p34cdc2蛋白在不同日龄犊牛表达差异显著(P<0.05);CyclinB1蛋白在60、90d的表达量显著高于30d(P<0.05),但60和90d差异不显著(P>0.05)。综上表明,CyclinB1和p34cdc2 mRNA和蛋白在睾丸的表达量随着犊牛日龄的增加而增加,且不同的日龄CyclinB1和p34cdc2 mRNA和蛋白表达量存在一定的差异。 姚晓磊 宋瑞高 吕丽华 李鹏飞 刘强 黄洋 陈建伟 姜晓龙 曹霞 赵妙妙 张贵花 王永新 石磊关键词:细胞周期调控 CYCLINB1 FSH及WNT信号通路对绵羊卵泡颗粒细胞功能的影响 Wnt信号通路普遍存在于哺乳动物体内,至今已发现3条主要的Wnt信号通路,可调控多种发生过程。研究发现Wnt信号通路在神经系统发育,组织、器官发育以及肿瘤的发生过程中都存在重要作用,此外,Wnt信号通路与卵泡的发育也存在... 赵妙妙关键词:绵羊 卵泡 颗粒细胞 WNT信号通路 FSH 文献传递 卵泡发育相关基因在牛优势和从属卵泡颗粒细胞中表达的研究 被引量:3 2014年 旨在探究卵泡发育相关基因在牛发情周期内第一卵泡波中优势卵泡(Dominant follicles,DF)和从属卵泡(Subordinate follicles,SF)颗粒细胞中表达差异,进而筛选影响牛卵泡发育的相关基因。通过GEO数据库与基因功能分析筛选与牛卵泡发育相关基因,采用qRT-PCR检测牛第一卵泡波DF和SF颗粒细胞中各基因的表达差异。结果显示:筛选出6个候选基因(SFRP2、CPEB1、PRKAG2、MAPK8、PPP2R2A和PRSS23)与牛卵泡发育有关;qRT-PCR检测,CPEB1在DF中的表达量极显著高于SF(P<0.01),PRKAG2在DF中的表达量显著高于SF(P<0.05);SFRP2和MAPK8在SF中的表达量极显著高于DF(P<0.01);PPP2R2A和PRSS23虽然在DF和SF的表达量存在倍数关系,但差异并不显著。综上表明,在牛卵泡发育过程中,CPEB1和PRKAG2促进卵泡发育,SFRP2和MAPK8对卵泡的发育可能有抑制作用。 姚晓磊 李鹏飞 姜晓龙 孟金柱 黄洋 刘岩 陈建伟 赵妙妙 吕丽华关键词:卵泡发育 基因 FSH及Wnt信号通路对绵羊卵泡颗粒细胞的增殖及雌激素分泌的影响 被引量:3 2016年 旨在研究Wnt信号通路对绵羊卵泡颗粒细胞增殖及雌激素分泌的影响,探究其是否与促卵泡素(Follicular stimulating hormone,FSH)有关。在添加有FSH以及不同浓度Wnt信号通路抑制剂IWR-1的培养基中培养绵羊卵巢卵泡颗粒细胞168h,利用Guava ViaCount?Reagent测定细胞数目的变化,利用绵羊ELISA试剂盒检测雌激素浓度的变化,利用qRT-PCR检测FSH靶基因CYP19和CCND2的相对表达量差异。结果表明,无论有无FSH,抑制剂IWR-1使颗粒细胞数目显著减少(P<0.05);当有FSH时,抑制剂IWR-1的添加导致雌激素浓度显著降低(P<0.05)。IWR-1的浓度为1.0μmol·L-1时,对颗粒细胞的抑制效果最明显。IWR-1还导致CYP19和CCND2mRNA的表达量降低。综上表明,Wnt信号通路对绵羊卵泡颗粒细胞的生物学功能具有促进作用,并且这种促进作用可能与FSH有关。 赵妙妙 姜晓龙 陈建伟 黄洋 姚晓磊 曹霞 李鹏飞 吕丽华关键词:绵羊 卵泡颗粒细胞 WNT信号通路 细胞培养 不同分离方法对绵羊睾丸间质细胞纯度的影响 2014年 旨在探寻一种分离纯度较高的绵羊睾丸间质细胞的分离方法。试验比较了3种不同的分离方法对绵羊睾丸间质细胞纯度的影响。结果表明,机械分离结合细胞筛过滤法,不仅操作简便,而且分离出的间质细胞纯度高于90%。 黄洋 靳辉 曹霞 李鹏飞 姜晓龙 陈建伟 姚晓磊 赵妙妙 吕丽华关键词:绵羊 睾丸 间质细胞 纯度 外源性dsRNA对蛋鸡卵泡CART基因表达及雌激素和孕酮分泌的影响 被引量:5 2016年 旨在研究双链RNA(Double-stranded RNA,dsRNA)对海兰褐蛋鸡卵泡可卡因-苯丙胺调节转录肽(Cocaine-and amphetamine-regulated transcript,CART)基因表达及雌激素(Estrodiol,E2)和孕酮(Progestin,P)分泌的影响。选择60只20周龄海兰褐蛋鸡,全价日粮预饲30d后,随机平均分为3个处理组:对照组(A组)、dsRNA每5d注射1次(B组)、dsRNA仅第1天注射1次(C组);30d后每组各选择10只健康蛋鸡宰杀,分别采集3~5、6~8、9~12mm卵泡,提取总RNA进行qRT-PCR检测;并对E2和P浓度进行测定。结果显示:注射dsRNA后,处理组B和C组CART表达量与对照组相比均降低,且在6~8 mm卵泡CART表达量显著低于对照组(P〈0.05);B组注射dsRNA后,可显著提高6~8、9~12mm卵泡E2的分泌(P〈0.05);但各处理组对各卵泡P浓度无显著影响。表明体外静脉注射dsRNA可抑制蛋鸡卵泡CART的表达,并进一步通过促进卵泡细胞E2的分泌来影响卵泡的发育。 李鹏飞 孟金柱 于雪静 庞钰莹 杜海燕 李晓明 姚晓磊 赵妙妙 吕丽华关键词:蛋鸡 卵泡 CART 双链RNA 雌激素 孕酮 一种简便的机械法分离绵羊睾丸间质细胞的研究 被引量:1 2014年 本文旨在探寻一种取代酶消化法分离绵羊睾丸间质细胞的简便新方法。首先将绵羊睾丸被膜剥离,然后将睾丸切块,采用机械震荡的方法使间质细胞自动脱落,然后用差异贴壁法进一步纯化间质细胞。试验结果表明,该方法分离绵羊睾丸间质细胞省时省力,睾丸间质细胞存活率与纯度都较高。 黄洋 靳辉 曹霞 李鹏飞 姜晓龙 陈建伟 姚晓磊 赵妙妙 吕丽华关键词:绵羊 睾丸 间质细胞