张双民 作品数:15 被引量:136 H指数:5 供职机构: 中山大学中山医学院寄生虫学教研室 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 广州市科技计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 轻工技术与工程 更多>>
日本血吸虫SjCa8基因的原核表达及其免疫学特征分析 被引量:3 2006年 目的表达和纯化日本血吸虫钙结合蛋白(SjCa8),研究其免疫学特征。方法重组质粒pET32a (+)-SjCa8经诱导表达后,获取纯化蛋白SjCa8,利用ELISA、Western-blot和动物保护性实验检测SjCa8的免疫学特征。结果成功获取了纯化蛋白SjCa8,该蛋白能免疫识别血吸虫感染小鼠血清和血吸虫病患者血清。SjCa8免疫Balb/c小鼠可获得较高滴度的特异性抗体,诱导宿主产生35.31%的减虫率和35.68%的减卵率。结论纯化蛋白SjCa8具有良好的免疫原性和免疫反应性,具有作为血吸虫病免疫诊断和疫苗候选分子的研究价值。 吕志跃 杨琳琳 胡旭初 周何军 王丽 张双民 孙希 胡斐 郑焕欣 曹爱莲 余新炳 吴忠道关键词:钙结合蛋白 免疫学试验 日本血吸虫特异性膜蛋白的筛选及其中sj15蛋白编码序列的克隆 被引量:2 2007年 目的:筛选日本血吸虫可能的特异性膜蛋白,并根据筛选结果在日本血吸虫成虫中尝试克隆某一可能具有免疫保护功能的预测蛋白的编码序列,为血吸虫病防治研究寻找新的疫苗候选分子或药物靶标。方法:以"Schistosoma japonicum"和"membrane or tegument"为关键词,在公共数据库NCBI进行查找并下载数据,建立本地化的日本血吸虫膜蛋白序列数据库,与本实验室建立的曼氏血吸虫、人类、大鼠及小鼠蛋白质数据库等进行多序列比对,筛选日本血吸虫特异性膜蛋白,同时通过CBS网站相应分析工具软件预测目的蛋白的特征和功能。针对其中可能有免疫保护功能的预测蛋白的预测编码序列设计引物,采用RT-PCR技术从日本血吸虫成虫中扩增出该编码序列,并克隆入pGEX-4T-1构建原核表达重组质粒。结果:共检索到153个理论推测的日本血吸虫膜蛋白序列,筛选出28个可能的日本血吸虫特异性膜蛋白;成功从日本血吸虫成虫中扩增出相对分子质量为15 000的预测蛋白的预测编码序列,暂命名为sj15基因,同时成功构建pGEX-4T-1-sj15重组质粒。结论:成功筛选出多个日本血吸虫特异性膜蛋白;从日本血吸虫成虫中成功克隆出GenBank公布的预测的sj15基因,证实了成虫中该预测基因的存在,并成功构建原核表达载体,为进一步的功能研究奠定了基础。 张双民 张莉滟 刘稳升 吕志跃 郑焕钦 吴忠道关键词:膜蛋白质类 生物信息学 连翘叶提取物抑菌作用的研究 被引量:77 2005年 目的探讨连翘叶提取物及连翘苷的体外抑菌作用。方法K-B纸片扩散法。结果青翘、老翘、连翘叶提取物及连翘苷均有一定的抑菌作用,并且连翘叶的抑菌作用优于老翘及青翘。结论连翘叶提取物有较好的抑菌作用。 段飞 张双民 杨建雄 李发荣关键词:连翘叶 连翘苷 抑菌作用 微生物学几个相似概念的解析 2005年 张双民关键词:微生物学 中学生物学 教学参考 生物学概念 陕西师范大学雁塔校区大气微生物污染调查 被引量:9 2005年 在对陕西师范大学雁塔校区教学区和生活区大气微生物污染检测的基础上,评价与分析了雁塔校区大气微生物的污染状况。依照中科院生态学研究中心制定的大气微生物污染评价的七级标准,雁塔校区内大气微生物污染轻微,其中教学区大气微生物含量高于生活区,但是都能达到清洁空气的标准。 张双民 曾才彬 刘龙军关键词:大气微生物 污染 大气微生物 校区 污染调查 污染评价 微生物含量 污染检测 土壤中淀粉酶高产菌株的分离及产酶条件的优化 被引量:20 2006年 从土壤中分离到淀粉酶产生菌,获得产酶量相对较高的菌株,并从pH和培养温度两方面对产酶条件进行优化。实验结果显示,土壤中分离的菌株有较高的淀粉酶活力,产酶条件适用于工农业生产。 张双民关键词:淀粉酶 产酶条件 以学生为中心的微生物学课堂教学的研究 '以教师为中心'的单向传授知识的传统课堂教学模式,限制了学生学习主动性的发挥.我们通过调查研究和自身的实践,提出了'以学生为中心'的微生物学课堂教学模式,特别是在教学活动的安排上作了多方面的探索. 陶树兴 张双民 梁健 魏希颖关键词:微生物学 课堂教学 以学生为中心 教学模式 教学改革 文献传递 重组日本血吸虫Sj16蛋白调节宿主炎症反应的实验研究 被引量:1 2008年 目的评价日本血吸虫重组蛋白(reSj16)调节宿主炎症反应的效果。方法在大肠埃希菌中对重组pGEX-4T-1-Sj16基因进行原核表达并纯化重组蛋白。56只昆明小鼠随机分为7组(每组8只),其中5个实验组,所用reSj16蛋白剂量分别为0.1、0.5、1.0、5.0和10.0μg/kg;并设地塞米松(5.0μg/kg)和生理盐水(0.1ml/只)对照组。进行小鼠耳廓肿胀和毛细血管通透性实验,观察reSj16蛋白对二甲苯致小鼠耳廓肿胀作用和毛细血管通透性改变的影响。56只SD大鼠进行角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀实验,56只昆明小鼠进行实验性腹膜炎小鼠腹腔毛细血管通透性改变实验,观察reSj16调节宿主炎症反应效果。结果0.1、0.5、1.0、5.0和10.0μg/kg的reSj16蛋白均可明显减轻二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和毛细血管通透性增加,抑制角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀,明显抑制实验性腹膜炎小鼠腹腔毛细血管通透性增高,且具有一定的剂量依赖关系。1.0、5.0和10.0μg/kg的reSj16蛋白组与对照组相比,差异具有统计学意义。结论Sj16具有明显的调节宿主炎症反应的作用。 孙希 周何军 吕志跃 张双民 胡少敏 郑焕钦 冯明钊 吴忠道关键词:日本血吸虫 抗炎 角叉菜胶 提高微生物学课堂教学效果的四要素——知、技、力、情 被引量:11 2004年 集传统和现代教学方法 ,实践知、技、力、情的有机结合 ,激发学生学习兴趣 。 张双民 陶树兴关键词:微生物学 教学效果 广州地区患儿流感嗜血杆菌分离株荚膜基因分型的研究 被引量:5 2007年 目的用PCR方法进行流感嗜血杆菌荚膜编码基因分型,调查儿童急性呼吸道感染患儿流感嗜血杆菌的感染情况。方法以流感嗜血杆菌荚膜编码基因(bexA)和荚膜分型编码基因(Hi-a、Hi-b)作为靶基因设计引物,用PCR方法扩增标准菌株为ATCC9006、ATCC49247、EQA0609的3个编码基因并测序,在此基础上对临床分离的43株流感嗜血杆菌进行荚膜基因分型研究。结果PCR结果显示标准菌株ATCC49247未扩增出bexA编码基因,ATCC9006扩增出bexA和Hi-a编码基因,EQA0609扩增出为bexA和Hi-b编码基因,并且PCR产物序列与GenBank公布的序列一致性高。临床分离菌株Hi未扩增出bexA、Hi-a及Hi-b编码基因。结论本实验研究表明广州地区儿童急性呼吸道感染患儿所分离的流感嗜血杆菌主要是不可分型的无荚膜菌株。 张莉滟 张双民 吕志跃 吴忠道关键词:流感嗜血杆菌 PCR