杨晓璐
- 作品数:13 被引量:19H指数:4
- 供职机构:河南科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:河南省高等学校创新人才培养工程更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鸡白细胞介素-6-2嵌合基因的融合表达及其表达产物活性的研究被引量:4
- 2014年
- 为研制具有鸡白细胞介素-6、2(ChIL-6,ChIL-2)协同免疫增强作用的鸡基因工程复合免疫增强剂,采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法将ChIL-6和ChIL-2基因构建成ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因;对嵌合基因进行原核表达,采用自行创新的专利纯化方法对表达的rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白(重组融合蛋白)进行纯化。采用间接ELISA方法检测重组融合蛋白分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体的特异性免疫反应活性,采用MTS法检测重组融合蛋白体外促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞的增殖活性。结果显示,成功构建了ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因及其重组表达质粒rpQE-30-ChIL-6-linker-ChIL-2,表达的重组融合蛋白的分子质量约为40ku,纯化后的纯度在96%以上。该重组融合蛋白可分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体发生特异性免疫反应,并具有显著的促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞增殖活性,其活性优于任一重组蛋白对照。本研究结果初步证明了rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在对鸡免疫细胞的增殖作用方面与rChIL-6和rChIL-2蛋白的作用相似,为进一步研究rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在鸡体内的活性奠定了基础。
- 张书阳谢彩华闫若潜吴志明赵明军赵雪丽刘梅芬杨晓璐张代宝张林海
- 关键词:嵌合基因活性
- 重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)对传染性法氏囊灭活疫苗的免疫增强机理研究
- 为了评价重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白在鸡体内的免疫增强作用机理,本研究将40 只7 日龄健康SPF 鸡随机平均分为4 组以进行rChIL-6 蛋白对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)灭活疫苗免疫增强作用试验,于...
- 赵雪丽杨晓璐张林海张代宝闫志玲闫若潜吴志明赵明军程俊贞刘梅芬孔刚锐
- 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体外活性研究
- 研究背景:α干扰素(Interferon-α,IFN-α)属于Ⅰ型干扰素,具有广谱的抗肿瘤、抗病毒和激活免疫功能活性。白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)可以提高机体的细胞和体液免疫应答水平,并有助于巨...
- 马震原曹伟伟吴志明闫若潜赵雪丽谢彩华王淑娟杨晓璐
- 关键词:传染性法氏囊病毒抗病毒活性细胞增殖活性
- 文献传递
- 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体外活性研究
- 马震原曹伟伟吴志明闫若潜赵雪丽谢彩华王淑娟杨晓璐
- 关键词:传染性法氏囊病毒抗病毒活性细胞增殖活性
- 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体外活性评价方法研究被引量:4
- 2015年
- 为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应的活性;采用细胞病变抑制法检测重组融合蛋白在DF1细胞上抑制水疱性口炎病毒(VSV)和传染性法氏囊病病毒(IBDV)增殖活性;采用MTS法分别测定重组融合蛋白促鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)和脾淋巴细胞增殖活性。结果表明,重组融合蛋白可以与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应;重组融合蛋白在DF1细胞上具有明显抗病毒活性,其抗VSV活性高于抗IBDV活性,且均明显高于rChIFN-α蛋白对照;不同浓度的重组融合蛋白均具有明显的促鸡PBLC和脾淋巴细胞增殖活性,且其促增殖活性明显高于rChIFN-α蛋白对照。本研究成功建立了重组融合蛋白体外活性检测评价方法,为进一步探究重组融合蛋白在鸡体内协同作用奠定基础。
- 杨晓璐闫若潜李勤楠赵雪丽谢彩华刘梅芬张书阳
- 关键词:重组融合蛋白体外活性
- 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体外活性及体内最佳使用剂量研究
- 为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)在鸡体外的生物学活性及在鸡体内的最佳使用剂量,从而为重组融合蛋白作为抗病毒制剂和免疫增强剂在临床上推广应用提供科...
- 杨晓璐
- 关键词:雏鸡Α干扰素白细胞介素-2融合蛋白体外活性免疫增强
- 文献传递
- 重组鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体内抗传染性法氏囊病毒作用研究
- 究原核表达的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株和rChIFN-α-Linker-C...
- 闫若潜刘毅吴志明程俊贞赵明军刘梅芬赵雪丽陈慧娟杨晓璐张书阳
- 关键词:鸡传染性法氏囊病病毒重组融合蛋白
- 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白对鸡外周血T淋巴细胞亚群的影响研究
- 研究背景:α干扰素(Interferon-α,IFN-α)具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫激活功能活性,可增强机体细胞免疫应答水平.白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)能诱导T淋巴细胞分化和增值,在机体的免...
- 闫若潜吴志明赵雪丽王淑娟谢彩华曹伟伟马震原杨晓璐李勤楠
- 关键词:T淋巴细胞亚群免疫
- 重组鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体内抗传染性法氏囊病病毒作用研究被引量:7
- 2014年
- 为研究原核表达的鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN--Linker-ChIL-2)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株与rChIFN--Linker-ChIL-2同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV排毒率、带毒时间、在不同组织器官的动态分布及其体液和细胞免疫指标的检测以评价该重组融合蛋白抗IBDV的效果。结果显示:与IBDV攻毒对照组相比,融合蛋白与IBDV同时接种组鸡的发病率、死亡率和典型症状维持时间及排毒率、外周血持续带毒时间和不同组织器官带毒时间均显著低于对照组。但试验组鸡的IBDV抗体水平于7 dpc^42 dpc则极显著低于对照组(p<0.01)。然而,其血清中ChIFN-α、ChIFN-γ、ChIL-2、ChIL-6和ChIL-4表达水平(3 dpc^21 dpc)以及外周血T淋巴细胞(PBLC)增殖活性(7 dpc^21 dpc)、脾淋巴细胞增殖活性(7 dpc^14 dpc)均显著高于对照组(p<0.01)。结果表明:融合蛋白可以通过上调机体细胞因子的表达水平、增强鸡体PBLC和脾淋巴细胞增殖活性等方式增强机体的细胞免疫能力,从而发挥抗病毒作用和免疫增强作用。
- 程俊贞闫若潜吴志明赵明军闫志玲刘梅芬赵雪丽孔刚锐陈慧娟杨晓璐张书阳刘毅
- 关键词:白细胞介素传染性法氏囊病病毒免疫增强
- 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白的活性研究
- 引言α干扰素(Interferon-α,IFN-α)具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫激活功能活性,可增强机体细胞免疫应答水平。白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)可以提高机体的细胞和体液免疫应答水平,在机体...
- 闫若潜吴志明杨晓璐赵雪丽王淑娟谢彩华安春霞王东方李勤楠