毕永春
- 作品数：41 被引量：234H指数：8
- 供职机构：南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京市医学科技发展项目江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 煌焦油蓝改良法计数网织红细胞被引量：8
- 2004年
- 毕永春王图年张葵
- 关键词：网织红细胞血液分析仪网织红细胞计数
- CD30基因多态性与慢性肾功能衰竭及肾移植术后急性移植排斥反应的相关性被引量：1
- 2007年
- 目的:近年来,国际多个移植免疫学者发现可溶性CD30可作为一种新的与移植肾存活相关的风险预测指标。拟在基因水平上分析CD30基因启动区和5'侧翼区3个位点的多态性与肾功能衰竭的关系,以探讨其与慢性肾功能衰竭患者血清中可溶性CD30含量增高的相关性以及与肾移植术后发生急性移植排斥的关系。方法:选取2004-05/2006-04在南京市鼓楼医院首次接受肾移植手术的肾功能衰竭终末期患者78例,另选择95例健康体检者作为对照,均知情同意。提取两组观察对象的外周血基因组DNA,采用聚合酶链反应扩增CD30基因启动区-201位的AJ289159多态性位点和5'侧翼区rs946461和rs1208993多态性位点所在部分的DNA片段,采用高效液相色谱法检测各位点多态性,DNA测序验证。比较分析CD30基因型在慢性肾功能衰竭患者和正常人群中的分布,并探讨CD30基因多态性与慢性肾功能衰竭的关系。同时检测慢性肾功能衰竭患者血清中可溶性CD30的含量,探讨CD30基因多态性与可溶性CD30含量的关系。结果:两组观察对象均进入结果分析,无脱落。①CD30启动区-201位的AJ289159多态性位点在入选的173例中国人群中未发现存在碱基突变。②两个5'侧翼区的多态性位点rs946461和rs1208993虽然在慢性肾功能衰竭组和正常对照组中基因突变频率较高,但多态性分布在两组观察对象中差异无显著性意义(P>0.05)。③慢性肾功能衰竭患者血清中可溶性CD30水平显著高于正常对照组(P<0.01)。结论:CD30启动区的AJ289159位点和5'侧翼区的rs946461和rs1208993位点的基因多态性与肾功能衰竭患者中可溶性CD30含量的增高可能无关,可溶性CD30的增高也许在基因水平上存在着其他改变,或是受其他刺激因素的影响导致患者的免疫活化状态,进而关系到移植后急性排斥反应的发生和移植肾的长期存活。
- 毕永春张葵
- 关键词：肾移植器官移植
- 利用戊型肝炎病毒开放读码框架2截短多肽降低抗戊型肝炎病毒IgM检测中的假阳性被引量：6
- 2009年
- 目的研究用戊型肝炎病毒4型（HEV-4）开放读码框架（ORF）2主要免疫表位截短多肽排除抗-HEV IgM检测中发生假阳性的可行性。方法用重组HEV-4 ORF2蛋白主要抗原决定簇多肽（459—607位氨基酸）及其截短多肽（472～607位氨基酸）为抗原分别包被ELISA板，用间接ELISA法分别检测35份HEV RNA阳性患者血清、69份健康人血清和117份可疑阳性血清标本的抗．HEVIgM，并用免疫印迹法（Western blot，WB）确认，逆转录（RT）．PCR检测HEVRNA加以比较。结果WB检测结果显示，戊型病毒性肝炎患者血清中抗-HEV IgM仅与459—607多肽二聚体反应，而不与其单体及472～607多肽反应。间接ELISA法检测35份HEV RNA阳性患者血清抗．HEV IgM均能与459～607多肽反应，而不与472～607多肽反应；69名健康人血清与2种多肽都不反应。117份可疑阳性血清中，5份能同时与2种多肽反应，但450nm吸光度（A450）值之差小于0．5。WB检测这5份血清抗-HEV IgM均阴性；RT—PCR检测HEV RNA为阴性，说明这5份血清为非特异性吸附引起的假阳性。结论ORF2 459～607多肽可有效检测抗-HEV IgM，根据血清与2种多肽反应的A450差异，能有效排除因非特异性吸附导致的抗-HEV IgM假阳性。
- 毕永春潘金顺庄辉孙静吴超唐勤周乙华
- 关键词：戊型免疫球蛋白M病毒蛋白质类假阳性反应
- 普通成年人群隐匿性乙型肝炎病毒感染情况分析被引量：4
- 2009年
- 目的:调查普通成年人群隐匿性HBV感染率。方法:收集普通成年人血清1440份,ELISA检测HBV血清学标志物,分别设计HBV DNA不同区域的引物,用巢式PCR检测HBV DNA,对阳性标本进行DNA序列分析,并确定HBV基因型。结果:1440份血清中,HBsAg阳性70例(4.86%);HBsAg阴性的1370份血清中,3例(0.21%)至少2组不同特异性引物巢式PCR显示HBV DNA阳性。其DNA序列与基因库中已知HBV序列同源,证实了PCR产物的特异性,而各HBV DNA序列又不完全相同,排除了因污染造成的假阳性。3例隐匿性HBV感染中2例为基因型B型,另1例为C型。结论:普通成年人群存在隐匿性HBV感染。输血和器官移植时,仅以血清学标志物作为筛查HBV的手段,可能会引起HBV的传播。
- 刘勇张乐张乐朱天礼毕永春潘金顺
- 关键词：乙型肝炎病毒隐匿性感染巢式PCRDNA测序
- 合格献血者血浆HBV残留情况分析被引量：5
- 2008年
- 目的调查合格献血者血浆残留HBV的阳性率,评估输血后HBV感染风险。方法收集945份合格献血者的血浆,采用ELISA法检测HBV核心抗体(抗-HBc);提取血浆DNA,采用巢式PCR方法检测HBV DNA。结果血浆标本以1∶5稀释后抗-HBc阳性率为19.68%,而1∶50稀释后阳性率则为2.33%。共检测出HBV DNA阳性标本3例,其中1例抗-HBc阳性,另外2例抗-HBc为阴性。合格献血者中隐匿性HBV感染率约为0.32%。结论我国合格献血者标本中仍有部分血浆有HBV残留,抗-HBc阳性标本中HBV DNA阳性率较抗-HBc阴性标本高,应引起重视。
- 李平刘勇李翠萍毕永春张葵周乙华
- 关键词：乙型肝炎病毒核酸抗-HBC巢式PCR
- 肝癌组织中HLAⅠ类抗原及相关分子的表达被引量：1
- 2009年
- 目的研究在抗原提呈过程中HLAⅠ类抗原各相关分子的表达水平及临床意义。方法利用免疫组织化学法(ABC法)对165例肝癌的石蜡组织标本中HLAⅠ类分子的重链、轻链及抗原提呈相关分子calnexin、LMP2等的表达情况进行研究,并分析各表达分子的相关性。结果HLAⅠ类分子(A和B/C位点)的表达为膜型,β_2M的表达为膜浆型,以膜为主,而LMP2和calnexin的表达为浆型。肝癌组织除LMP2分子外,HLAⅠ类各分子均有明显的上调(上调率≥40%),其中以HLAⅠ类分子A位点上调最明显(54%)。肝癌组织中HLAⅠ类各分子之间表达趋势一致。结论肝癌表面HLAⅠ类分子表达增加与抗原提呈过程中多分子的表达增加和协同作用有关,而并非由其中某种单一分子的改变来决定。
- 沈宇清缪凤琴夏梅毕永春陈建国谢维张建琼
- 关键词：肝癌免疫组化
- 国产抗-HBs定性试剂评估人群对乙型肝炎病毒的免疫状态
- 2013年
- 目的:探讨国产抗-HBs定性试剂在评估人群对乙型肝炎病毒(HBV)有无免疫力的应用价值。方法:对1016例HBsAg阴性血清,分别用国产定性试剂和美国雅培定量试剂检测抗-HBs,比较结果的一致性和差异。结果:639例(62.9%)血清国产试剂检测抗-HBs阳性,742例(73.0%)雅培试剂检测阳性(≥10 mIU/ml,χ2=23.98,P<0.001)。在抗-HBs≥100 mIU/ml的444例、50 mIU/ml～99 mIU/ml的83例和10 mIU/ml～49 mIU/ml的215例,国产试剂检测阳性率分别为99.1%、92.8%和52.1%。在雅培试剂检测抗-HBs<10 mIU/ml的274例中,国产试剂98.2%阴性。结论:国产抗-HBs定性试剂具有良好的特异性,虽然对低水平抗-HBs阳性血清的检出率较低,但抗-HBs≥50 mIU/ml时,具有良好的检出率。国产定性试剂抗-HBs阳性,说明对HBV有免疫力,通常无需定量检测。
- 冯振华毕永春张姝陈洁胡娅莉周乙华
- 关键词：乙型肝炎表面抗体
- 病毒性肝炎患者血清中可溶性CD30检测的临床意义被引量：3
- 2009年
- 目的检测病毒性肝炎患者血清中可溶性CD30(sCD30)的水平及其与血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的相关性及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测85例病毒性肝炎患者(包括43例乙型肝炎、19例丙型肝炎、23例戊型肝炎)血清中sCD30的水平,同时采用日立7600生化仪检测血清中ALT的水平。另取30例ALT正常的乙型肝炎病毒(HBV)携带者作为乙型肝炎对照,30名健康体检者作为正常对照。结果各型病毒性肝炎患者血清中sCD30和ALT水平均明显高于正常对照,ALT水平升高的乙型肝炎患者较ALT正常的HBV携带者血清中sCD30水平明显升高。各型病毒性肝炎患者血清中sCD30水平均与ALT呈正相关。结论病毒性肝炎存在Th2型细胞的活化,血清sCD30水平可以作为肝炎活动性的检测指标。
- 毕永春周乙华张葵朱天礼
- 关键词：可溶性CD30丙氨酸氨基转移酶病毒性肝炎
- 采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽检测特异性IgM抗体被引量：3
- 2009年
- 目的:采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽检测特异性IgM抗体。方法:采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽,制备ELISA检测试剂,同时使用北京万泰生物药业公司生产的抗-HEV IgM抗体诊断试剂,分别检测33例戊型肝炎患者血清和344例普通人群血清抗-HEV IgM,并对部分阳性标本用免疫印迹法(Western blot,WB)确认。结果:用本室ELISA试剂检测33例戊型肝炎患者血清,抗-HEV IgM均阳性,符合率为100%;用万泰公司试剂检测阳性31例,符合率为93.9%。344例普通人血清中,本室试剂检测抗-HEV IgM阳性11例,而用万泰试剂检测仅其中6例显示阳性;对本室试剂阳性而万泰试剂阴性的5例进一步用WB检测,抗-HEV IgM均阳性。结论:本室制备的ELISA试剂可准确高效地检测血清抗-HEV IgM。
- 潘金顺周镇先毕永春吴超周乙华
- 关键词：戊型肝炎酶联免疫吸附测定特异性IGM抗体
- 高浓度抗HIV抗体阳性样本致跨板携带污染1例被引量：3
- 2012年
- 2011年6月7日，我科发现1例含高浓度抗HIV抗体的血清样本发生全自动酶联仪跨板污染的情况，现报道如下。
- 夏挺胡伟毕永春
- 关键词：人类免疫缺陷病毒抗体酶联免疫吸附试验携带污染
