卢业飞
- 作品数:4 被引量:2H指数:1
- 供职机构:广西大学更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区科技攻关计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 哈茨木霉A25-2纤维二糖水解酶Ⅰ基因的克隆及其编码催化功能域的序列在绿色木酶HP35-3中的表达被引量:1
- 2013年
- 本研究从哈茨木霉(Trichoderma harzianum)A25-2总RNA中利用RT-PCR的方法扩增到其纤维二糖水解酶Ⅰ基因的cDNA序列,并对该基因编码的氨基酸序列进行分析,得到cbhⅠ基因中编码催化功能域的序列。将催化功能域编码序列克隆到表达载体pCP-GH中,用PEG-CaCl2介导的原生质体转化方法将重组质粒转化到绿色木霉(Trichoderma viride)HP35-3中,筛选得到12个转化子。以p-NPC为底物,测定了该12个转化子的酶活力,获得比活力最高的转化子Tv/CD Hl-CBM-5,其纤维二糖水解酶活力是HP35-3的3.8倍。SDS-PAGE分析表明,绿色木霉表达了导入的含A25-2纤维二糖水解酶Ⅰ催化功能域的编码序列。
- 卢业飞吴柳秦秀林冯家勋刘君梁
- 关键词:哈茨木霉绿色木霉原生质体
- 一株青霉突变株及其在制备纤维素酶中的应用
- 本发明公开了一株青霉(Penicillium sp.)突变株及其在制备纤维素酶中的应用。本发明提供了一株草酸青霉(Penicillium oxalicum)EU2106,其保藏编号为CGMCCNo.6471。本发明还提供...
- 冯家勋农清栋刘君梁秦秀林段承杰张政黄妹平蓝健益卢业飞吕芳贤张颖黄叶萍
- 文献传递
- 哈茨木霉HP37-4纤维二糖水解酶Ⅰ基因的克隆及表达被引量:1
- 2013年
- 从哈茨木霉(Trichoderma harzianum)HP37-4中克隆得到纤维二糖水解酶Ⅰ基因的全长DNA序列,并从HP37-4总RNA中通过RT-PCR扩增得到该基因全长cDNA序列。序列测定分析表明该基因含有3个外显子和2个内含子,编码含505个氨基酸的多肽。利用生物信息学方法对该蛋白质的结构进行了分析,推测了其主要功能区的位置及结构特征。将该基因cDNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET30a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达该基因。SDS-PAGE分析表明该基因能在大肠杆菌中过量表达,但以不溶性的包涵体形式存在,经包涵体变性和多肽复性后,纯化得到了表达的重组蛋白。
- 吴柳张政卢业飞秦秀林刘君梁冯家勋
- 关键词:哈茨木霉纤维二糖水解酶基因克隆
- 一株青霉突变株及其在制备纤维素酶中的应用
- 本发明公开了一株青霉(Penicillium sp.)突变株及其在制备纤维素酶中的应用。本发明提供了一株草酸青霉(Penicillium oxalicum)EU2106,其保藏编号为CGMCC No.6471。本发明还提...
- 冯家勋农清栋刘君梁秦秀林段承杰张政黄妹平蓝健益卢业飞吕芳贤张颖黄叶萍