- 左卡尼汀对波动性高糖处理大鼠心肌细胞脂联素受体表达影响的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨左卡尼汀（L-carnitine,L-CN）对波动性高糖处理大鼠心肌细胞（rat myocardial cell,RMC）脂联素受体（AdipoR1和AdipoR2）表达的影响。方法将RMC在高糖（20 mmol/L）、波动性高糖培养液（5.5 mmol/L和20 mmol/L每隔8 h轮换1次）中培养5 d后,随机分为正常组、高糖组、波动性高糖组、波动性高糖＋L-CN处理组（102、2.5×102、5×102、103、104、105及106μΜ）。运用细胞增殖试验（CCK8法）检测细胞存活率,依据细胞增殖试验的结果,将分组调整为阴性对照（正常组）、阳性对照（波动性高糖组）、波动性高糖组＋L-CN处理组（102、2.5×102、5×102、103及104μΜ）,应用实时荧光定量PCR方法检测AdipoR mRNA表达的改变。结果与正常组相比,高糖组心肌细胞OD值降低不明显;波动性高糖组心肌细胞OD值减小,与正常组比较差异有显著性（P〈0.05）。提示波动性高糖组对细胞的损害作用明显高于单纯高糖组。L-CN（5×102μΜ）处理组较波动性高糖组OD值增加,差异有显著性（P〈0.05）;L-CN（2.5×102、103及104μΜ）处理组较波动性高糖组OD值增加,差异无显著性（P〉0.05）;L-CN（105μΜ和106μΜ）处理组较波动性高糖组OD值下降,提示左卡尼汀的作用浓度在102~104μΜ之间。L-CN处理后RMCs AdipoR1 mRNA、AdipoR2mRNA均明显增高（P〈0.01）,当L-CN工作浓度在5×102μΜ时,AdipoR表达增加更明显。结论波动性高糖与单纯高糖相比对细胞的损害作用更强,左卡尼汀可在一定程度上降低波动性高糖引起的细胞损害作用,且药物有效浓度在102~104μΜ之间。在波动性高糖环境中,RMC AdipoR mRNA表达下调（P〈0.01）,左卡尼汀能明显上调波动性高糖处理后大鼠心肌细胞AdipoR mRNA表达（P〈0.01）,从而为L-CN类药物更广泛应用于糖尿病心肌病变提供了新思路和新证据。
- 刘雯雯陈宁乙成成殷仁富
- 关键词：左卡尼汀波动性高糖大鼠心肌细胞脂联素受体实时定量PCR
- TLR与肝脏疾病被引量：2
- 2011年
- 1988年Hashimoto首次在果蝇体内发现Toll样受体（TLR）,对果蝇的天然免疫起作用。1997年发现的TLR为存在于人细胞表面的跨膜蛋白,TLR作为主要的模式识别受体,在机体先天性免疫应答中发挥着重要作用。目前在人体内已发现十多个TLR,广泛分布于各种组织中,其细胞及组织分布有特异性[1]。TLR介导特异的信号通路,形成一个复杂的、联合性的网络,特异地识别大量病原体及组织代谢产物等。
- 陈宁刘雯雯朱樑
- 关键词：肝脏疾病HASHIMOTO模式识别受体TOLL样受体细胞表面
- 左旋卡尼汀的研究进展被引量：3
- 2010年
- 左旋卡尼汀(L-CN),可由哺乳动物体内自身合成。L-CN的作用是协助长链脂酰辅酶A进入线粒体内膜,促进脂肪酸β氧化,加速三磷酸腺苷的产生,提高组织细胞内三磷酸腺苷水平。以前研究表明,L-CN可以通过改善缺血心肌的功能和促进能量代谢,有效地治疗急性心肌梗死及改善预后;通过改善维持性血液透析患者的红细胞免疫功能、抗氧化功能、降低铁负荷水平,提高血液透析患者的生活质量;通过减少氧自由基生成、增强细胞抗氧化损伤能力,发挥抗氧化、抗凋亡的细胞保护作用。近来研究又发现了L-CN的其他作用。
- 刘雯雯陈宁殷仁富
- 关键词：左旋卡尼汀血液透析细胞保护老年综合征
- 一种改良的肝星状细胞分离方法被引量：1
- 2011年
- 目的改良肝星状细胞(HSC)的分离方法,为深入研究肝纤维化的发生机制奠定基础。方法采用Ⅳ型胶原酶和链酶蛋白酶原位消化肝脏,在1.040～1.060 g/mL范围内多重多次密度梯度离心分离HSC,台盼蓝染色测定细胞存活率,328 nm紫外光激发HSC自发蓝绿色荧光法和Desmin细胞免疫荧光法鉴定HSC及检测HSC纯度。Desmin和α-SMA细胞免疫荧光方法鉴定HSC静息和活化状态。结果每只大鼠肝脏HSC得率为(3～5)×107个,HSC存活率在95%以上,纯度在90%以上,体外培养14 d后活化的HSC纯度几乎达100%。结论在1.040～1.060 g/mL密度范围内采用多重多次密度梯度离心方法,避免了HSC分离过程中因密度配比误差及HSC自身密度相对不均一性所导致的细胞流失,建立了一种改良的肝星状细胞分离方法,HSC得率和纯度更加稳定,达到国外文献报道水平。
- 陈超陈宁覃霞朱樑
- 关键词：肝星状细胞细胞分离肝纤维化
- 大鼠原代肝细胞分离与培养被引量：4
- 2011年
- 目的分离及培养高纯度的原代大鼠肝细胞。方法用D-Hanks液及胶原酶消化液分两步原位灌注大鼠肝脏,分离细胞经3次低速离心(50×g,5 min)后获得纯化的肝细胞。肝细胞存活率检测用台盼蓝拒染法,鉴定用PAS染色法。结果每只体质量约200 g的大鼠能成功分离出(1.0～1.5)×108个肝细胞,成活率在90%以上,细胞培养24 h,有部分细胞贴壁,48 h有大量细胞贴壁。以PAS染色对肝细胞进行鉴定,肝细胞为粉红色。结论肝细胞分离培养成功,对分离方法的改进措施可行。
- 陈宁覃霞朱樑
- 关键词：肝细胞
- 上皮-间质转化的分子机制及其在肝病中的研究进展
- 2010年
- 上皮-间质转化（EMT）是一种哺乳动物胚胎发育过程中必需的生理现象。上皮-间质转化不仅参与胚胎的形成、发育、组织重建、创伤愈合、心瓣膜和颅面结构以及肌肉骨骼系统的形成，也参与器官的纤维化及肿瘤的侵袭转移。它以上皮细胞极性的丧失及其间质特性的获得为主要特征。多种生长因子如转化生长因子（TGF）-β、上皮细胞生长因子（EGF）、胰岛素样生长因子（IGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、肝细胞生长因子（HGF）、
- 陈宁刘雯雯朱樑
- 关键词：上皮-间质转化分子机制肝纤维化
- ERCP诊治不完全胰腺分裂症一例
- 2010年
- 患者男,34岁.以＂反复上腹胀痛4月＂入院.4月前酒后出现剑突下偏左腹痛,呈烧灼样,并向两侧腰部带状放射,无恶心、呕吐、腹泻,无发热等.当地医院查血淀粉酶2900U/L,诊断为＂急性胰腺炎＂（AP）,予抗感染、制酸、抑酶等治疗后症状缓解.之后上腹痛反复发作2次,均诊断为AP.
- 顾小飞安妮陈宁刘雯雯
- 关键词：胰腺分裂症ERCP上腹胀痛血淀粉酶症状缓解
- 脂联素及受体、信号传导通路和相关疾病关系的研究进展被引量：2
- 2011年
- 最早在白色脂肪细胞中发脂联素(APN)及其受体(AdipoR),现表明APN、AdipoR也在心肌细胞、骨骼肌细胞、成骨细胞、肾脏足细胞及胎盘、唾液腺上皮、脑垂体等组织中表达。APN与AdipoR结合后通过相应的信号传导途径发挥作用。APN、AdipoR水平下降或其信号传导途径中某一环节出现差错均可能导致胰岛素抵抗、糖尿病、动脉粥样硬化、代谢综合征发生,还可引起营养不良、肝纤维化、心肌梗死后心肌重构、自体骨质破坏、眼-肾-脑综合征疾病。
- 刘雯雯陈宁殷仁富
- 关键词：脂联素脂联素受体信号传导
- TLR2、TLR4在肝细胞EMT现象中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的 TLR2与TLR4在大鼠肝细胞EMT现象中的表达。方法常规分离大鼠肝细胞后,以TGF-β刺激,诱导肝细胞上皮-间质转化,RT-PCR检测TLR2与TLR4在其中的表达变化。结果 TGF-β刺激细胞后细胞的形态发生了变化,RT-PCR结果显示TGF-β刺激的细胞E-cadherin mRNA表达下降(P<0.15),vimentin mRNA表达上升(P<0.05)。TLR2mRNA表达升高(P<0.05),TLR4mRNA表达变化差异无统计学意义。TLR2mRNA与vimentin mRNA相对表达量呈线性正相关(r=0.804,P>0.05),与E-cadherin mRNA相对表达量呈线性负相关(r=-0.879,P<0.05)。结论肝细胞EMT现象中TLR2的表达升高,与肝细胞EMT标记物的表达有一定的相关性,提示TLR2可能促进肝细胞的EMT过程。
- 陈宁刘雯雯覃霞朱樑
- 关键词：TOLL样受体肝细胞EMT肝纤维化逆转录聚合酶链反应
