刘君梁
- 作品数：35 被引量：28H指数：3
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 一株木霉菌株及其在制备纤维素酶中的应用
- 本发明公开了一株木霉菌株及其在制备纤维素酶中的应用。本发明提供了一株可用于制备纤维素酶的木霉（Trichoderma koningiopsis）菌株FCD3-1，其保藏编号为CGMCC No.6050。本发明还提供了一种...
- 冯家勋张政刘君梁蓝健益马庆生
- 文献传递
- 纤维素酶基因和微生物资源的挖掘及其分子分析
- 赵帅闫语丝廖陆升王龙马博李成喜何启鹏张政梁艳玲熊亚茹毛丽春农清栋刘君梁段承杰冯家勋
- 哈茨木霉A25-2纤维二糖水解酶Ⅰ基因的克隆及其编码催化功能域的序列在绿色木酶HP35-3中的表达被引量：1
- 2013年
- 本研究从哈茨木霉(Trichoderma harzianum)A25-2总RNA中利用RT-PCR的方法扩增到其纤维二糖水解酶Ⅰ基因的cDNA序列,并对该基因编码的氨基酸序列进行分析,得到cbhⅠ基因中编码催化功能域的序列。将催化功能域编码序列克隆到表达载体pCP-GH中,用PEG-CaCl2介导的原生质体转化方法将重组质粒转化到绿色木霉(Trichoderma viride)HP35-3中,筛选得到12个转化子。以p-NPC为底物,测定了该12个转化子的酶活力,获得比活力最高的转化子Tv/CD Hl-CBM-5,其纤维二糖水解酶活力是HP35-3的3.8倍。SDS-PAGE分析表明,绿色木霉表达了导入的含A25-2纤维二糖水解酶Ⅰ催化功能域的编码序列。
- 卢业飞吴柳秦秀林冯家勋刘君梁
- 关键词：哈茨木霉绿色木霉原生质体
- 降解生淀粉真菌的筛选、鉴定及其产生淀粉酶的性质研究被引量：3
- 2010年
- 以生木薯粉为唯一碳源,对收集的土壤样品悬浮液进行培养、I2/KI溶液染色,经摇瓶复筛和菌株发酵上清液RSDE活力测定,筛选出10株RSDE活力较高的真菌;对RSDE活力最高的真菌菌株1-31进行形态学观察和ITS(Internaltranscribed spacer)序列分析,将其鉴定为青霉属。对青霉1-31的酶学性质进行测定,结果发现其RSDE对生木薯淀粉的最适作用pH和温度分别为5.0和55℃;分别以玉米和大米为底物时,其RSDE的生淀粉分解活力比(RDA)较高,为59.0%和58.8%;青霉1-31 RSDE对生木薯粉的吸附率约为37.0%。HPLC检测发现,以该菌株RSDE水解生木薯粉4 h,仅释放出葡萄糖,说明青霉1-31产生的RSDE主要为生淀粉糖化酶。电镜观察结果发现,经青霉1-31 RSDE处理,可使生木薯粉颗粒光滑完整的表面变得粗糙,形成无数小坑,说明青霉1-31 RSDE对生淀粉具有较强的水解作用。因此,青霉1-31 RSDE在各种生淀粉如木薯、玉米、大米和马铃薯生淀粉等加工业中具有一定的应用潜力。
- 林海娟冼亮段承杰刘君梁冯家勋
- 关键词：生淀粉酶青霉降解酶性质
- 根癌农杆菌介导的绿色木霉HP35-3转化及表达体系的构建被引量：2
- 2014年
- 本研究通过根癌农杆菌介导转化法,构建丝状真菌绿色木霉HP35-3的遗传转化表达体系,并以红色荧光蛋白基因(DsRed2)为报告基因来验证本表达体系。首先构建含有潮霉素抗性基因(HygR)、磷酸甘油醛脱氢酶启动子(Pgpd)和红色荧光蛋白基因(DsRed2)的双元载体pCAMT-CPRFP。然后将该双元载体转化到根癌农杆菌EHA105中,并筛选阳性转化子。将该转化子和绿色木霉HP35-3分生孢子进行液体共培养,并在含有150μg/mL潮霉素抗性平板上筛选出绿色木霉HP35-3RFP阳性转化子。最后分别通过如下三种方法检测:提取HP35-3RFP的总DNA进行PCR验证;对菌丝体进行荧光显微镜观察;对菌丝体提取物进行荧光酶标仪检测。结果表明:获得的转化子能够稳定遗传,外源红色荧光蛋白基因整合到木霉HP35-3的基因组中并成功表达。
- 潘家茂蓝健益郑小群秦秀林冯家勋刘君梁
- 关键词：根癌农杆菌丝状真菌红色荧光蛋白
- 一株青霉菌株及其应用
- 本发明公开了一株青霉菌株及其应用。本发明提供了青霉(Penicillium sp.)1-95CGMCC No.2645，同时提供了发酵青霉(Penicillium)1-95CGMCC No.2645得到的淀粉酶。本发明提...
- 冯家勋冼亮刘君梁唐纪良
- 文献传递
- 一种纤维二糖水解酶Tccel7A及其编码基因及应用
- 本发明公开了一种纤维二糖水解酶Tccel7A及其编码基因及应用。本发明提供的蛋白，是如下（a）或（b）的蛋白质：（a）由序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列表中序列3的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残...
- 冯家勋周青鸟秦秀林刘君梁张政
- 文献传递
- 产生生淀粉酶的青霉菌及其制备的生淀粉酶制剂
- 本发明公开了一种产生生淀粉酶的青霉菌及其制备的生淀粉酶制剂。本发明提供了青霉(Penicillium sp.)GXU20 CGMCC No.3690。本发明还提供了发酵青霉GXU20得到的生淀粉酶制剂。青霉GXU20和生...
- 冯家勋林海娟段承杰刘君梁罗雪梅唐纪良张秋江冼亮
- 一株木霉菌株及其在制备纤维素酶中的应用
- 本发明公开了一株木霉菌株及其在制备纤维素酶中的应用。本发明提供了一株可用于制备纤维素酶的木霉（Trichoderma koningiopsis）菌株FCD3-1，其保藏编号为CGMCC No.6050。本发明还提供了一种...
- 冯家勋张政刘君梁蓝健益马庆生
- 哈茨木霉HP37-4纤维二糖水解酶Ⅰ基因的克隆及表达被引量：1
- 2013年
- 从哈茨木霉(Trichoderma harzianum)HP37-4中克隆得到纤维二糖水解酶Ⅰ基因的全长DNA序列,并从HP37-4总RNA中通过RT-PCR扩增得到该基因全长cDNA序列。序列测定分析表明该基因含有3个外显子和2个内含子,编码含505个氨基酸的多肽。利用生物信息学方法对该蛋白质的结构进行了分析,推测了其主要功能区的位置及结构特征。将该基因cDNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET30a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达该基因。SDS-PAGE分析表明该基因能在大肠杆菌中过量表达,但以不溶性的包涵体形式存在,经包涵体变性和多肽复性后,纯化得到了表达的重组蛋白。
- 吴柳张政卢业飞秦秀林刘君梁冯家勋
- 关键词：哈茨木霉纤维二糖水解酶基因克隆
