尹秀
- 作品数:4 被引量:4H指数:1
- 供职机构:西藏大学农牧学院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 棉花分生组织转化技术的研究
- 近年来大多研究学者通过植物转基因技术改良棉花性状,已成功获得了多种优良品质的转基因棉花。大多采用农杆菌介导法、基因枪法及花粉管道法,其中关于农杆菌介导的棉花遗传转化的研究颇多且研究机理较清楚。 农杆菌介导的棉花遗传转化...
- 尹秀
- 关键词:棉花茎尖分生组织农杆菌介导法
- 文献传递
- 棉蚜V-ATPase-A基因RNAi载体的构建及其在转基因拟南芥的基因表达被引量:2
- 2013年
- V-ATPase-A具有催化ATP水解的活性位点的功能,被确认为看家基因。通过构建蚜虫V-ATPase-A干扰载体,运用蘸花法转入拟南芥中,筛选出纯合子后进行转录水平的分析,再对取食相应转基因拟南芥的蚜虫体内V-ATPase-A基因进行表达分析。结果表明,拟南芥上能成功表达dsRNA,而取食3个line的转基因拟南芥的蚜虫体内V-ATPase-A基因表达量是取食野生型拟南芥的17%、10%、4%,基因明显受到抑制,成功的干扰了蚜虫体内V-ATPase-A基因。
- 张维高朝宝尹秀彭明崔百明
- 关键词:DSRNA棉蚜转基因
- 玻璃粉创伤棉花茎尖分生组织遗传转化的研究被引量:1
- 2013年
- 评估玻璃粉创伤棉胚茎尖分生组织的转化效率及初步建立其遗传转化体系。高速涡旋的玻璃粉创伤棉胚茎尖分生组织,利用农杆菌介导法将报告基因gusA导入棉花,GUS组织化学染色后观察棉胚转化情况,探讨不同转化条件对转化的影响。结果表明:0.2g玻璃粉创伤棉胚,茎尖分生组织的较多细胞被转化,成活12株幼苗,较适宜。涡旋90s转化条件下获得2株GUS阳性苗,涡旋时间越长茎尖分生组织创伤程度越严重,能提高转化效率,但成苗量降低。此外,转化效率受菌液浓度及菌种的影响,OD600为0.8的农杆菌LBA4404菌液侵染棉胚,较多细胞能表达gusA的活性且表达水平较高,而被农杆菌GV3101侵染后的棉胚染色效果较差。
- 尹秀游义霞张维黄先忠崔百明
- 关键词:棉花农杆菌介导转化茎尖
- 棉花GhGGPase2基因克隆、功能序列分析、原核表达及烟草的遗传转化被引量:1
- 2016年
- 以棉花纤维组织为材料,根据NCBI棉花EST进行同源搜索、比对和序列拼接,经RT-PCR从陆地棉纤维组织中扩增得到L-半乳糖磷酸化酶基因(Gh GGPase2)的c DNA开放阅读框为1 335 bp,为包含445个氨基酸的蛋白质,分子质量约为49 ku。利用软件进行蛋白质序列分析,Gh GGPase2蛋白具有组氨酸三聚体(HIT)蛋白超家族的主要特性的结构域。进化树分析的结果表明棉花Gh GGPase2与猕猴桃Ad GGPase在进化上亲缘关系上较近。构建原核表达载体p ET28a-Gh GGPase2并转化大肠杆菌,将重组载体p ET28a-Gh GGPase2导入大肠杆菌BL21(DE3)中通过IPTG诱导表达后经过SDS-PAGE分析,显示成功获得分子质量为49 ku左右的诱导表达蛋白Gh GGPase2。将Gh GGPase2基因构建到植物真核表达载体p CAMBIA2300中,利用农杆菌通过叶盘法转化烟草,经PCR分子鉴定,获得了含Gh GGPase2转基因烟草植株。研究结果将为进一步阐明该基因的生物学功能奠定基础。
- 禄亚洲尹秀左晓宇梁卓李鸿彬
- 关键词:棉花纤维原核表达克隆