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女贞苷通过激活AMPK促进脂联素的组装被引量：5: 2016年; 目的:检测女贞苷对AMPK[一磷酸腺苷激活的蛋白激酶,adenosine 5'-monophosphate(AMP)-activated protein kinase]的激活作用,探究其激活机制以及对脂联素高聚体组装的影响。方法:用一定浓度的女贞苷处理人胚肾细胞衍生株293T细胞,通过蛋白质印迹法检测AMPK磷酸化水平,通过HPLC检测细胞中AMP和ATP(三磷酸腺苷,Adenosine 5'-triphosphate)的含量。用女贞苷处理3T3-L1脂肪细胞,检测其对脂联素组装的影响。结果:女贞苷能够使293T细胞中AMPK磷酸化水平升高。经过女贞苷处理后,细胞中AMP与ATP浓度的比值(AMP/ATP比值)升高。当AMPK表达被沉默后,女贞苷对脂联素高聚体组装的促进作用被解除。结论:女贞苷能够通过提高细胞中AMP/ATP比值来激活AMPK,进而促进脂联素高聚体的组装。; 郭文文张志杰李珍; 关键词：女贞苷 AMPK 脂联素高效液相色谱法

青年男性血清脂联素与非酒精性脂肪性肝炎的关系: 2013年; 目的:探究青年男性非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)患者血清脂联素总量及脂联素高聚体占总量的比例与NASH的关系.方法:测定64例NASH患者和46例健康患者对照组的转氨酶、血糖、血脂等生化指标及脂联素总量、脂联素各聚体含量,SPSS19.0分析统计.结果:NASH患者血清脂联素总量和高聚体所占比例显著低于正常组,且脂联素总量及高聚体比例随肝炎的严重程度递减.脂联素总量与总胆固醇、低密度脂蛋白负相关;脂联素高聚体比例与体质量指数负相关,与高密度脂蛋白正相关.结论:血清脂联素总量及高聚体占总量比例与青年男性NASH的严重程度密切相关.脂联素总量,尤其是高聚体在总量中所占比例的降低会加重NASH发展程度.; 张璐张琦方言朱奎轩李珍; 关键词：非酒精性脂肪性肝炎脂联素转氨酶

木犀草素是具有PPARγ激动剂活性的新型AMPK激活剂被引量：7: 2019年; 目的:木犀草素是一种天然黄酮类化合物,早期报导其能激活PPARγ,本实验室发现其也能激活AMPK。因此本研究验证木犀草素在脂肪细胞中能否激活PPARγ和AMPK,并探究这两种活性对脂肪前体细胞分化及脂联素高聚化的影响。方法:使用LanthaScreen TR-FRET PPARγ竞争性结合检测试剂盒检测木犀草素与PPARγ的结合能力,并用PPRE转录激活报告基因体系验证木犀草素是否激活PPARγ转录活性,利用油红O染色法检测木犀草素对3T3-L1脂肪前体细胞分化的影响,采用RNA干扰沉默成熟脂肪细胞中AMPKα1,用Western Blot检测相关蛋白水平。结果:木犀草素能直接结合PPARγ,其IC50为1880 nmoL·L^-1,并显示剂量依赖的PPARγ转录激活活性,抑制PPARγSer-273位点磷酸化。木犀草素能升高pAMPK(Thr-172)水平,抑制脂肪前体细胞分化,升高脂联素高聚化水平。结论:木犀草素通过激活AMPK和PPARγ调控脂肪前体细胞分化和脂联素高聚化,是一种具有PPARγ激动剂活性的新AMPK激活剂,有望成为治疗Ⅱ型糖尿病和肥胖等代谢紊乱疾病的潜在药物。; 张雨点谢锦艳李小川张志杰李珍; 关键词：木犀草素 PPARΓ AMPK 脂联素胰岛素敏感性

《生物化学》全英文教学的改革与创新: <正>《生物化学》是生命科学最重要的专业基础课之一,良好的生物化学基础对学生未来的学习和研究都将产生深远的影响。清华大学生命科学学院在国内较早尝试采用国际权威英文原版教材,实行全英文教学。在教书中认真借鉴国外一流大学的教...; 李珍; 文献传递

吴茱萸碱通过新的机制激活AMP蛋白激酶的研究被引量：3: 2012年; 目的检测吴茱萸碱在293T细胞中是否激活AMP蛋白激酶(AMPK),并探索吴茱萸碱激活AMPK的可能机制。方法采用10%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质免疫印迹检测磷酸化的AMPK和AMPK总量。将已知的AMPK激活剂(小檗碱、AICAR和A-769662)与吴茱萸碱同时处理293T细胞,通过检测吴茱萸碱与其共同处理的激活剂是否有协同效应来初步鉴定其激活AMPK的机制。结果本研究发现传统中药吴茱萸中的喹唑啉咔生物碱吴茱萸碱在293T中能激活AMPK,吴茱萸碱激活AMPK的机制不同于该研究中用到的AMPK激活剂(P<0.05,P<0.01)。结论吴茱萸碱是一种新AMPK激活剂,它通过不同于小檗碱、AICAR和A-769662的机制激活AMPK。; 陈志芬张志杰易俊阳张璐杨颛搏李珍; 关键词：AMPK 293T细胞吴茱萸碱

丹参酮ⅡA在3T3-L1脂肪细胞中促进脂联素的组装(英文)被引量：1: 2012年; 目的:研究丹参酮IIA对3T3-L1脂肪细胞中脂联素表达和蛋白多聚化的作用。方法:用油红染色鉴定3T3-L1脂肪细胞的分化状态。用Real-time PCR检测基因的mRNA表达水平。用2%15%梯度SDS-PAGE及Western blot检测脂联素三种聚体。用siRNA技术进行基因沉默。结果:本研究发现传统中药丹参中的萘醌二萜类成分丹参酮IIA在脂肪细胞中激活AMPK通路,同时抑制脂肪细胞分化,降低脂联素的表达。而在前体脂肪细胞分化过程或成熟脂肪细胞中加入丹参酮IIA进行处理,均明显促进脂联素的多聚化,增加高聚体的浓度。抑制AMPK通路能够解除丹参酮IIA对脂联素的作用。结论:丹参酮IIA通过激活AMPK在3T3-L1脂肪细胞中促进脂联素的组装。; 林桓李叶华李赟易骏阳麦毓麟李珍; 关键词：脂联素丹参酮IIA 3T3-L1脂肪细胞

噻唑衍生物WSF-SN-10激活AMPK的机制研究被引量：1: 2019年; 目的:在噻唑衍生物中筛选新型AMPK激活剂并探究其激活AMPK的分子机制,以期找到副作用少的II型糖尿病治疗药物。方法:用14种噻唑衍生物处理293T细胞,用Western Blot筛选能显著提高AMPK磷酸化水平的化合物;用HPLC和FACS分别检测该化合物对细胞内AMP/ATP比值和Ca2+浓度的影响,探究其激活AMPK的分子机制。结果:WSF-SN-10(2-(2-(6,6-二甲基双环[3,1,1]庚-2-亚基)肼基)-4-(4-氰基苯基)噻唑)为14种噻唑衍生物中活性最强的AMPK激活剂;20μM下WSF-SN-10激活AMPK的活性最强;用20μM WSF-SN-10处理293T细胞后,细胞内的AMP/ATP比值和LKB1的磷酸化水平分别上升至空白对照的1.94和3.04倍,同时Ca2+浓度无明显变化,说明WSF-SN-10通过增加细胞内的AMP/ATP比值来激活AMPK。结论:噻唑衍生物WSF-SN-10能抑制细胞内的ATP合成来间接激活AMPK,是治疗II型糖尿病和肥胖症的潜在药物。; 杨洋王芸芸李小川孙楠张志杰王石发李珍; 关键词：AMPK CA2+

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李珍