范倩
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：宁夏医科大学附属医院更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
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- 含绿色荧光蛋白基因重组质粒的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达
- 2011年
- 目的构建与增强型绿色荧光蛋白(GFP)融合的重组真核表达载体,并转染大鼠血管平滑肌细胞(A7r5),观察其在A7r5中的表达。方法采用Trizol法快速提取A7r5的总RNA,经RT-PCR获得线粒体融合蛋白2(mfn2)的cDNA,扩增、纯化、回收mfn2基因片段。用HindⅢ和BamHⅠ双酶切扩增的大鼠mfn2基因片段和质粒pEGFP-N1,然后将这2种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌DH5α。将提取的重组质粒进行酶切鉴定和测序。测序正确的重组质粒用脂质体法转染A7r5,24 h后观察GFP表达情况,并用RT-PCR、Western blot方法检测mfn2的表达。结果扩增出了1条约2.2 kb的片段,酶切结果显示重组质粒被切成4.7kb大小的pEGFP-N1载体和2.2kb大小的目的片段。经测序目的片段的序列与GeneBank中大鼠mfn2基因的开放阅读编码框序列完全一致。细胞转染48h后GFP表达量最多,RT-PCR、Western blot方法检测到mfn2在A7r5中高表达。结论成功构建了含GFP基因重组真核表达载体,并且可以在A7r5中高表达。
- 席少静何军王小婕范倩滕艳萍
- 关键词：线粒体融合蛋白2PEGFP-N1血管平滑肌细胞
- 糖耐量减低者的冠状动脉病变特点及相关因素分析
- 目的研究IGT者的冠状动脉(冠脉)病变特点。方法根据OGTT结果将490例疑似缺血性胸痛的患者分为:(1)IGT组,161例;(2)T2DM组,159例;(3)NGT组,170例。检测TG、TC、HDL-C、LDL-C和...
- 何军滕艳萍席少静王小婕范倩
- 文献传递
