刘光远
- 作品数:230 被引量:415H指数:11
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金甘肃省自然科学基金国家肉牛牦牛产业技术体系项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 羊泰勒虫(Theileria sp)裂殖体观察
- 将采自羊泰勒虫病流行区草地上的青海血蜱(Haemaphysalis qinghaiensis)成蜱饲喂在非除脾健康易感羊体上,待试验羊发病或频死时迫杀,用各脏器和一些组织切面刮取物、外周血液制作涂片,姬母萨染色镜检。观察...
- 殷宏刘光远罗建勋关贵全马米玲Jabbar Ahmed白启
- 文献传递
- 一种嵌合型基因I型乙型脑炎病毒病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种嵌合型基因I型乙型脑炎病毒病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用,属于生物技术领域。本发明的嵌合型病毒样颗粒为基于基因I型乙型脑炎病毒病毒样颗粒的重组猪瘟病毒中和表位嵌合抗原蛋白,编码该病毒样颗粒的DNA片段的...
- 田占成周亚红于瑞明高闪电独军政殷宏罗建勋刘光远关贵全刘志杰
- 一种蜱源性基因工程疫苗
- 本发明提供一种免疫原,其包含与载体连接的抗原性BUD肽,其中所述抗原性BUD肽的氨基酸序列为序列表中SEQ ID No.2。本发明还提供相应的免疫原性组合物和药物组合物,以及提供它们在制备控制蜱虫繁殖的药物中的应用。用本...
- 罗金刘光远沈辉任巧云陈泽罗建勋殷宏
- 文献传递
- 一种诊断马泰勒虫的检测试剂盒及制备与使用方法
- 刘光远谢俊仁田占成
- 该发明公开一种快速鉴别诊断被检马属动物是否感染马泰勒虫病的检测试剂盒,以及这种试剂盒的制备方法和使用方法。该发明的诊断马泰勒虫的检测试剂盒内至少有四条马泰勒虫特异性引物TeF3、TeB3、TeFIP和TeBIP,为方便鉴...
- 关键词:
- 关键词:检测试剂盒
- 基因工程抗体的研究进展被引量:7
- 2003年
- 李有全刘光远白启邱昌庆
- 关键词:基因工程抗体PCR技术免疫学噬菌体抗体库技术转基因小鼠
- 吕氏泰勒虫TlSP无跨膜区重组蛋白的表达及反应原性分析被引量:4
- 2017年
- 提取吕氏泰勒虫裂殖子的总RNA,采用RT-PCR方法扩增其表面蛋白TlSP(Theileria luwenshuni surface protein)基因的cDNA片段,结合生物信息学方法,对TlSP蛋白抗原表位和跨膜区进行预测,设计表达引物,分别扩增得到TlSP全长及逐一去除跨膜区的4个片段,并将其分别克隆至pET-30a原核表达载体,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)p Lys S感受态细胞进行诱导表达,并对融合蛋白的反应原性进行分析。结果表明,TlSP融合蛋白的N端具有较好的抗原性,而在C端存在3个跨膜区:185~207 aa、228~250 aa和255~277 aa;SDS-PAGE结果表明,只有去除全部跨膜区的重组载体可成功表达。Western-blot分析表明,TlSP融合蛋白能与吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫、绵羊泰勒虫及环形泰勒虫阳性血清发生反应,而与巴贝斯虫、羊无浆体阳性血清无交叉反应。本研究为今后TlSP候选亚单位疫苗的研究奠定了基础。
- 韩元许强许强李有全李有全关贵全关贵全刘军龙刘爱红刘光远殷宏殷宏罗建勋
- 关键词:跨膜区原核表达
- 蓝舌病毒VP5蛋白抗体的制备及鉴定被引量:4
- 2018年
- 本研究参考GenBank中蓝舌病毒16型(BTV-16)标准株RSAvvvv的序列,首先人工合成编码BTV-16 VP5蛋白的S6全长基因,并克隆于pUC-57载体。设计表达引物,利用PCR方法扩增N末端缺少编码第1~41位氨基酸的截短基因VP5Δ41aa,将其亚克隆到表达载体pET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-VP5Δ41aa。将表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白VP5Δ41aa在大肠杆菌中大量表达。利用组氨酸标签纯化树脂获得了高纯度的VP5Δ41aa蛋白,用其3次免疫新西兰大白兔制备相应的抗血清,Western-blot检测显示,抗血清不仅可与重组表达的VP5Δ41aa蛋白反应,而且可与BTV感染细胞中的VP5蛋白反应。免疫荧光试验表明,该抗体也可与BTV感染C6/36细胞中具有天然构象的VP5蛋白反应。上述结果表明,本试验制备的VP5抗体将为深入研究VP5蛋白的生物学功能奠定基础。
- 康棣独军政高闪电田占成Darien Kheder ALI MOHAMED郭艳妮刘光远罗建勋殷宏
- 关键词:蓝舌病毒VP5基因原核表达多克隆抗体
- 黑龙江省三地蜱体内Q热病原的感染情况和分子特征被引量:4
- 2021年
- 为了解贝氏柯克斯体伴随蜱活动的流行特征以及该病原的分子特征,采用布旗法收集黑龙江省伊春、鹤岗及佳木斯等地共计461份饥饿蜱,并通过形态学鉴定其种类。经PCR扩增病原的16S rRNA基因,并测序,分析统计不同蜱种感染贝氏柯克斯体阳性率。采用Neighbor-Joining方法构建遗传进化树,分析不同地域不同蜱种来源贝氏柯克斯体的遗传进化关系。形态学鉴定结果表明,收集的蜱种主要包括日本血蜱(n=102)、全沟硬蜱(n=97)、森林革蜱(n=150)以及嗜群血蜱(n=112)。其中,日本血蜱的贝氏柯克斯体感染率高达12%,嗜群血蜱的贝氏柯克斯体感染率为6%,而全沟硬蜱及森林革蜱的贝氏柯克斯体感染率均为4%。基于16S rRNA序列分析表明,贝氏柯克斯体是一类高度保守的病原,不同地方株之间序列差异不显著。且贝氏柯克斯体与多个变形菌有着较近的亲缘关系,特别是G-变形菌在长期的进化过程中,有一支分化为贝氏柯克斯体,另外一支依然保持了G-变形菌的分子特征。基于上述分析,贝氏柯克斯体作为一种重要的人兽共患病原,可在多种蜱体内广泛存在,但其感染率略有不同。该病原的存在会给当地家畜及人的活动造成潜在的危害,为该病原的防控提出了挑战。因此,加强当地家畜饲养管理将成为首要解决的问题。其次,杀蜱也是防控Q热病原极其有效的方法。
- 罗金李静张高峰刘佩雯罗文蔚苏小玲任巧云任巧云刘文阁刁培文孙世弟关贵全关贵全罗建勋殷宏李祥瑞
- 关键词:贝氏柯克斯体Q热流行病学调查
- 用环介导恒温扩增技术检测马梨形虫病方法的构建
- 谢俊仁田占成罗金沈辉刘光远
- 双芽巴贝斯虫Hsp20一新基因型的发现及生物学特性分析被引量:1
- 2019年
- 为了鉴定分离自甘肃永靖的1株双芽巴贝斯虫Hsp20基因型为一新基因型,参考双芽巴贝斯虫Hsp20核苷酸序列,设计特异性引物。对其进行扩增,利用生物信息学方法对其进行比对分析。结果显示,扩增获得了700 bp的核苷酸片段。与GenBank中公布的18种不同物种的氨基酸序列构建遗传发育树,结果表明本实验获得的双芽巴贝斯虫与美国株和中国新疆株的亲缘关系最近。对其氨基酸序列进行比对分析,发现在第31~85位点存在冗余,与公布的Hsp20氨基酸序列存在明显的差异。通过同源建模分析,发现该冗余致使Hsp20蛋白在第7号位形成1个环形结构,从而引起了第3号位的拉伸。通过生物信息学分析得出,获得的双芽巴贝斯虫甘肃株的Hsp20基因是一新基因型。该基因型的存在为更加准确诊断双芽巴贝斯虫病提供了依据。
- 曲志强张亮罗金陈泽任巧云刘文阁倪军许肖枫吴泽功罗建勋殷宏孙晓林孙晓林
- 关键词:双芽巴贝斯虫基因型生物学特征