李慧
- 作品数:15 被引量:16H指数:3
- 供职机构:宁夏医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金:宁夏高等学校科学技术研究项目国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 血管紧张素-(1-7)对人脐静脉平滑肌细胞钙化的影响及其机制研究
- 2011年
- 目的复制人脐静脉平滑肌细胞(HUSMCs)钙化模型,观察血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对HUSMCs钙沉积的影响,探索Ang-(1-7)延缓或抑制HUSMCs钙化的机制。方法采用β-甘油磷酸盐(β-GP)复制HUSMCs钙沉积模型,Ang-(1-7)干预后,对细胞进行Von Kossa染色及图像分析、检测碱性磷酸酶(ALP)活性和细胞钙含量;检测细胞培养液中转化生长因子β1(TGFβ1)活性、骨钙素(OC)含量及细胞中核心结合因子1(Cbfα1)蛋白表达。结果 Ang-(1-7)可明显减轻钙化HUSMCs聚集生长,Von Kossa染色显示细胞聚集处棕褐色钙结节较钙化组明显减轻(P<0.01),且10-5、10-7、10-9mol.L-1Ang-(1-7)与钙化组相比钙化细胞百分比、细胞钙含量和ALP活性均明显降低(P均<0.01),细胞TGFβ1分泌水平、Cbfα1表达、骨钙素含量均较钙化组降低(P均<0.01)。结论 Ang-(1-7)可减轻HUSMCs钙化程度,其作用机制与减弱TGFβ1-Smads-Cbfα1信号通路中关键信号分子TGFβ1、Cbfα1的表达有关。
- 张娟张鸣号李慧李桂忠王秀梅曹军
- 关键词:血管钙化转化生长因子Β1骨钙素
- 结核分枝杆菌Ag85B蛋白真核表达质粒构建及其对小鼠肺免疫功能影响被引量:1
- 2023年
- 目的构建结核分枝杆菌Ag85B的真核表达质粒pcD-Ag85B,经肌肉免疫小鼠,观察其对小鼠肺免疫功能及下呼吸道菌群的影响。方法将信号肽基因及编码Ag85B的基因共963 bp核苷酸序列与pcDNA3.1^(+)连接,构建真核表达质粒pcD-Ag85B,经双酶切及测序鉴定后体外转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),并验证其表达;用该质粒经肌肉注射免疫C57BL/6J小鼠,42 d时收集小鼠呼吸道灌洗液,采用间接ELISA法测定SIgA及IgG特异性抗体效价。取小鼠右肺,分离淋巴细胞,采用流式术检测分泌IFN-γ的CD4^(+)T及CD8^(+)T细胞比例;取小鼠左肺,提取核酸进行16S RNA高通量测序及菌群结构分析。结果成功构建真核表达质粒pcD-Ag85B并检测到Ag85B蛋白的表达。ELISA检测pcD-Ag85B免疫C57BL/6J小鼠呼吸道灌洗液SIgA及特异性IgG抗体效价分别为1∶640和1∶400;流式细胞术检测Ag85B能诱导分泌IFN-γ的CD4^(+)T及CD8^(+)T细胞增殖,所占百分比分别为0.72%和0.57%;16S RNA高通量测序分析显示免疫鼠呼吸道菌群多样性增加,厚壁菌门-乳杆菌属丰富度增高(P<0.05)。结论成功构建重组表达载体pcD-Ag85B,该重组载体表达的Ag85B蛋白能诱导小鼠呼吸道粘膜产生适应性免疫效应,增加下呼吸道菌群的多样性并改善益生菌群,为开展Ag85B DNA疫苗抗结核分枝杆菌感染的保护性实验奠定了基础。
- 张炜李慧杨雨欣姚思王天松万巧凤
- 关键词:结核分枝杆菌AG85B真核表达载体适应性免疫益生菌
- 结核分枝杆菌Ag85BDNA疫苗在制备调节小鼠肠道功能制剂中的应用
- 本发明涉及疫苗应用技术领域,具体公开了结核分枝杆菌Ag85B DNA疫苗在制备调节小鼠肠道功能制剂中的应用。本发明中结核分枝杆菌Ag85BDNA疫苗刺激肠粘膜产生SIgA抗体,还增加了厚壁菌门的相对丰富度,降低拟杆菌门的...
- 万巧凤杨雨欣李慧张炜姚思
- ESAT6-wFc融合蛋白及其在制备抗结核黏膜免疫疫苗中的应用
- 本发明公开了ESAT6‑wFc融合蛋白及其在制备抗结核黏膜免疫疫苗中的应用。本发明提供了一种蛋白质,命名为ESAT6‑wFc蛋白,包括ESAT6区段和IgG2a Fc区段;所述ESAT6区段如序列表的序列1中第26‑11...
- 万巧凤杨茂胜杨雨欣李慧白雅
- 结核分枝杆菌Ag85B多克隆抗体的制备、纯化及鉴定被引量:1
- 2023年
- 为制备结核分枝杆菌Ag85B的多克隆抗体,采用微针注射法将前期构建好的真核表达质粒pcD-Ag85B经大腿肌肉免疫SD大鼠;采用间接ELISA法检测抗体滴度;初免后42 d,经腹主动脉取血并分离血清,采用Protein G柱分离纯化Anti-Ag85B抗体并鉴定抗体的特异性。初免后14 d、28 d、42 d的血清抗体平均效价分别为1∶747、1∶2 240、1∶2 667;分离纯化出高纯度且特异性高的anti-Ag85B抗体。成功获得了大鼠Anti-Ag85B多克隆抗体,为进一步研究Ag85B的功能和诊断结核病奠定了基础。
- 李慧姚思杨雨欣张炜万巧凤
- 关键词:结核分枝杆菌AG85B真核表达质粒抗体效价
- 慢性肺心病患者血浆抵抗素水平变化及其意义
- 2010年
- 目的探讨抵抗素(resistin)血浆水平变化与慢性肺心病之间的关系及其意义。方法选择慢性肺心病病人(CPHD组)22例,慢性阻塞性肺疾患组(COPD组)22例和32例健康人作为正常对照,放射免疫分析检测血浆resistin含量(ng.L-1)。结果 COPD组病人的抵抗素浓度较正常对照组降低(P<0.01),右下肺动脉横径、右室流出道内径较正常对照组显著增大(P<0.01),右室前壁厚度与抵抗素浓度存在正相关(r=0.541,P<0.01);CPHD组的病人抵抗素浓度较正常对照组和COPD组均显著降低(P<0.01);CPHD组的病人右下肺动脉横径、右室流出道内径、右室前壁厚度较正常对照组和慢性阻塞性肺疾患组均显著升高(P<0.01),右室流出道内径与抵抗素浓度水平存在正相关(r=0.477,P<0.05)。结论血浆抵抗素水平可作为监测慢性肺心病发生的早期标志物,用于慢性肺心病的早期诊断和预防。
- 李慧刘玲娟张娟徐华曹军唐朝枢李桂忠
- 关键词:抵抗素慢性肺心病放射免疫
- 结核分枝菌Ag85B DNA疫苗免疫对小鼠结肠SIgA及菌群的影响
- 2022年
- 目的 探究结核分枝杆菌Ag85B的真核表达质粒pcD-Ag85B经肌肉免疫后对小鼠结肠黏膜SIgA及菌群的影响。方法 以pcDNA3.1+为真核表达载体,将信号肽基因和编码Ag85B的Rv1886c基因共963 bp核苷酸序列连接到pcDNA3.1+,构建真核表达质粒pcD-Ag85B。通过双酶切和测序鉴定无误后,将pcD-Ag85B重组质粒转染中国仓鼠卵巢癌细胞(CHO)并验证其表达。采用微针注射法将pcD-Ag85B重组质粒经大腿肌肉免疫C57BL/6J小鼠;初免后42 d收集小鼠粪便及结肠黏液进行16S RNA高通量测序和菌群结构分析,并测定SIgA特异性抗体效价。结果 成功构建真核表达质粒pcD-Ag85B并检测到Ag85B蛋白的特异性表达,蛋白相对分子质量约为35×10~3,与预期相符。一免疫后42 d,Ag85B组小鼠结肠厚壁菌门-乳杆菌属的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)和约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)丰度与对照组相比显著增高(均P<0.05);肠粘膜SlgA效价为1∶4500。结论 成功获得表达Ag85B蛋白的真核表达质粒,用该质粒免疫能诱导小鼠结肠粘膜产生体液免疫效应,改善结肠益生菌-乳酸杆菌群丰度。
- 李慧杨雨欣姚思张炜马国荣万巧凤
- 关键词:AG85B真核表达质粒抗体效价
- 维持性透析患者腹主动脉钙化和骨质疏松的相关性研究
- 目的探讨(1)维持性透析患者腹主动脉钙化、骨质疏松的临床特点及其危险因素;(2)维持性透析患者腹主动脉钙化和骨质疏松的相关关系。方法采取横断面研究。纳入2019年1月至2019年11月在宁夏医科大学总医院肾脏内科行维持性...
- 李慧
- 关键词:维持性透析骨质疏松
- 文献传递
- L-精氨酸对血管钙化大鼠核心结合因子1表达的影响被引量:1
- 2011年
- 目的探讨L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)对大鼠血管钙化的作用及其机制。方法利用维生素D3、尼古丁制备大鼠血管钙化模型,并将大鼠随机分为6组:对照组(CON)、钙化组(VDN)、L-NAME组(L-NA)、钙化+L-NAME组(VLN)、钙化+低剂量L-Arg组(VLA)、钙化+高剂量L-Arg组(VHA)。常规饲养6周后采集标本,胸主动脉行Von Kossa染色,用原子吸收分光光度法检测大鼠血管组织钙含量、碱性磷酸酶活性及NO含量,western blot技术检测核心结合因子1(core binding factor-1,cbfα1)的表达。结果 VonKossa染色,VDN组明显见到钙化颗粒,并成片状,使用L-Arg干预后钙化颗粒明显减少;VDN组的血管组织钙含量、碱性磷酸酶活性较CON组均明显增加(P<0.05),VLA与VHA组血管组织钙含量、碱性磷酸酶活性均较VDN组明显降低(P<0.05);VDN组血管组织NO含量较CON组明显减少(P<0.05),VLA与VHA组均较VDN组升高(P<0.05);western blot检测表明,VDN组cbfα1表达水平较CON组明显升高(P<0.05),VLA与VHA组较VDN组明显降低(P<0.05)。结论 L-Arg可能通过降低核心结合因子1的表达起到减轻血管钙化的作用。
- 龙儒桃翁启芳徐华王菲杨晓玲张鸣号李慧张娟张慧云马兰曹军李桂忠
- 关键词:血管钙化左旋精氨酸一氧化氮
- 一种结核分枝杆菌Ag85B DNA疫苗及其制备方法和应用
- 本发明涉及生物疫苗技术领域,具体公开了一种结核分枝杆菌Ag85BDNA疫苗及其制备方法和应用,将HSV2gD信号肽基因和Rv1886c基因连接于载体pcDNA3.1+上的HindⅢ/Xbal之间,获得pcD‑sRv188...
- 万巧凤杨雨欣李慧刘琼张炜