胡萍
- 作品数：12 被引量：43H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- P38激酶介导胆红素诱导的SHSY5Y细胞凋亡被引量：4
- 2002年
- 观察P38激酶在胆红素诱导神经细胞凋亡中的作用 ,探讨参与此过程的信号转导通路。将胆红素 (2× 1 0 -2g L)直接作用于体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SHSY5Y ,利用Hochest332 58染色在荧光显微镜下观察细胞核的形态是否发生凋亡样改变 ;用P38激酶抑制剂SB2 0 3580预处理细胞后 ,在倒置光显微镜下观察胆红素作用不同时间细胞形态的变化及存活情况 ;利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的改变。结果显示SHSY5Y细胞经胆红素作用后细胞核出现典型的凋亡样改变 ;细胞经SB2 0 3580预处理 1h ,胆红素作用 3h后凋亡率为 (1 2 1± 2 4) % ,对照组为(1 9 4± 2 7) % ;4h后凋亡率为 (39 3± 4 8) % ,对照组为 (66 2± 5 2 ) % ,差异有显著性意义 (P <0 0 1 )。
- 韩张胡萍倪道凤
- 关键词：胆红素P38激酶凋亡
- 短暂激活c-jun N-terminal激酶抑制胆红素诱导的SH-SY5Y细胞凋亡被引量：7
- 2002年
- 探讨c junN terminal激酶 (JNK)在胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡信号转导中的作用。我们用 30 0 μmol LH2 O2 预处理SH SY5Y细胞 1h以激活JNK ,与经PBS预处理的对照组比较 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞百分比由 (37 4± 3 2 ) %降低到 (12 6± 2 6 ) %。为了进一步证实JNK的作用 ,在SH SY5Y细胞经H2 O2 预处理前 ,先经 2 0 μmol LJNK c jun AP1抑制剂curcumin作用 12h以抑制H2 O2 对JNK的激活 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞增高到 (42 8± 4 4 ) % ,curcumin完全抑制了短暂激活JNK所提供的保护作用。结果表明短暂激活JNK可能在胆红素诱导的SH SY5Y细胞凋亡中提供抗凋亡信号 。
- 韩张胡萍倪道凤
- 关键词：细胞凋亡胆红素人神经母细胞瘤细胞
- RGS4对阿片受体信号转导途径中腺苷酸环化酶活性的影响被引量：2
- 2001年
- 目的 探讨 RGS4在整体细胞中对阿片受体信号转导途径中腺苷酸环化酶 (AC)活性的影响。方法 采用共转染法将μ-受体、δ-受体和 RGS4基因导入 HEK- 293细胞，受体结合法确定转染效率。用不同浓度的吗啡、 DAMGO和 DPDPE分别激活μ-受体和δ-受体，放射性蛋白竞争结合（非标记底物）法测定 cAMP浓度 。结果 受体被其特异的激动剂激活后，单独转染 μ-受体或δ-受体基因的细胞其 AC活性被抑制，且对激动剂表现出高度的剂量依赖性；空质粒（ pcDNA3）转染的细胞之 AC活性不受各种激动剂影响 ;同时转染 RGS4和 μ-受体基因的细胞其 AC活性虽然也呈现剂量依赖性抑制，但抑制的强度比单独转染μ-受体基因的细胞明显减弱 ; RGS4和 δ-受体基因共转染并不影响δ-受体对 AC活性的抑制。受体结合实验显示 RGS4不影响μ-受体和δ-受体的表达。结论 RGS4能逆转μ-受体对 AC的抑制效应，但对δ-受体却没有相同的作用。这可能反映了不同阿片受体分子机制的差异。
- 谢志华胡萍叶菜英杨惠芬刘丽云张德昌
- 关键词：阿片受体共转染腺苷酸环化酶
- 新型阿片受体配基的生物鉴定被引量：1
- 2001年
- 目的 研究新合成的阿片受体配基对μ阿片受体的激动作用。方法 采用生物鉴定的方法，检测新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡对豚鼠回肠（ GPI）纵行肌收缩的抑制作用和所激动的阿片受体亚型，评价效价强度，测定 IC50值。结果 新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡都可抑制 GPI的电刺激收缩，在 GPI上显示纯激动剂作用。新型阿片受体配基与阿片受体的结合为可逆性结合。新型阿片受体配基 1＃、 2＃、 3＃、 6＃、 8＃、 9＃和 12＃以及典型的阿片受体激动剂 DAMGO和吗啡的 IC50值分别为 (11.57± 0.71)、 (1255.00± 407.00)、 (9.40± 1.41)、 (240.60± 146.40)、 (453.00± 7.07)、 (130.60± 10.61)、 (7.68± 0.71)、 (12.04± 0.61)和 (72.15± 22.63)nmol/L。竞争性拮抗剂纳洛酮可拮抗配基的激动作用，使新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡的量效曲线平行右移。结论 新型阿片受体配基可激动μ阿片受体，是典型的μ受体激动剂。
- 胡萍谢志华杨惠芬仇缀佰张德昌叶菜英
- 关键词：Μ阿片受体激动剂镇痛药
- 反义P38cDNA抑制胆红素诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡
- 目的:观察 P38激酶特异性抑制剂 SB203580及反义 P38激酶 cDNA 对胆红素诱导人神经母细胞瘤 SH-SY5Y 细胞凋亡的影响,探讨 P38激酶信号转导通路在胆红素诱导 SH-SY5Y 细胞凋亡中的作用及高...
- 韩张胡萍倪道凤
- 关键词：胆红素凋亡信号转导P38激酶神经母细胞瘤听神经病
- 文献传递
- 新型阿片受体配基特异性结合μ受体并抑制cAMP生成
- 2003年
- 本文研究新合成阿片受体配基对稳定表达 μ阿片受体的CHO细胞的受体结合特性和对胞内cAMP的抑制作用。采用放射性配基结合的方法研究了阿片受体配基 [3H] diprenorphine(3H dip)在稳定表达 μ阿片受体的CHO细胞模型上 ,对 μ阿片受体的饱和性结合特征及和一系列新合成阿片配基A、B、C、D、E、F、G、及DAMGO([D Ala ,N Me Phe4 ,Gly ol5] enkephalin)和吗啡的竞争性结合特征。利用竞争性结合蛋白法测定阿片受体配基对胞内cAMP的抑制作用。 [3H] diprenorphine结合 μ阿片受体的Kd值为 1 0 6nmol L ;Bmax为 930fmol mg蛋白。结果表明新配基、DAMGO和吗啡竞争性结合 μ受体的IC50 值分别为 13 33± 3 73、14 36± 1 5 8、0 6 2± 0 0 3、5 6 38± 2 33、6 5 72±2 6 4 4、33 10± 11 33、0 5 5± 0 0 6、3 6 9± 1 5 9和 1 83± 0 5 0。其中C和G配基对 μ阿片受体的亲和力高于DAMGO和吗啡。B、D、E和F配基对μ受体的亲和力低于DAMGO和吗啡。新配基、DAMGO和吗啡抑制cAMP生成的IC50 值分别为 6 4 9± 1 5 9、1390± 6 1 10、0 84± 0 11、2 33± 1 2 4、2 5 0 0± 17 2 0、1 4 2± 1 2 1、0 0 1± 0 0 1、0 10± 0 0 5和0 0 4± 0 0 1。其中G配基的抑制胞内cAMP作用最强 ,强于吗啡 。
- 胡萍叶菜英仇缀佰杨惠芬张德昌
- 关键词：Μ受体CAMP受体结合CHO细胞阿片类药物
- 新合成阿片受体配基对δ受体的激动作用
- 2002年
- 研究新合成的阿片受体配基对δ阿片受体的激动作用。采用生物鉴定的方法 ,检测新型阿片受体配基、DP DPE和吗啡对小白鼠输精管 (MVD)收缩的抑制作用和检测所激动的阿片受体亚型 ,以达到最大抑制作用的 5 0 %的药物浓度 (IC50 值 )评价效价强度。结果表明新型阿片受体配基、DPDPE和吗啡 (Mor)都可抑制MVD的电刺激收缩 ,显示纯激动剂作用。认为新型阿片受体配基与阿片受体的结合为可逆性结合。新型阿片受体配基A、C、D、E、F和G以及典型的阿片受体激动剂DPDPE和吗啡的IC50 值分别为 31 73± 3 5 4、15 92± 9 19、88 70± 16 2 6、10 74 0 0± 2 6 3 0 0、74 88± 5 8 6 9和 6 7 16± 8 4 9、3 2 0± 0 0 5、6 9 84± 2 7 5 8nmol L。竞争性拮抗剂纳洛酮 (Nal)可拮抗配基的激动作用 ,使新型阿片受体配基 ,DPDPE和吗啡的量效曲线平行右移。新型阿片受体配基可激动δ阿片受体 。
- 胡萍叶菜英仇缀佰杨惠芬张德昌
- 关键词：Δ阿片受体激动剂生物鉴定
- 新型阿片受体激素剂对稳定转染CHO细胞的δ受体的结合和激动阿片受体亚型的鉴定
- 2001年
- 胡萍刘丽云
- 关键词：阿片受体激动剂Δ受体
- 胆红素诱导神经细胞凋亡及对其线粒体膜电位的影响——胆红素对中枢神经细胞损伤机理的研究被引量：26
- 2002年
- 目的 观察胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡及对其线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,MMP)的影响 ,探讨高胆红素血症对中枢神经细胞损伤的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法 将胆红素 (0 0 2g/L)直接作用于体外培养的SH SY5Y细胞 ,在不同时间点通过倒置显微镜观察细胞形态的变化及存活情况 ;经Hoechst332 5 8染色后 ,在荧光显微镜下观察细胞核的形态变化 ;利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率 ;经罗丹明 12 3染色后 ,用流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化。结果 在 0 0 2g/L胆红素作用下 ,SH SY5Y细胞 2h后即可见较多细胞皱缩、变圆 ,4h可见有少数细胞飘起 ,细胞轮廓不清 ,6h可见大部分细胞飘起 ,并已开始崩解 ;染色质在胆红素作用 6h出现典型的凋亡样改变 ;细胞凋亡率随作用时间的延长明显增加 ,3h为 19 4 % ,4h为 76 4 % ,6h达到 79 0 % ;在胆红素作用 1h后反映线粒体膜电位相对荧光强度即由 (16 6± 1 5 5 6 )U下降到 (7 11± 0 70 1)U ,差异有显著性 (P <0 0 1) ,并随作用时间的延长而进一步降低。结论 胆红素作用早期即可导致SH SY5Y细胞线粒体膜电位下降 ,既而发生凋亡 ,提示通过诱导听觉中枢神经元凋亡可能在高胆红素血症所致的听力损伤和听神经病发病中起重要作?
- 韩张胡萍倪道凤
- 关键词：胆红素脱噬作用线粒体膜电位MMP神经母细胞瘤细胞凋亡
- 新合成的阿片受体配基对稳定转染μ阿片受体的CHO细胞的受体结合特性
- 2003年
- 目的研究新合成的阿片受体配基对稳定表达于CHO细胞的μ阿片受体的结合特性。方法采用细胞生物学和放射性配基结合的方法,以能稳定表达μ阿片受体的CHO细胞为模型,检测阿片受体配基犤3H犦diprenorphine(3H-dip)与μ阿片受体的饱和性结合特征及一系列新合成阿片配基的竞争性结合特征。结果(3H-dip)结合μ阿片受体的平衡解离常数Kd值为1.06nmol/L;受体最大容量Bmax为930fmol/mg蛋白。竞争性结合实验表明3#和12#配基对μ阿片受体的亲和力高于DAMGO和吗啡。2#、6#、8#和9#配基对μ受体的亲和力低于DAMGO和吗啡。结论新配基3#和12#对μ亚型的阿片受体有良好的亲和力。2#、6#、8#和9#配基对μ受体的亲和力较低。
- 胡萍叶菜英仇缀佰杨惠芬张德昌
- 关键词：受体结合Μ阿片受体
