陈瑞华
- 作品数：14 被引量：95H指数：6
- 供职机构：河北北方学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金河北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 休克淋巴液对肠系膜微淋巴管内皮细胞炎症介质表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:观察休克淋巴液对大鼠肠系膜微淋巴管内皮细胞(MMLEC)诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)表达的影响,探讨休克淋巴液损伤MMLEC的机制。方法:正常大鼠MMLEC原代培养,应用第三代MMLEC进行研究。无菌条件下复制大鼠重症失血性休克模型(血压40mmHg,维持90min),引流休克时肠淋巴液及门静脉血,并以正常肠淋巴液、门静脉血作为对照。以4%终浓度的休克淋巴液作用MMLEC6h,以休克血浆、正常淋巴液、正常血浆、胎牛血清(FBS)、DMEM培养液作为对照。提取MMLEC的cDNA,RT-PCR检测iNOS、TNF-α及IL-6mRNA的表达;同时检测培养上清液MDA、NO、TNF-α及IL-6含量的变化。结果:4%终浓度的休克淋巴液作用6h后,MMLEC的iNOS、TNF-α、IL-6mRNA表达以及培养上清液MDA、NO、TNF-α和IL-6水平显著高于正常淋巴液组、休克血浆组、正常血浆组、FBS组以及DMEM组;且休克血浆作用MMLEC6h后的iNOS、TNF-α、IL-6mRNA表达以及培养上清液的MDA、NO、TNF-α及IL-6水平显著高于正常淋巴液组、正常血浆组、FBS组以及DMEM组。结论:休克淋巴液可使大鼠MMLEC的iNOS、TNF-α及IL-6mRNA表达增强,促进自由基释放,从而诱导细胞损伤。
- 赵自刚牛春雨陈瑞华侯亚利张玉平张静
- 关键词：休克淋巴炎症介导素类基因表达
- 肠淋巴途径对休克大鼠心肌自由基、炎性介质的影响被引量：18
- 2007年
- 目的:观察结扎肠系膜淋巴管对重症失血性休克大鼠不同时期心肌自由基、炎症介质的影响。方法:雄性Wistar大鼠78只,分为假手术组、休克组、结扎组。休克组与结扎组复制重症失血性休克模型,结扎组于休克复苏后行肠系膜淋巴管结扎术。于休克后90min、输液复苏后0h、1h、3h、6h、12h、24h等时间点处死大鼠,制备心肌组织匀浆,检测MDA、SOD、TNFα、IL-6、NO、NOS以及MPO水平,RT-PCR方法测定心肌组织iNOSmRNA表达。结果:休克组大鼠输液复苏后多个时间点心肌匀浆MDA、TNFα、IL-6、MPO、NO、NOS和iNOSmRNA表达均有不同程度的升高,3h～12h持续在较高水平,均显著高于假手术组,心肌匀浆SOD活性显著低于假手术组;结扎组多个时间点心肌匀浆MDA、TNFα、IL-6、MPO、NO、NOS以及iNOSmRNA显著低于休克组相应时间点,SOD活性高于休克组相应时间点。结论:肠系膜淋巴管结扎阻断肠淋巴液回流,可减少心肌PMN扣押、降低TNFα、IL-6的释放、抑制NO生成及iNOSmRNA表达、减少自由基释放与SOD消耗。
- 赵自刚牛春雨陈瑞华张玉平张静刘艳凯李继承
- 关键词：肠系膜淋巴管结扎术自由基炎症介质
- 肠系膜淋巴管结扎对失血性休克大鼠肺组织一氧化氮及其表达的影响被引量：25
- 2006年
- 目的 观察结扎肠系膜淋巴管对不同时期重症失血性休克大鼠肺组织一氧化氮（NO）及其表达的影响，探讨肠淋巴途径在休克大鼠急性肺损伤（ALI）中的作用。方法 雄性Wistar大鼠78只，按随机数字表法分为假手术组（n=6）、休克组（n=42）和结扎组（n=30）。休克组与结扎组复制重症失血性休克模型，结扎组于休克复苏后行肠系膜淋巴管结扎术；休克组于休克后90min、输液复苏后0h，休克组及结扎组于输液复苏后1、3、6、12和24h各时间点处死大鼠，制备肺组织匀浆，检测NO及其合酶的变化；用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）测定各组大鼠肺组织诱生型一氧化氮合酶（iNOS）．mRNA表达。结果 休克组大鼠复苏后3h肺组织NO含量、NOS活性及iNOSmRNA表达开始升高，复苏后6～12h持续在较高水平，均显著高于假手术组、休克后90min及复苏后0h（P〈0．05或P〈0．01）；结扎组仅于3h和6h增高，且结扎组复苏后6、12和24h肺组织NO含量、NOS活性以及iNOSmRNA表达均显著低于休克组相同时间点（P〈0．05或P〈0．01）。结论 肠系膜淋巴管结扎可降低重症失血性休克大鼠肺组织NO生成及iNOSmRNA表达，从而减轻肺损伤。
- 牛春雨李继承赵自刚陈瑞华张静刘艳凯张玉平姜华
- 关键词：肠系膜淋巴管结扎一氧化氮
- 休克淋巴液对大鼠肺微血管内皮细胞炎症介质表达的影响被引量：5
- 2009年
- 目的．观察休克淋巴液对大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）自由基及一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素-6（IL-6）表达的影响，进一步探讨休克淋巴液损伤PMVECs的机制。方法原代培养大鼠PMVECs至第3代进行研究。无菌条件下复制大鼠重症失血性休克模型（动脉压40mmHg维持90min，1mmHg-0．133kPa）。引流正常大鼠和休克大鼠肠系膜淋巴液及门静脉血，与PMVECs孵育6h，同时以胎牛血清（FBS）和无血清的DMEM培养液作为对照。逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测诱生型一氧化氮合酶（iNOs）、TNF—α和IL-6的mRNA表达；检测培养上清液中丙二醛（MDA）、NO、TNF—α和IL-6的含量。结果体积分数为4％终浓度的休克淋巴液作用6h后，PMVECs中iNOS、TNF-α和IL-6的mRNA表达以及培养上清液中MDA、NO、TNF—n和IL-6水平均显著高于空白对照组、正常淋巴液组、休克血浆组、正常血浆组和无血清对照组；且休克血浆作用PMVEC6h后的iN0s、TNF—α和IL-6的mRNA表达及培养上清液中N0水平均显著高于空白对照组、正常淋巴液组、正常血浆组和无血清对照组（P〈0．05或P〈0．01）。结论4％终浓度的休克淋巴液可致大鼠PMVECs中iNOS、TNF-α和IL-6的mRNA表达增强，促进自由基释放，从而诱导细胞损伤。
- 赵自刚陈瑞华牛春雨张静樊贵
- 关键词：休克淋巴液肺微血管内皮细胞炎症介质
- 构建肠系膜微淋巴管内皮细胞培养技术并观察休克淋巴液环境中内皮细胞的形态变化被引量：2
- 2007年
- 目的:建立肠系膜微淋巴管内皮细胞的培养技术,观察不同体积分数的休克淋巴液对大鼠肠系膜微淋巴管内皮细胞形态的影响。方法:实验于2004-02/07在河北北方学院病理生理学教研室及实验中心细胞培养室完成。选择健康雄性Wistar大鼠,体质量分别为220～300g和50～80g。实验方法:①无菌条件下制备大鼠重症失血性休克模型,引流肠系膜淋巴液或收集门静脉血;同时另取大鼠,引流正常淋巴液或正常门静脉血。②从动物种类、培养基、植块方法、胎牛血清浓度等方面对植块培养法进行改良,进行肠系膜微淋巴管内皮细胞原代培养并传代。实验分组:分为6组:胎牛血清组:培养液为DMEM+体积分数为0.1的胎牛血清;正常淋巴液组:培养液为DMEM+正常淋巴液;休克淋巴液组:培养液为DMEM+体积分数为0.04,0.06,0.08,0.10的休克淋巴液;正常血浆组:培养液为DMEM+正常血浆;休克血浆组:培养液为DMEM+休克血浆;无血清对照组:培养液为DMEM。实验评估:①光镜下观察大鼠肠系膜微淋巴管内皮细胞原代培养及传代情况。②光镜、扫描电镜及透射电镜下观察不同体积分数的休克淋巴液及不同作用时间(4,8,12h)对肠系膜微淋巴管内皮细胞形态及超微结构的影响。结果:①光镜下肠系膜微淋巴管内皮细胞原代培养及传代情况:内皮细胞呈扁平的梭形或多边形,大小均匀,胞核清晰,呈卵圆形。细胞生长融合形成单层后,呈典型的鹅卵石或铺路石样镶嵌状排列生长。②光镜下在休克淋巴液中肠系膜微淋巴管内皮细胞形态:体积分数为0.04的休克淋巴液作用4h时细胞逐渐收缩、变圆直至脱落漂浮,随着休克淋巴液体积分数增加及作用时间延长,细胞损伤逐渐加重,体积分数为0.08的休克淋巴液作用4h时核旁出现空泡,体积分数为0.10的休克淋巴液作用12h时细胞裂解成碎片。其他各组作用12h肠系膜微淋巴管内皮细胞�
- 陈瑞华侯亚利牛春雨赵自刚张静张玉平刘艳凯
- 关键词：休克淋巴液细胞培养
- 肠淋巴途径在大鼠休克致肝脏炎症反应中的作用被引量：16
- 2008年
- 目的观察结扎肠系膜淋巴管对重症失血性休克不同时期大鼠肝脏炎症介质、自由基的变化，探讨阻断肠淋巴途径对休克大鼠肝脏炎症反应的影响。方法78只雄性Wistar大鼠被随机分为假手术组（n=6）、休克组（n=42）和结扎组（n=30）。休克组与结扎组复制重症失血性休克模型，结扎组于休克复苏后行肠系膜淋巴管结扎术。于休克90min、输液复苏后0、1、3、6、12和24h各处死6只大鼠，制备肝组织匀浆，检测肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、白细胞介素-6（IL-6）、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）以及髓过氧化物酶（MPO）水平；采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）测定肝组织诱生型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达。结果休克组大鼠输液复苏后不同时间点肝组织TNF-a、IL-6、NO、NOS、MDA、MPO以及iNOSmRNA均有不同程度的升高，6～12h持续在较高水平，均显著高于假手术组，肝组织SOD活性显著低于假手术组（P〈0．05或P〈0．01）；结扎组输液复苏后3、6、12和24h肝组织TNF-a、IL-6、NO、NOS、MDA、MPO以及iNOSmRNA均显著低于休克组相应时间点，SOD活性高于休克组相应时间点（P〈0．05或P％0．01）。结论肠系膜淋巴管结扎可减少肝脏中性粒细胞扣押，降低TNF-a、IL-6释放，抑制iNOSmRNA表达及NO生成，减少自由基损伤与SOD消耗，从而减轻肝脏的炎症反应。
- 赵自刚牛春雨张静陈瑞华张玉平姜华李继承
- 关键词：失血性休克肠系膜淋巴管结扎术炎症反应
- 休克淋巴液对大鼠内皮细胞VEGF表达的影响被引量：3
- 2007年
- 目的观察休克淋巴液对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)、肠系膜微淋巴管内皮细胞(MMLEC)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法无菌条件下复制大鼠重症失血性休克模型,引流休克时肠系膜淋巴液或收集门静脉血,同时收集正常淋巴液及门静脉血作为对照。以4%终浓度的处理因素与第3代PMVEC及MMLEC共同孵育6h,RT-PCR测定VEGF mRNA表达。结果不同处理因素与PMVEC及MMLEC孵育6h后,休克淋巴液组两种内皮细胞的VEGF mRNA表达均显著低于休克血浆组、正常淋巴液组、正常血浆组、胎牛血清(FBS)组、DMEM组;休克血浆组显著低于正常淋巴液组、正常血浆组、FBS组和DMEM组;其它组间无统计学差异。结论休克淋巴液可抑制内皮细胞的VEGF mRNA表达,且作用强于休克血浆。
- 赵自刚牛春雨陈瑞华张静樊贵张玉平刘艳凯
- 关键词：肺微血管内皮细胞血管内皮生长因子
- 肠淋巴途径在大鼠多器官损伤中的作用及其机制
- 牛春雨赵自刚张静陈瑞华刘艳凯侯亚利樊贵张耕张玉平姜华薄爱华张艳芳季建军刘军超乔海霞
- 该项目应用生物化学、免疫学、免疫组织化学、细胞培养、分子生物学、流式细胞术及光镜、电镜等技术，首次从整体—器官—细胞—分子水平探讨肠淋巴途径在大鼠多器官损伤中的作用及其机制。补充了严重威胁人类生命的MODS及MSOF的基...
- 关键词：
- 关键词：多器官损伤
- 休克淋巴液对大鼠肺微血管内皮细胞的损伤作用被引量：11
- 2007年
- 无菌条件下复制大鼠重症失血性休克模型,引流肠系膜淋巴液或收集门静脉血,同时,引流正常淋巴液、正常门静脉血。以不同处理因素与原代培养的第三代肺微血管内皮细胞(PMVEC)共同孵育,通过光镜、透射电镜、扫描电镜观察细胞形态及超微结构,MTT法检测不同终浓度的休克淋巴液及正常淋巴液对PMVEC增殖的影响;流式细胞仪检测PMVEC周期变化;同时进行细胞核DNA电泳分析。结果表明,休克淋巴液对PMVEC具有损伤作用,表现为细胞收缩、核固缩等,扫描电镜可观察到凋亡小体;随着休克淋巴液终浓度增加,PMVEC的增殖活力逐渐降低,显著低于正常淋巴液组;4%终浓度的休克淋巴液作用PMVEC 4h后,G0-G1期细胞比值增大,S+G2-M期细胞比值下降,其他处理因素无明显变化,同时细胞核DNA电泳形成典型的阶梯状电泳图谱(DNA ladder)。结果提示,休克淋巴液可导致PMVEC形态学及超微结构损伤,同时抑制细胞增殖、影响细胞周期、诱导细胞凋亡。
- 牛春雨赵自刚李继承陈瑞华张静张玉平孙黎
- 关键词：休克淋巴液肺微血管内皮细胞增殖
- 休克淋巴液损伤微淋巴管内皮细胞的体液机制
- 2008年
- 目的观察休克淋巴液对大鼠肠系膜微淋巴管内皮细胞(MMLEC)培养上清液中自由基、NO、TNFα、IL-6的影响,探讨休克淋巴液损伤MMLEC的体液机制。方法正常大鼠MMLEC进行原代培养,应用第三代MMLEC进行本研究。无菌条件下复制大鼠重症失血性休克模型(血压40mm-Hg,维持90min),引流休克时肠系膜淋巴液及门静脉血。以4%终浓度的休克淋巴液直接作用于MMLEC6h,同时以休克血浆、正常淋巴液、正常血浆、胎牛血清(FBS)、DMEM培养液作为对照;检测上清液中MDA、NO、TNFα、IL-6的变化。结果4%终浓度的休克淋巴液作用6h后,培养上清液MDA、NO、TNFα及IL-6含量均显著高于正常淋巴液组、休克血浆组、正常血浆组、FBS组以及DMEM组;而休克血浆作用MMLEC6h后MDA、NO及IL-6含量显著高于正常淋巴液组、正常血浆组、FBS组和DMEM组;其它组间无统计学差异。结论休克淋巴液诱导大鼠MMLEC损伤的体液机制与休克淋巴液诱导MMLEC自由基损伤、促进炎症介质释放有关。
- 陈瑞华赵自刚牛春雨张静樊贵
- 关键词：休克淋巴液自由基炎症介质
