陈建伟 作品数:15 被引量:26 H指数:3 供职机构: 山西农业大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点实验室开放基金 山西省回国留学人员科研经费资助项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
卵泡发育相关基因在牛优势和从属卵泡颗粒细胞中表达的研究 被引量:3 2014年 旨在探究卵泡发育相关基因在牛发情周期内第一卵泡波中优势卵泡(Dominant follicles,DF)和从属卵泡(Subordinate follicles,SF)颗粒细胞中表达差异,进而筛选影响牛卵泡发育的相关基因。通过GEO数据库与基因功能分析筛选与牛卵泡发育相关基因,采用qRT-PCR检测牛第一卵泡波DF和SF颗粒细胞中各基因的表达差异。结果显示:筛选出6个候选基因(SFRP2、CPEB1、PRKAG2、MAPK8、PPP2R2A和PRSS23)与牛卵泡发育有关;qRT-PCR检测,CPEB1在DF中的表达量极显著高于SF(P<0.01),PRKAG2在DF中的表达量显著高于SF(P<0.05);SFRP2和MAPK8在SF中的表达量极显著高于DF(P<0.01);PPP2R2A和PRSS23虽然在DF和SF的表达量存在倍数关系,但差异并不显著。综上表明,在牛卵泡发育过程中,CPEB1和PRKAG2促进卵泡发育,SFRP2和MAPK8对卵泡的发育可能有抑制作用。 姚晓磊 李鹏飞 姜晓龙 孟金柱 黄洋 刘岩 陈建伟 赵妙妙 吕丽华关键词:卵泡发育 基因 胰岛素对体外培养猪卵巢卵泡颗粒细胞生长及增殖的影响 被引量:1 2014年 试验添加不同浓度的胰岛素,检测对颗粒细胞增生和雌激素分泌的影响。培养7d,检测雌激素的浓度和细胞数目。结果表明,随着胰岛素浓度的增加,颗粒细胞的数目和雌激素的分泌量明显提高,当胰岛素的浓度为100ng/mL时,颗粒细胞的数量达到最大值,当胰岛素的浓度达到10ng/mL,卵巢卵泡颗粒细胞分泌雌激素的浓度达到最大值。 刘岩 姜小龙 陈建伟 孟金柱 黄洋 吕丽华关键词:胰岛素 卵泡颗粒细胞 FSH及Wnt信号通路对绵羊卵泡颗粒细胞的增殖及雌激素分泌的影响 被引量:3 2016年 旨在研究Wnt信号通路对绵羊卵泡颗粒细胞增殖及雌激素分泌的影响,探究其是否与促卵泡素(Follicular stimulating hormone,FSH)有关。在添加有FSH以及不同浓度Wnt信号通路抑制剂IWR-1的培养基中培养绵羊卵巢卵泡颗粒细胞168h,利用Guava ViaCount?Reagent测定细胞数目的变化,利用绵羊ELISA试剂盒检测雌激素浓度的变化,利用qRT-PCR检测FSH靶基因CYP19和CCND2的相对表达量差异。结果表明,无论有无FSH,抑制剂IWR-1使颗粒细胞数目显著减少(P<0.05);当有FSH时,抑制剂IWR-1的添加导致雌激素浓度显著降低(P<0.05)。IWR-1的浓度为1.0μmol·L-1时,对颗粒细胞的抑制效果最明显。IWR-1还导致CYP19和CCND2mRNA的表达量降低。综上表明,Wnt信号通路对绵羊卵泡颗粒细胞的生物学功能具有促进作用,并且这种促进作用可能与FSH有关。 赵妙妙 姜晓龙 陈建伟 黄洋 姚晓磊 曹霞 李鹏飞 吕丽华关键词:绵羊 卵泡颗粒细胞 WNT信号通路 细胞培养 蛋鸡卵巢PRSS23基因CDS序列分析 被引量:2 2014年 为获得蛋鸡丝氨酸蛋白酶23(PRSS23)的CDS序列并分析其结构域,试验根据NCBI中公布的其它物种PRSS23的mRNA序列,设计了特异性引物,采用RT-PCR技术扩增PRSS23 CDS全序列。BLAST比对发现,与其它物种PRSS23预测序列以及氨基酸序列同源性分别为99%、92%、91%、86%和100%、96%、96%、90%;通过分析该序列的三级结构,发现在第117到362位氨基酸之间含有一个典型的Tyrp-SPc结构域,该结构域具有典型丝氨酸肽链内切酶活性;通过对其蛋白信号肽预测分析,发现序列中含有信号肽,信号锚定的可能性为72.8%。 孟金柱 李鹏飞 姜小龙 陈建伟 刘岩 黄洋 吕丽华关键词:蛋鸡 卵泡 牛卵泡ODF1与ODF2转录组发育相关基因筛选及表达差异分析 被引量:5 2015年 旨在从牛发情周期第一卵泡波中最大卵泡ODF1(The largest follicle at onset of deviation)和第二大卵泡ODF2(The second largest follicle at onset of deviation)转录组水平上筛选卵泡发育差异表达基因。采集牛发情周期第一卵泡波ODF1和ODF2,分别分离颗粒细胞并提取总RNA,构建RNA文库,通过Illumina平台对ODF1和ODF2测序;筛选出ODF1与ODF2两个转录本之间比值大于2的差异表达基因,并采用qRT-PCR对筛选出的基因在牛发情周期内第一卵泡波优势卵泡(Dominant follicles,DF)和从属卵泡(Subordinate follicles,SF)颗粒细胞中功能验证。共获得8个卵泡发育差异表达基因,其中7个基因筛选自ODF1/ODF2(BEX2、UBN1、SIK1、SPARCL1、LOC784256、LOC789231和LOC785462),1个筛选自ODF2/ODF1(SAFB2);qRT-PCR结果表明,BEX2、UBN1、LOC784256和LOC789231在DF中mRNA表达量极显著高于SF(P<0.01),SAFB2在SF中mRNA表达量极显著高于DF(P<0.01),SIK1和SPARCL1在SF中mRNA表达量显著高于DF(P<0.05),虽然LOC785462在SF中mRNA表达量高于DF,但差异不显著(P>0.05)。qRT-PCR检测BEX2、UBN1、LOC784256、LOC789231和SAFB2的结果与高通量测序中该基因在ODF1和ODF2的RPKM的差异趋势基本一致,而SIK1、SPARCL1和LOC785462不一致。 李鹏飞 孟金柱 谢建山 朱芷葳 刘岩 姜晓龙 陈建伟 姚晓磊 赵妙妙 吕丽华关键词:转录本 卵泡发育 基因 黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡相关基因表达的影响 被引量:3 2015年 为探讨黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡的影响,本试验通过向大鼠睾丸间质细胞的体外培养体系中添加终浓度为20μg/m L的黄芪提取液,利用荧光定量PCR技术研究黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达量的影响。结果:添加终浓度为20μg/m L黄芪提取液的实验组与不添加黄芪提取液的对照组相比,间质细胞内Bax基因表达量显著降低(P<0.01),Bcl-2基因表达量无显著差异,Bax/Bcl-2比值显著下降(P<0.05)。结论:黄芪在一定程度上能够通过抑制凋亡基因Bax的转录,抑制大鼠睾丸间质细胞凋亡。 曹霞 陈建伟 姜晓龙 赵妙妙 姚晓磊 黄洋 吕丽华关键词:黄芪提取液 间质细胞 细胞凋亡 不同日龄犊牛睾丸中细胞周期调控基因CyclinB1和p34^(cdc2)表达的差异 被引量:1 2015年 旨在探究不同日龄犊牛睾丸中细胞周期调控基因CyclinB1和p34cdc2的表达情况。本试验选取发育正常、体重相似的5~6d荷斯坦哺乳公犊18头,随机分为3组,每组6头,饲喂相同的基础日粮,分别在30(断奶)、60和90d时从各组分别随机抽取2头,采集其睾丸备用;通过qRT-PCR技术检测不同日龄犊牛睾丸中细胞周期调控基因CyclinB1和p34cdc2 mRNA表达规律,免疫组化技术对睾丸CyclinB1和p34cdc2进行定位分析。结果表明:90d时CyclinB1和p34cdc2 mRNA表达量显著高于30与60d(P<0.05),但30与60d两种基因mRNA表达量均差异不显著(P>0.05);p34cdc2蛋白在不同日龄犊牛表达差异显著(P<0.05);CyclinB1蛋白在60、90d的表达量显著高于30d(P<0.05),但60和90d差异不显著(P>0.05)。综上表明,CyclinB1和p34cdc2 mRNA和蛋白在睾丸的表达量随着犊牛日龄的增加而增加,且不同的日龄CyclinB1和p34cdc2 mRNA和蛋白表达量存在一定的差异。 姚晓磊 宋瑞高 吕丽华 李鹏飞 刘强 黄洋 陈建伟 姜晓龙 曹霞 赵妙妙 张贵花 王永新 石磊关键词:细胞周期调控 CYCLINB1 热修复中不同pH缓冲液对鸡睾丸组织免疫荧光结果的影响 2014年 探讨热修复中不同pH缓冲液与不同修复温度对鸡睾丸组织免疫荧光结果的影响。选取可被抗体标记的阳性组织,采取不修复、胰蛋白酶修复、不同条件的热修复进行比较。结果表明,抗原修复是必要的,本试验中以缓冲液pH 7.0、97℃下的热修复效果最好。 赵辉 陈建伟 郭丽娜 夏龙钢 张春香 任有蛇关键词:免疫组化 免疫荧光 抗原修复 一种简便的机械法分离绵羊睾丸间质细胞的研究 被引量:1 2014年 本文旨在探寻一种取代酶消化法分离绵羊睾丸间质细胞的简便新方法。首先将绵羊睾丸被膜剥离,然后将睾丸切块,采用机械震荡的方法使间质细胞自动脱落,然后用差异贴壁法进一步纯化间质细胞。试验结果表明,该方法分离绵羊睾丸间质细胞省时省力,睾丸间质细胞存活率与纯度都较高。 黄洋 靳辉 曹霞 李鹏飞 姜晓龙 陈建伟 姚晓磊 赵妙妙 吕丽华关键词:绵羊 睾丸 间质细胞 不同添加剂对大叶速生槐青贮品质的影响 为研究大叶速生槐原料的特性以及大叶速生槐青贮饲料的发酵品质和养分含量,以新鲜大叶速生槐为原料,分别设对照、添加甲酸(6 mL/kg)、蔗糖(1%)、蔗糖(2%)、蔗糖(3%)处理,袋装密封青贮210 d后取样进行分析。结... 张晨辉 孙丽娜 陈建伟 王永新 佟莉蓉 朱慧森 高文俊 许庆方关键词:大叶速生槐 青贮 添加剂 营养成分 文献传递