吴星亮
- 作品数:4 被引量:3H指数:1
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点实验室开放基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- SAMHD1蛋白单克隆抗体的制备及SAMHD1在不同细胞中的表达鉴定被引量:1
- 2013年
- SAMHD1是最近发现的在人髓系细胞中发挥抗艾滋病毒作用的一种天然蛋白。为制备抗人huSAMHD1蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究利用原核表达并纯化的人huSAMHD1重组蛋白为免疫原,经腹腔免疫4周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA法筛选和4次有限稀释法克隆纯化,获得了1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株。Western blot与间接免疫荧光试验结果表明,获得的MAb与人huSAMHD1的真核表达蛋白呈阳性反应,而与猴、马SAMHD1的真核表达蛋白呈阴性反应,表明其具有很好的特异性,可以用于ELISA、免疫荧光和免疫印迹检测以及对huSAMHD1的进一步研究。
- 戈曼吴星亮尹鑫魏萍王晓钧
- 关键词:单克隆抗体ELISA免疫荧光免疫印迹
- 干扰素应答分子Tetherin对抗马传染性贫血病毒的作用机制研究
- Tetherin,又称为CD317,BST-2或HM1.24,是一种宿主细胞的天然免疫因子,它最早被发现可以阻止HIV-1Vpu缺失型病毒从细胞膜上释放。而HIV-1能通过自身编码的相应蛋白Vpu来对抗tetherin的...
- 吴星亮
- 关键词:TETHERIN马传染性贫血病毒
- 文献传递
- 恒河猴Tetherin蛋白对马传染性贫血病毒抑制作用的研究被引量:2
- 2013年
- Tetherin是新发现的具有限制多种病毒从细胞膜释放功能的细胞蛋白。本研究采用RT-PCR技术从恒河猴巨噬细胞中扩增Tetherin基因,将其插入真核表达载体pEF4/myc-His B中构建重组质粒pHF-Tetherin。并将其转染293T细胞,通过western blot和激光共聚焦分析Tetherin在293T细胞中的表达及亚细胞定位。将pHF-Tetherin分别与马传染性贫血病毒(EIAV)或猴免疫缺陷病毒(SIV)假病毒粒子感染性质粒共转染293T细胞,分析Tetherin对EIAV及SIV出芽的限制作用。研究结果表明,pHF-Tetherin转染293T细胞48 h后可以检测到Tetherin的表达并定位于细胞膜,而且该蛋白具有抑制EIAV及SIV从转染细胞中出芽的生物学功能。
- 谷勤雍胡哲尹鑫张泽力吴星亮魏萍王晓钧
- 关键词:马传染性贫血病毒猴免疫缺陷病毒
- 马A3Z3V1抑制马传染性贫血病毒早晚期反转录的鉴定
- 2013年
- 马A3Z3V1是宿主细胞内的一种APOBEC3免疫因子,它可以有效抑制马传染性贫血病毒(EIAV)在马宿主细胞内的复制。为鉴定马A3Z3V1分子对EIAV早晚期反转录的抑制作用,本实验根据EIAV的R/U5和gag基因序列分别设计了检测EIAV早晚期反转录产物的引物并建立了SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,利用该方法评价免疫因子A3Z3V1对EIAV逆转录过程的影响。结果显示,在早期反转录过程中,A3Z3V1可以使EIAV的反转录产物最高减少7倍;在晚期反转录过程中,A3Z3V1可以使EIAV的反转录产物最高减少3倍。本实验结果将有助于进一步研究APOBEC3分子的抗病毒作用机制。
- 吴星亮张泽力尹鑫艾有为戈曼王晓钧
- 关键词:马传染性贫血病毒