秦安东
- 作品数：17 被引量：66H指数：6
- 供职机构：淮安市第四人民医院更多>>
- 发文基金：贵州省优秀科技教育人才省长资金项目国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠CD25分子胞外段的真核表达载体的构建
- 2010年
- 目的构建小鼠CD25分子胞外段的真核表达载体,并在CHO细胞中进行表达。方法从前期构建的原核表达载体PET-32a-CD25胞外段上酶切下CD25胞外段;将其亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1,并进行酶切及测序鉴定;用Lipofectamine 2000将pcDNA3.1-CD25胞外段转染中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO)进行表达,并用ELISA法对表达产物进行测定。结果酶切、测序验证成功构建真核表达载体pcDNA3.1-CD25e,并在CHO细胞中有效表达CD25e蛋白。结论成功构建小鼠CD25胞外段的真核表达载体,可在CHO细胞中表达,并具有良好的免疫反应性,为后续实验提供了前期基础。
- 徐林张凤秦安东周涯姚新生罗军敏
- 关键词：真核表达T细胞疫苗
- Xpert MTB/RIF与改良罗氏比例法药敏试验检测利福平药敏的临床价值
- 2022年
- 目的对比Xpert MTB/RIF与改良罗氏比例法药敏试验检测利福的平药敏结果。方法选取2019年7月—2022年4月淮安市第四人民医院住院或者门诊中同时进行Xpert MTB/RIF和改良罗氏比例法药敏试验检测利福平药敏的246例肺结核患者为研究对象,比较两种方法检测利福平的药敏情况。结果Xpert MTB/RIF和改良罗氏比例法药敏试验检测利福平的耐药率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=1.15,P>0.05)。比例法药敏试验检测敏感,Xpert MTB/RIF耐药有8例;比例法药敏试验检测耐药,Xpert MTB/RIF敏感0例。246份标本经Xpert MTB/RIF检测出利福平耐药有36例,在结核杆菌RRDR设计ProbeA、ProbeB、ProbeC、ProbeD、ProbeE 5条探针中,Xpert MTB/RIF系统检测利福平耐药位点以ProbeE最高63.9%。以改良罗氏比例法药敏试验为金标准Kappa=0.86。结论Xpert MTB/RIF检测利福平的药物敏感性用时短,高通量,灵敏度高,特异度高。
- 汪芹纪小亭黄鑫曾东晓秦安东刘兴祥
- 关键词：结核分枝杆菌利福平
- MicroRNA-126调控CD4^+Foxp3^+T细胞的外周诱导及功能被引量：2
- 2016年
- 目的探讨Micro RNA-126对CD4^+Foxp3^+Tregs的外周诱导调控及功能的影响。方法分选Balb/c小鼠脾脏CD4^+CD25-初始T细胞,在anti-CD3/CD28的激活下,用TGF-β进行诱导培养,在第3、5天FACS检测CD4^+Foxp3^+Tregs的比例,Real-time PCR检测mi R-126的表达;采用mi R-126抑制剂抑制mi R-126后,FACS检测CD4^+Foxp3^+Tregs的比例,Real-time PCR检测mi R-126的表达;进而采用mi R-126 ASO下调CD4^+Foxp3^+Tregs中mi R-126的表达,Real-time PCR检测IL-10和TGF-β的表达,CFSE标记技术分析CD4^+Foxp3^+Tregs免疫抑制功能。结果 mi R-126在活化的Tregs中的表达高于在活化的CD4^+CD25-T细胞中的表达(P<0.05);TGF-β在体外诱导生成Foxp3^+CD4^+T细胞的比例组间差异具有统计学意义(P<0.05),同时在Tregs的诱导过程中,mi R-126的表达上调(P<0.05);CD4^+CD25-T细胞体外瞬时转染mi R-126抑制剂,与对照组比较,Foxp3^+CD4^+T细胞的比例组间差异具有统计学意义(P<0.05),mi R-126抑制剂能有效下调mi R-126的表达(P<0.05);与对照组相比,mi R-126 ASO转染组Tregs中Foxp3、CTLA-4和GITR的表达均降低(P<0.05),且TGF-β和IL-10的m RNA相对表达均降低(P<0.05);CFSE标记细胞增殖实验显示,mi R-126 ASO Tregs组CD4^+CD25-T细胞增殖与Tcon组、Control Tregs组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论下调mi R-126的表达能显著削弱CD4^+Foxp3^+Tregs的外周诱导和免疫抑制功能。
- 秦安东刘娟罗军敏徐林
- 关键词：调节性T细胞MIR-126FOXP3TGF-Β
- 微小RNA-7对人肺癌95D细胞体外增殖的作用被引量：20
- 2010年
- 目的:探讨微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)对人肺癌95D细胞体外增殖的作用。方法:采用体外转染法将miR-7瞬时转染95D细胞后,应用Real-time PCR特异探针法检测95D细胞中miR-7的表达情况,应用MTT法检测95D细胞的生长情况,FCM法分析细胞周期变化,并用Western印迹法检测95D细胞中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达的变化。结果:与对照组相比,miR-7转染组95D细胞的miR-7表达水平显著增加(P<0.05),细胞生长明显受抑(P<0.05),且主要阻滞在G1期(P<0.05),而EGFR表达显著下调。结论:miR-7可以抑制人肺癌95D细胞的体外增殖,可能作为后续肺癌生物治疗的新靶点。
- 徐林任涛周涯秦安东郑静
- 关键词：人肺癌体外增殖WESTERN印迹法体外转染瞬时转染EGFR表达
- 血清胱抑素C检测对肝硬化患者肾功能损害的诊断价值被引量：3
- 2013年
- 目的探讨血清Cys C在肝硬化患者早期肾功能损害中的诊断价值及意义。方法采用免疫比浊法检测118例肝硬化、48例CHB患者及30例健康对照组血清Cys C、β2微球蛋白(β2-MG)水平,同时采用酶法测定血清肌酐(Scr)、尿素(Urea)水平。对各组血清Cys C、Scr、Urea及β2-MG水平差异、相关性及异常率进行比较分析。结果肝硬化组、CHB组和对照组的血清Cys C水平分别为(1.29±0.33)mg/L、(0.98±0.21)mg/L和(0.92±0.15)mg/L,肝硬化组显著高于CHB组(P<0.05)和对照组(P<0.05)。肝硬化组Scr、Urea和β2-MG水平分别为(69.22±21.21)μmol/L、(5.47±2.16)mmol/L和(2.58±0.88)mg/L,均显著高于对照组(P<0.05)。各组血清Cys C与Scr均呈正相关,肝硬化组(r=0.502,P<0.01),CHB组(r=0.485,P<0.01),对照组(r=0.494,P<0.01)。肝硬化组血清Cys C异常率(75.4%)显著高于Scr(5.9%)、Urea(17.8%)和β2-MG(22%),差异有统计学意义(P<0.01)。结论血清Cys C可以作为评价肝硬化早期肾功能损害的标志物,为临床相关疾病的诊断提供参考依据。
- 秦安东曾东晓刘娟王兴亮
- 关键词：胱抑素C肌酐Β2微球蛋白肝硬化
- 肝功能生化检测对乙型肝炎肝硬化患者疾病诊断价值分析
- 2023年
- 探讨对乙肝炎肝硬化生化检测的价值。方法 对2022年3月-2022年12月乙肝炎肝硬化患者50例和健康人群50例分为两组研究,分析生化检测结果。结果 研究组白蛋白、胆固醇、胆碱酯酶水平低,血清总胆汁酸水平高(P<0.05)。C级患者的白蛋白、胆固醇、胆碱酯酶最低,血清总胆汁酸最高(P<0.05)。结论 肝在人体器官中占有重要的作用,最最要的是帮助消化和解毒,乙肝炎肝硬化属于肝严重损伤的一种状况,其严重程度也有所不同,在临床中采取肝功能生化检测,肝损伤患者的指标与正常的有很大差异性,通过指标的显现可确诊疾病和疾病程度的分化,为之后的治疗进行指导。
- 王珂秦安东
- 关键词：乙型肝炎肝硬化
- miRNA-7真核表达载体的构建与鉴定被引量：6
- 2013年
- 目的构建miR-7真核表达载体并观察其对人肺癌细胞体外生长的影响。方法以人肺癌细胞系95D细胞基因组DNA为模板,PCR法扩增miR-7前体序列,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后将其亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),并进行酶切及测序鉴定;将构建成功的pcDNA3.1(-)-pri-miR-7载体(命名为p-miR-7)体外瞬时转染95D细胞,应用Real-time PCR特异探针法检测miR-7成熟体的表达水平,并利用MTT法检测细胞生长的改变。结果酶切和测序验证成功构建了miR-7真核表达载体p-miR-7;表达载体p-miR-7瞬时转染95D细胞后可有效表达miRNA-7成熟体,并显著抑制95D细胞的体外生长(P<0.05)。结论成功构建了miR-7的真核表达载体,为后续深入研究miR-7在肺癌发生中的作用及机制提供了前期实验基础。
- 宋永祥李颖秦安东廖珍媛李永菊罗军敏任涛徐林
- 关键词：真核表达肺癌MTT法
- T-SPOT.TB实验在结核感染临床诊断中的应用价值被引量：7
- 2015年
- 目的通过对疑似结核感染者进行T-SPOT.TB检测,并与TST实验进行比较分析,评估T-SPOT.TB实验应用于结核分枝杆菌感染的临床诊断价值。方法纳入260例疑似结核病患者作为研究对象,进行T-SPOT.TB检测和TST实验,同时设立健康对照组122例,计算T-SPOT.TB实验的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值并与TST实验进行比较分析。结果结核组T-SPOT.TB的阳性率高于非结核组和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);T-SPOT.TB对于结核确诊患者诊断敏感度为91.4%;非结核组诊断特异度为70.7%;健康对照组诊断特异度为89.3%。对于疑似结核病患者,T-SPOT.TB实验的阳性预测值、阴性预测值分别为88.5%和76.8%;结核组T-SPOT.TB实验阳性斑点数目高于非结核组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);T-SPOT.TB阳性斑点数目与TST实验阳性硬结直径的大小之间呈正向相关(r2=0.345,P<0.05)。结论 T-SPOT.TB实验具有较高的敏感度和特异度,是临床诊断和排除活动性结核感染的有效工具,具有较高的临床推广和应用价值。
- 秦安东刘娟曾东晓李雨松
- 关键词：结核T-SPOT.TB结核菌素试验特异性T细胞
- microRNAs与肺癌关系的研究进展秦安东综述,徐 林审校被引量：1
- 2011年
- 0引言miRNAs是能调控其他基因表达的非编码小分子RNA,广泛存在于各种有机体。其主要是通过与目标mRNA的互补配对,指导RISC（RNA-induced silencing complex,RISC）在转录后水平上调控基因的表达,导致mRNA的降解或蛋白质翻译抑制[1]。
- 秦安东徐林
- 关键词：MIRNAS肺癌
- DHHCs家族成员在小鼠CD4^+CD25^-T细胞和CD4^+CD25^+调节性T细胞活化中的表达及意义被引量：1
- 2012年
- 目的观察DHHCs家族成员在小鼠CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+调节性T细胞活化前后的表达情况并探讨其意义。方法磁珠法从小鼠脾脏分选CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+调节性T细胞,流式细胞术检测纯度后,体外用anti-CD3e/CD28抗体分别刺激其活化。TRIzol法提取细胞总RNA,RT-PCR逆转录成cD-NA,分别用24个DHHCs家族成员特异性引物进行PCR反应,对产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。结果活化前CD4+CD25-T细胞高表达DHHC5、DHHC14和DHHC18,活化后其上调表达DHHC2、DHHC4、DHHC6、DHHC8、DHHC9、DHHC12、DHHC15和DHHC16;活化前CD4+CD25+调节性T细胞仅表达DHHC9,活化后其上调表达DH-HC18,而下调DHHC9的表达。结论 DHHCs家族成员在CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+调节性T细胞中表达存在差异,活化后表达谱发生显著变化,提示DHHCs家族成员的表达与CD4+T细胞的活化有关,可能参与CD4+T细胞不同亚群活化的调控。
- 秦安东李颖罗军敏李永菊徐林
- 关键词：细胞活化
