张书阳
- 作品数:8 被引量:19H指数:4
- 供职机构:河南科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:河南省高等学校创新人才培养工程国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白对鸡外周血T淋巴细胞亚群的影响研究被引量:4
- 2014年
- 为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)对SPF鸡外周血T淋巴细胞亚群含量影响,本研究采用流式细胞术对重组融合蛋白(第2组)和rChIFN-α蛋白(第3组)注射14日龄SPF鸡后不同时间对各试验组鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)中CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+百分含量以及CD4^+/CD8^+比值进行检测。结果表明,与对照组相比,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白在鸡体内接种后3~14d均可明显提高鸡外周血T淋巴细胞中CD3^+CD4^+细胞百分含量,降低CD3^+CD8^+细胞的百分含量,提高CD4^+/CD8^+比值;接种后3~7d期间,第2组鸡的CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+细胞含量及CD4^+/CD8^+比值与PBS对照组(第1组)相比差异均极显著(P〈0.01),第3组与第1组相比差异均显著(P〈0.05)。以上结果表明,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白接种鸡体后均可显著影响鸡PBLC中淋巴细胞亚群百分含量,提高CD4^+/CD8^+比值,增强机体的细胞免疫功能;重组融合蛋白对鸡淋巴细胞亚群百分含量、CD4^+/CD8^+比值影响程度和细胞免疫功能的增强作用优于rChIFN-α蛋白;重组融合蛋白在体内发挥了鸡α干扰素和白细胞介素-2对细胞免疫功能的协同增强作用。
- 杨晓璐闫若潜吴志明刘梅芬张代宝张书阳王淑娟赵雪丽刘毅
- 关键词:T淋巴细胞亚群CD4^+/CD8^+比值免疫功能
- 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体外活性评价方法研究被引量:4
- 2015年
- 为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应的活性;采用细胞病变抑制法检测重组融合蛋白在DF1细胞上抑制水疱性口炎病毒(VSV)和传染性法氏囊病病毒(IBDV)增殖活性;采用MTS法分别测定重组融合蛋白促鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)和脾淋巴细胞增殖活性。结果表明,重组融合蛋白可以与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应;重组融合蛋白在DF1细胞上具有明显抗病毒活性,其抗VSV活性高于抗IBDV活性,且均明显高于rChIFN-α蛋白对照;不同浓度的重组融合蛋白均具有明显的促鸡PBLC和脾淋巴细胞增殖活性,且其促增殖活性明显高于rChIFN-α蛋白对照。本研究成功建立了重组融合蛋白体外活性检测评价方法,为进一步探究重组融合蛋白在鸡体内协同作用奠定基础。
- 杨晓璐闫若潜李勤楠赵雪丽谢彩华刘梅芬张书阳
- 关键词:重组融合蛋白体外活性
- 重组鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体内抗传染性法氏囊病毒作用研究
- 究原核表达的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株和rChIFN-α-Linker-C...
- 闫若潜刘毅吴志明程俊贞赵明军刘梅芬赵雪丽陈慧娟杨晓璐张书阳
- 关键词:鸡传染性法氏囊病病毒重组融合蛋白
- 鸡白细胞介素-6-2嵌合基因的融合表达及其表达产物活性的研究被引量:4
- 2014年
- 为研制具有鸡白细胞介素-6、2(ChIL-6,ChIL-2)协同免疫增强作用的鸡基因工程复合免疫增强剂,采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法将ChIL-6和ChIL-2基因构建成ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因;对嵌合基因进行原核表达,采用自行创新的专利纯化方法对表达的rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白(重组融合蛋白)进行纯化。采用间接ELISA方法检测重组融合蛋白分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体的特异性免疫反应活性,采用MTS法检测重组融合蛋白体外促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞的增殖活性。结果显示,成功构建了ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因及其重组表达质粒rpQE-30-ChIL-6-linker-ChIL-2,表达的重组融合蛋白的分子质量约为40ku,纯化后的纯度在96%以上。该重组融合蛋白可分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体发生特异性免疫反应,并具有显著的促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞增殖活性,其活性优于任一重组蛋白对照。本研究结果初步证明了rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在对鸡免疫细胞的增殖作用方面与rChIL-6和rChIL-2蛋白的作用相似,为进一步研究rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在鸡体内的活性奠定了基础。
- 张书阳谢彩华闫若潜吴志明赵明军赵雪丽刘梅芬杨晓璐张代宝张林海
- 关键词:嵌合基因活性
- 洛阳地区禽源大肠埃希菌分离鉴定与耐药性分析被引量:4
- 2013年
- 为了解洛阳地区禽源大肠埃希菌流行情况和耐药性现状,从2011年来自洛阳地区疑似禽大肠杆菌病的病料中分离细菌,进行细菌形态学观察和生化试验,并经显色培养基验证,68株确定为大肠埃希菌。选择临床上常用的10种药物进行药敏片法,结果显示分离株对其中10种药物都有不同程度的耐药性。其耐药性的强弱次序依次为利福平、复方新诺明、阿莫西林、庆大霉素、青霉素、诺氟沙星、红霉素,敏感性最高的为氧氟沙星、头孢唑啉。所有菌株均表现为四重耐药及以上,最多可耐10种药物。由此可见,禽大肠杆菌病在洛阳地区家禽中广泛存在,并且耐药现象十分严重,试验结果为临床合理应用抗菌药物以及疾病监测提供了参考依据。
- 李宏伟汪洋张蕾张书阳王梦圆
- 关键词:大肠埃希菌耐药性
- 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2复合蛋白体内抗传染性法氏囊病病毒作用研究
- 目的鸡的病毒性疾病对养鸡业危害严重,目前尚无特效药物可以有效防治。本研究目的是为了进一步研究rChIFN-α-Linker-ChIL-2重组复合蛋白在SPF鸡体内对传染性法氏囊病病毒(IBDV)的抑制作用,揭示重组复合蛋...
- 吴志明闫若潜程俊贞赵明军刘梅芬杨晓璐张书阳
- 不同浓度重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白在鸡体内外活性研究
- 为了研究重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白在SPF鸡体内外活性相关性,从而为开发以rChIL-6蛋白为主要成分的基因工程免疫增强剂研究提供科学依据,本研究采用间接ELISA法和MTS法分别测定不同浓度的rChIL...
- 张书阳
- 关键词:传染性法氏囊病毒新城疫病毒灭活疫苗免疫增强
- 重组鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体内抗传染性法氏囊病病毒作用研究被引量:7
- 2014年
- 为研究原核表达的鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN--Linker-ChIL-2)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株与rChIFN--Linker-ChIL-2同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV排毒率、带毒时间、在不同组织器官的动态分布及其体液和细胞免疫指标的检测以评价该重组融合蛋白抗IBDV的效果。结果显示:与IBDV攻毒对照组相比,融合蛋白与IBDV同时接种组鸡的发病率、死亡率和典型症状维持时间及排毒率、外周血持续带毒时间和不同组织器官带毒时间均显著低于对照组。但试验组鸡的IBDV抗体水平于7 dpc^42 dpc则极显著低于对照组(p<0.01)。然而,其血清中ChIFN-α、ChIFN-γ、ChIL-2、ChIL-6和ChIL-4表达水平(3 dpc^21 dpc)以及外周血T淋巴细胞(PBLC)增殖活性(7 dpc^21 dpc)、脾淋巴细胞增殖活性(7 dpc^14 dpc)均显著高于对照组(p<0.01)。结果表明:融合蛋白可以通过上调机体细胞因子的表达水平、增强鸡体PBLC和脾淋巴细胞增殖活性等方式增强机体的细胞免疫能力,从而发挥抗病毒作用和免疫增强作用。
- 程俊贞闫若潜吴志明赵明军闫志玲刘梅芬赵雪丽孔刚锐陈慧娟杨晓璐张书阳刘毅
- 关键词:白细胞介素传染性法氏囊病病毒免疫增强