黄元华
- 作品数:128 被引量:747H指数:12
- 供职机构:海南医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金海南省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 膀胱电切镜代替宫腔镜行子宫腔内病变电切术——附4例报告
- 2000年
- 张岩肖劲逐卢伟英徐雯黄元华
- 关键词:宫腔疾病
- 小鼠胚胎及人包皮成纤维细胞按比例制成混合饲养层上的人胚胎干细胞生长状态被引量:4
- 2008年
- 目的:人胚胎干细胞传代培养的关键是抑制其自发分化、保证细胞的全能性。欲解决以小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞为常规饲养层培养人胚胎干细胞时存在的问题,观察两者按一定比例制成的混合饲养层上人胚胎干细胞的生长状态。方法:实验于2006-04/2007-07在海南医学院附属医院生殖医学中心完成。①对象:包皮来自于行包皮环切的儿童,由海南医学院附属医院泌尿外科提供,儿童家属对治疗及实验均签署知情同意书,实验经医院医学伦理委员会批准。人胚胎干细胞系HN-1由本实验室从人类囊胚中分离培养并鉴定。清洁级孕12.5~14.5d的胎鼠11只,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法:将去除头、四肢和内脏的胎鼠按常规胰蛋白酶反复消化法获得细胞悬液进行接种培养,待生长汇合后冻存部分原代细胞,用丝裂霉素C处理2.0~3.0h后,按1×108L-1密度接种于明胶包被的中心皿内,即小鼠胚胎成纤维细胞饲养层。人包皮成纤维细胞的分离培养与饲养层制备同上。上述两种成纤维细胞分别计数后,按1:0,3:1,1:1,1:3,0:1比例混合,然后以1×108L-1密度接种于明胶包被的中心皿内,即混合饲养层。③实验评估:观察体外传代培养的人胚胎干细胞在3种不同饲养层上的生长状态。并对生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞进行碱性磷酸酶检测、OCT-4表达免疫组化检测、OCT-4及端粒酶mRNA表达RT-PCR检测。撤除饲养层,观察人胚胎干细胞体外分化情况。结果:①不同饲养层上人胚胎干细胞的生长状态比较:生长在小鼠胚胎成纤维细胞和人包皮成纤维细胞上的人胚胎干细胞克隆扁平、不饱满,而生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞克隆饱满、厚实,其克隆形态显著好于其他两种饲养层。②人胚胎干细胞在不同比例混合饲养层上的生长状态比较:小鼠胚胎成纤维细胞
- 李斌彭秋平卢伟英徐雯金应霞黄元华
- 关键词:人胚胎干细胞成纤维细胞饲养层
- mir-133在心肌肥大中作用机制的研究
- 李崎马燕琳常江杨祥胜林曦黄元华
- 该项研究证实了T细胞核因子IV(nuclearfactorofactivatedTcellIV,NFATc4)为mir-133a的靶基因,通过对NFATc43’UTR区特定位点的结合,mir-133a可以实现对该基因表达...
- 关键词:
- 关键词:心肌肥大
- 诱导多能干细胞与细胞重编程技术的研究与未来被引量:6
- 2013年
- 背景:目前重编程技术的快速发展为干细胞的研究提供了广泛的前景。诱导多能干细胞避免了胚胎干细胞在研究及应用过程中面临的伦理问题,通过重编程技术可以获得患者特异性诱导多能干细胞和疾病特异性诱导多能干细胞,显著减少了免疫排斥反应。然而重编程技术还存在一些难题:如效率低、安全问题等。目的:以诱导多能干细胞特点及重编程的基本原理为出发点,从细胞来源、载体、转录因子、microRNA、信号转导通路等5个方面,论述重编程技术的研究进展。方法:以"重编程,诱导多能干细胞,信号转导通路,表观遗传,microRNA,转录因子,载体,体细胞,小分子化合物,安全性"为中文检索词,"reprogramming,induced pluripotent stem cell,signal transduction pathway,epigenetics,microRNA,transcription factor,vector,somatic cell,small molecule compound,safety"为英文检索词,应用计算机检索维普(VIP)期刊全文数据库、万方全文数据库、中国知网全文数据库、PubMed数据库、Springer数据库1990年1月至2013年4月有关诱导多能干细胞与细胞重编程技术的文献,排除与研究目的无关及重复性研究,保留67篇文献进一步分析。结果与结论:通过尝试运用不同种类的细胞、载体、转录因子、microRNA或抑制信号转导通路,重编程效率有所提高,安全问题有所改善。但目前这些技术难题仍然未被解决,诱导多能干细胞仍不能用于临床。要实现诱导多能干细胞在临床上的应用,必须进一步明确重编程的机制,优化重编程策略。
- 赵星黄元华马燕琳
- 关键词:干细胞重编程诱导多能干细胞信号转导通路表观遗传小分子化合物
- QPCR技术检测孕妇外周血中胎儿DNA方法的建立被引量:1
- 2013年
- 目的:建立QPCR技术检测孕妇外周血中胎儿DNA的方法,并探讨其方法的稳定性、灵敏性与可靠性。方法:通过prime5.0设计出SRY与β-globin的TapMan探针,并对其QPCR反应体系进行优化。结果:分别得到了SRY与β-globin的引物及探针的反应最适浓度比,建立了其最佳QPCR反应体系,并得出所需外周血的最少量。结论:成功建立了QPCR技术检测孕妇外周血中胎儿DNA的方法,该方法将可用于无创性相关产前诊断。
- 凌奕金松易国辉袁媛陈芳黄振兰黄垂灿黄元华
- 关键词:SRY基因CELLFETALDNA
- 三种不同饲养层上人胚胎干细胞生长状态的比较(英文)
- 2008年
- 背景:人胚胎干细胞传代培养的关键是抑制其自发分化、保证细胞的全能性。以小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞作为饲养层尽管能够维持胚胎干细胞的未分化状态,但存在细胞克隆不饱满、平铺情况明显等问题。目的:制备小鼠胚胎成纤维细胞与人包皮成纤维细胞的混合饲养层,观察人胚胎干细胞在其上面的生长状态。设计:多样本观察比较。单位:海南医学院附属医院生殖医学中心。材料:实验于2006—04/2007—07在海南医学院附属医院生殖医学中心完成。包皮来自于行包皮环切的儿童,由海南医学院附属医院泌尿外科提供,儿童家属对治疗及实验均签署知情同意书,实验经医院医学伦理委员会批准。人胚胎干细胞系HN—1由本实验室从人类囊胚中分离培养并鉴定。清洁级孕12.6-14.5d的胎鼠11只,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。方法:胎鼠麻醉后去除头、四肢和内脏,按常规胰蛋白酶反复消化法获得细胞悬液进行接种培养,待生长汇合后冻存部分原代细胞,用丝裂霉素c处理2.0—3.0h后,按1 × 10^8 L^-1密度接种于明胶包被的中心皿内,UPd,鼠胚胎成纤维细胞饲养层。人包皮成纤维细胞的分离培养与饲养层制备同上。上述两种成纤维细胞分别计数后,按1:0,3:1,1:1,1:3,0:1比例混合,然后以1 × 10^8 L^-1密度接种于明胶包被的中心皿内,即混合饲养层。观察体外传代培养的人胚胎干细胞在3种不同饲养层上的生长状态,并对生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞进行碱性磷酸酶检测、OCT-4表达免疫组化检测、OCT-4及端粒酶mRNA表达RT-PCR检测。撤除饲养层,观察人胚胎干细胞体外分化情况。主要观察指标:①不同饲养层上人胚胎干细胞的生长状态比较。②人胚胎干细胞在不同比例混合饲养层上的生长状态比较�
- 李斌彭秋平卢伟英徐雯金应霞黄元华
- 关键词:人胚胎干细胞成纤维细胞饲养层
- 两种培养条件下人胚胎干细胞生长状况的比较
- 2013年
- 目的:比较胚胎干细胞株在两种不同培养体系下生长状况,验证两种不同培养体系对于人胚胎干细胞全能性的维持与延续。方法:将人类胚胎干细胞株分别接种于传统的培养体系以及mTESR1的培养体系,观察在不同培养体系下人类胚胎干细胞状态及克隆形态之间的差别。对生长于不同培养体系下的胚胎干细胞进行碱性磷酸酶染色、免疫荧光染色以及用RT-PCR的方法检测人胚胎干细胞全能性。结果:生长在传统培养体系中的胚胎干细胞,细胞克隆薄且扁平,与周围的饲养层细胞边界清晰,克隆中心的细胞容易出现分化。单个胚胎干细胞核质比高,核仁明显。生长mTESR1体系中的胚胎干细胞,细胞克隆较传统培养体系下的大,呈单层细胞生长,细胞排列紧密,单个胚胎干细胞的细胞核大,核仁明显,核质比高。生长在不同培养体系下的人胚胎干细胞碱性磷酸酶染色均呈现阳性,免疫荧光染色及RT-PCR均验证了细胞的全能性。结论:两种不同培养体系均能维持胚胎干细胞的全能性。mTESR1培养条件更加简便,能更清楚观察与分析单个细胞的形态,适合人胚胎干细胞的维持培养。
- 蒋伟民赵星李崎张宇周知马宁李林江徐雯卢伟英黄元华马燕琳
- 关键词:人胚胎干细胞饲养层细胞MATRIGEL
- 男性年龄对非男性不育夫妇IVF妊娠结局的影响被引量:4
- 2017年
- 目的探讨男性年龄对非男性不育夫妇行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)治疗妊娠结局有无影响。方法收集2015年1月至2016年12月在海南医学院第一附属医院生殖医学中心因女方输卵管因素进行IVF助孕治疗且女方年龄小于35岁患者的临床资料,共658个周期。根据男方年龄分为4组:A组(<35岁)、B组(35~39岁)、C组(40~44岁)和D组(≥45岁),分别比较各组间的受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率、胚胎利用率、种植率、临床妊娠率、流产率及活产率,分析各指标之间有无差异。结果 C组临床妊娠率均低于其它3组,差异有统计学意义(P<0.05),其它指标在各组间的差异均无统计学意义。结论在非男性不育夫妇中,男性年龄对辅助生殖技术临床妊娠率可能存在负面影响,但不影响最终的活产率。
- 孙文枫黄元华张毅谢宝国卢伟英
- 关键词:体外受精-胚胎移植
- 母乳喂养的新生儿体温分析
- 1996年
- 本文研究了不同气候条件下母乳喂养新生儿的发热情况,研究组中,夏季(A组)日平均体温为36.68±0.22℃,稍高于各混合喂养对照组(P<0.05)。A、B(秋季)、C(冬季)各组5日内的总发热率分别为39.65%、15%和10.7%明显高于各自的对照组。其中,A组发热率明显而于B和C组(P<0.01)。新生儿发热多于出生24h后出现,出生后3天达最高峰,5天降至较低水平。新生儿出生体重越重发热率越高。体重≥3500g者,发热率达72.73%。结合各组所在时期的气温、湿度,母乳喂养儿早期发热可能与海南特殊湿热气候条件下水份摄入不足有关。
- 黄元华徐雯华少平郝美娟
- 关键词:新生儿发热母乳喂养
- 辅助生殖技术中男性精液常规分析参数与胚胎停育的关系被引量:1
- 2014年
- 目的:探讨辅助生殖技术( ART)中男性精液常规分析参数与常规体外受精-胚胎移植( IVE-ET)和宫腔内人工授精( IUI)中胚胎停育的关系。方法选择郑州大学第一附属医院生殖医学中心2009年1月至2013年8月行IVF-ET和IUI的夫妇1822对进行回顾性研究,对这些夫妇男性精液常规分析参数行统计学分析。结果1333对行IVF-ET和489对行IUI的夫妇中,女方年龄差异有统计学意义(P﹤0.05),男性精液常规分析参数差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论在IVF-ET及IUI中,男性精液常规分析参数与胚胎停育间无显著相关;胚胎停育与女性年龄有关。精液常规分析参数不能作为胚胎停育的病因诊断指标。
- 郝佳渊郭艺红苏迎春黄元华
- 关键词:胚胎停育精液常规分析辅助生殖技术