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ASPN基因微卫星多态性与青少年特发性脊柱侧凸易感性的关系: 目的：探讨ASPN基因微卫星位点多态性与青少年特发性脊柱侧凸(Adolescent idiopathicscoliosis，AIS)易感性之间的关联性。方法：选取222名AIS患者和220名年龄匹配对照组，记...; 刘文军邱勇陈志军潘金顺刘臻束昊孙超王信华; 关键词：青少年特发性脊柱侧凸基因多态性易感性微卫星位点; 文献传递

乙肝病毒基因型及基因变异与原发性肝癌的相关性被引量：10: 2011年; 目的分析HBV基因型及基因变异与原发性肝癌(PHC)发病的关系。方法采用基因型特异引物PCR法测定HBV基因型,限制性酶切片段长度多态性检测基因亚型;直接测序法检测HBV DNA 1653、1762/1764及1896位点的变异情况;统计比较多个因素在慢性乙型肝炎(CHB)和PHC患者中的异同,并进行危险因素分析。结果与CHB组比较,PHC组患者年龄较大,HBeAg阴性更常见,而ALT水平和HBV DNA载量较低(P<0.05)。CHB组HBV的基因型B型与C型相当,而PHC组绝大多数为C型(P<0.01);两组基因型C型的亚型多为Ce亚型。两组病毒G1896A变异无差异,而PHC组C1653T、A1762G/T1764A变异出现的几率较高(P<0.05)。Logistic回归分析表明只有基因C型和高龄为PHC的独立危险因素。结论 HBV基因型C型为HBV相关PHC发病的独立危险因素;C1653T、A1762G/T1764A变异与PHC有一定相关,但非独立危险因素。; 张勇扬王爱平潘金顺周锦勇唐勤; 关键词：乙型肝炎病毒原发性肝癌基因变异基因型

戊型肝炎病毒(4型)ORF2蛋白抗原性特征及其在诊断中的应用: 目的：戊型肝炎(戊肝)病毒(hepatitis e virus，HEV)感染是我国急性肝炎的常见原因，诊断戊肝主要依靠抗-HEVIgM检测。目前检测试剂盒所用HEV抗原来自于1型病毒，而我国以4型HEV为主。而且，现有试...; 周乙华潘金顺吴超毕永春孙静唐勤; 关键词：戊型肝炎病毒; 文献传递

4型戊型肝炎病毒ORF2多肽的二聚体特性和抗原性特征被引量：8: 2008年; 目的研究4型戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）开放阅读框架2（open reading frame2，ORF2）编码的多肽二聚体特性和抗原性特征。方法从患者血清克隆HEV ORF2基因，在大肠杆菌中表达不同长度的ORF2多肽，并表达点突变多肽，纯化后在SDS—PAGE不同条件下分析二聚体特性，同时用Western blot分析其抗原性特征。结果由459～607位氨基酸构成的ORF2多肽能形成二聚体，而在氨基端截短13个氨基酸或在羧基端截短13个氨基酸均不形成二聚体，562位天冬酰胺、595位异亮氨酸分别突变后在SDS作用下仅以单体存在。Western blot显示，抗-HEV仅与二聚体的ORF2多肽反应，而不与单体ORF2多肽或截短肽反应。结论4型HEV ORF2多肽形成二聚体必须含有459—607位氨基酸，其中562位和595位氨基酸突变能影响二聚体的稳定性。该多肽的抗原性取决于二聚体结构。; 潘金顺庄辉吴超周锦勇唐勤周乙华; 关键词：戊型肝炎病毒二聚体抗原性点突变

利用戊型肝炎病毒开放读码框架2截短多肽降低抗戊型肝炎病毒IgM检测中的假阳性被引量：6: 2009年; 目的研究用戊型肝炎病毒4型（HEV-4）开放读码框架（ORF）2主要免疫表位截短多肽排除抗-HEV IgM检测中发生假阳性的可行性。方法用重组HEV-4 ORF2蛋白主要抗原决定簇多肽（459—607位氨基酸）及其截短多肽（472～607位氨基酸）为抗原分别包被ELISA板，用间接ELISA法分别检测35份HEV RNA阳性患者血清、69份健康人血清和117份可疑阳性血清标本的抗．HEVIgM，并用免疫印迹法（Western blot，WB）确认，逆转录（RT）．PCR检测HEVRNA加以比较。结果WB检测结果显示，戊型病毒性肝炎患者血清中抗-HEV IgM仅与459—607多肽二聚体反应，而不与其单体及472～607多肽反应。间接ELISA法检测35份HEV RNA阳性患者血清抗．HEV IgM均能与459～607多肽反应，而不与472～607多肽反应；69名健康人血清与2种多肽都不反应。117份可疑阳性血清中，5份能同时与2种多肽反应，但450nm吸光度（A450）值之差小于0．5。WB检测这5份血清抗-HEV IgM均阴性；RT—PCR检测HEV RNA为阴性，说明这5份血清为非特异性吸附引起的假阳性。结论ORF2 459～607多肽可有效检测抗-HEV IgM，根据血清与2种多肽反应的A450差异，能有效排除因非特异性吸附导致的抗-HEV IgM假阳性。; 毕永春潘金顺庄辉孙静吴超唐勤周乙华; 关键词：戊型免疫球蛋白M 病毒蛋白质类假阳性反应

普通成年人群隐匿性乙型肝炎病毒感染情况分析被引量：4: 2009年; 目的:调查普通成年人群隐匿性HBV感染率。方法:收集普通成年人血清1440份,ELISA检测HBV血清学标志物,分别设计HBV DNA不同区域的引物,用巢式PCR检测HBV DNA,对阳性标本进行DNA序列分析,并确定HBV基因型。结果:1440份血清中,HBsAg阳性70例(4.86%);HBsAg阴性的1370份血清中,3例(0.21%)至少2组不同特异性引物巢式PCR显示HBV DNA阳性。其DNA序列与基因库中已知HBV序列同源,证实了PCR产物的特异性,而各HBV DNA序列又不完全相同,排除了因污染造成的假阳性。3例隐匿性HBV感染中2例为基因型B型,另1例为C型。结论:普通成年人群存在隐匿性HBV感染。输血和器官移植时,仅以血清学标志物作为筛查HBV的手段,可能会引起HBV的传播。; 刘勇张乐张乐朱天礼毕永春潘金顺; 关键词：乙型肝炎病毒隐匿性感染巢式PCR DNA测序

RNA干扰和伊马替尼杀伤K562细胞效果的比较: 2008年; 目的比较RNA干扰（RNAi）和伊马替尼（imatinib）杀伤K562细胞的效果。方法设计有效的bcr—abl干扰shRNA序列，利用基因工程技术插入到干扰载体构建RNAi质粒。测序鉴定正确的RNAi质粒转染K562细胞，48h后荧光显微镜观察转染效率。RT—PCR技术检测K562细胞中bcr—abl表达水平。同时，伊马替尼作用K562细胞。利用凋亡分析、MTT增生实验和磷酸化的酪氨酸蛋白含量检测来评估RNAi和伊马替尼作用效果。结果与伊马替尼一样，RNAi使K562细胞凋亡增强，增生减少，磷酸化的酪氨酸蛋白含量减少。结论RNAi达到伊马替尼杀伤K562细胞的效果，有望在临床用于治疗慢性髓细胞白血病（CML）患者，尤其是那些对伊马替尼等化疗药物不敏感的CML患者。; 顾香芳孙雪梅陈军浩刘勇潘金顺; 关键词：K562细胞 RNA干扰

采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽检测特异性IgM抗体被引量：3: 2009年; 目的:采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽检测特异性IgM抗体。方法:采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽,制备ELISA检测试剂,同时使用北京万泰生物药业公司生产的抗-HEV IgM抗体诊断试剂,分别检测33例戊型肝炎患者血清和344例普通人群血清抗-HEV IgM,并对部分阳性标本用免疫印迹法(Western blot,WB)确认。结果:用本室ELISA试剂检测33例戊型肝炎患者血清,抗-HEV IgM均阳性,符合率为100%;用万泰公司试剂检测阳性31例,符合率为93.9%。344例普通人血清中,本室试剂检测抗-HEV IgM阳性11例,而用万泰试剂检测仅其中6例显示阳性;对本室试剂阳性而万泰试剂阴性的5例进一步用WB检测,抗-HEV IgM均阳性。结论:本室制备的ELISA试剂可准确高效地检测血清抗-HEV IgM。; 潘金顺周镇先毕永春吴超周乙华; 关键词：戊型肝炎酶联免疫吸附测定特异性IGM抗体

靶向ANG-2的shRNA重组载体抑制人子宫内膜癌Ishikawa生长和侵袭的研究被引量：1: 2009年; 目的探讨采用RNA干扰（RNA interference，RNAi）抑制血管生成素-2（angiopoietin-2，ANG2）基因的表达对人子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞的影响。方法采用脂质体Lipofectamine^TM2000介导的方法将针对ANG-2基因的短发卡状RNA（short hairpin RNA，shRNA）表达载体转染到人子宫内膜癌Ishikawa细胞中，逆转录聚合酶链反应及Western印迹法检测ANG-2rnRNA及蛋白的表达；噻唑蓝比色法检测Ishikawa细胞的增殖；荧光显微镜观察细胞形态；流式细胞仪检测细胞周期及凋亡；侵袭实验检测其对侵袭能力的影响。结果人子宫内膜癌Ishikawa细胞ANG-2mRNA及其蛋白质表达水平均显著降低；增殖被抑制，抑制率63．11％；细胞凋亡增加，细胞凋亡率与空白对照组和阴性对照组相比明显增高；细胞生长减慢，阻滞于G1期的增多，S期细胞减少；侵袭能力明显下降。结论靶向ANG-2的shRNA能成功下调ANG-2基因的表达，抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长和侵袭。; 周怀君何荣荣夏宝妹寻庆英潘金顺胡娅莉; 关键词：血管生成素-2 子宫内膜癌 ISHIKAWA细胞

乙型肝炎表面抗原和表面抗体同时阳性患者随访分析被引量：1: 2014年; 目的分析乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)同时阳性的乙型肝炎病毒(HBV)感染者病毒学特征动态变化。方法对53例HBsAg和抗-HBs同时阳性患者进行平均13.5个月的随访,检测随访前后血清HBV标志物,并对HBV DNA进行定量检测及丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测,分析其病毒学特征变化特点。结果 53例患者随访期间,4例(7.55%)HBsAg转为阴性,13例(24.53%)抗-HBs转为阴性,而36例(67.92%)HBsAg和抗-HBs仍同时为阳性。随访后患者血清HBsAg与抗-HBs水平、乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性率及ALT水平与随访前相比差异无统计学意义(P>0.05),随访后HBV DNA水平(3.44±1.60log10)IU/mL较随访前(3.00±1.36)log10IU/mL降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大多数HBsAg与抗-HBs同时阳性的HBV感染者抗原与抗体可长期存在,HBsAg及HBV DNA水平较低、HBeAg阴性患者更易发生HBsAg转阴。; 刘勇周锦勇周锦勇潘金顺李雷; 关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗体病毒学特征

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潘金顺

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