张炜
- 作品数：30 被引量：46H指数：4
- 供职机构：宁夏医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金中国科学院西部之光基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 结核分枝杆菌Ag85BDNA疫苗在制备调节小鼠肠道功能制剂中的应用
- 本发明涉及疫苗应用技术领域，具体公开了结核分枝杆菌Ag85B DNA疫苗在制备调节小鼠肠道功能制剂中的应用。本发明中结核分枝杆菌Ag85BDNA疫苗刺激肠粘膜产生SIgA抗体，还增加了厚壁菌门的相对丰富度，降低拟杆菌门的...
- 万巧凤杨雨欣李慧张炜姚思
- 结核分枝杆菌Ag85B多克隆抗体的制备、纯化及鉴定被引量：1
- 2023年
- 为制备结核分枝杆菌Ag85B的多克隆抗体,采用微针注射法将前期构建好的真核表达质粒pcD-Ag85B经大腿肌肉免疫SD大鼠;采用间接ELISA法检测抗体滴度;初免后42 d,经腹主动脉取血并分离血清,采用Protein G柱分离纯化Anti-Ag85B抗体并鉴定抗体的特异性。初免后14 d、28 d、42 d的血清抗体平均效价分别为1∶747、1∶2 240、1∶2 667;分离纯化出高纯度且特异性高的anti-Ag85B抗体。成功获得了大鼠Anti-Ag85B多克隆抗体,为进一步研究Ag85B的功能和诊断结核病奠定了基础。
- 李慧姚思杨雨欣张炜万巧凤
- 关键词：结核分枝杆菌AG85B真核表达质粒抗体效价
- 一种滴鼻免疫的结核菌Ag85B-wFc融合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明涉及生物医药技术领域，具体公开了一种滴鼻免疫的结核菌Ag85B‑wFc融合蛋白及其制备方法和应用，所述Ag85B‑wFc融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码该蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO....
- 杨雨欣万巧凤杨茂胜王婧刘琼张炜
- 非常时期“人体寄生虫学”线上实验教学模式探索被引量：1
- 2022年
- 构建一种基于国家启动重大突发性公共卫生事件一级响应、在确保停课不停学、停课不降教学质量的特殊时期的“人体寄生虫学”线上实验教学模式及过程性考核方式,以备在非常时期线上实验教学所用。方法是以本课程组自制的微视频为主素材,以班级微信群、宁夏医科大学在线教学平台及钉钉直播教学平台为载体,同时构建课前、课堂及课后过程性考核方式;以本校2019级护理本科1、2班为实验组,采用线上实验教学法;以本校2019级护理本科3、4班为对照组,采用常规实验室教学法。结果是对实验组和对照组共同参与的实验报告成绩、标本辨识成绩进行比较分析,结果显示实验组的实验报告成绩低于对照组(P>0.05),而标本辨识成绩高于对照组(P<0.05)。结论是这种线上实验教学模式及过程性考核方式适宜于非常时期“人体寄生虫学”线上实验教学,对其他实验性学科具有一定的示范作用。
- 万巧凤王丽张炜马锐马国荣黄菱
- 关键词：人体寄生虫学
- 结核分枝菌Ag85B DNA疫苗免疫对小鼠结肠SIgA及菌群的影响
- 2022年
- 目的 探究结核分枝杆菌Ag85B的真核表达质粒pcD-Ag85B经肌肉免疫后对小鼠结肠黏膜SIgA及菌群的影响。方法 以pcDNA3.1+为真核表达载体,将信号肽基因和编码Ag85B的Rv1886c基因共963 bp核苷酸序列连接到pcDNA3.1+,构建真核表达质粒pcD-Ag85B。通过双酶切和测序鉴定无误后,将pcD-Ag85B重组质粒转染中国仓鼠卵巢癌细胞(CHO)并验证其表达。采用微针注射法将pcD-Ag85B重组质粒经大腿肌肉免疫C57BL/6J小鼠;初免后42 d收集小鼠粪便及结肠黏液进行16S RNA高通量测序和菌群结构分析,并测定SIgA特异性抗体效价。结果 成功构建真核表达质粒pcD-Ag85B并检测到Ag85B蛋白的特异性表达,蛋白相对分子质量约为35×10~3,与预期相符。一免疫后42 d,Ag85B组小鼠结肠厚壁菌门-乳杆菌属的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)和约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)丰度与对照组相比显著增高(均P<0.05);肠粘膜SlgA效价为1∶4500。结论 成功获得表达Ag85B蛋白的真核表达质粒,用该质粒免疫能诱导小鼠结肠粘膜产生体液免疫效应,改善结肠益生菌-乳酸杆菌群丰度。
- 李慧杨雨欣姚思张炜马国荣万巧凤
- 关键词：AG85B真核表达质粒抗体效价
- 基于卓越医生培养的病原生物学与免疫学教学改革被引量：3
- 2016年
- "卓越医生教育培养计划"要求更新教育教学观念,改革教学内容、教学方法与课程体系和评价考核方法,推进以学生自主学习为导向的教学方法改革,完善以能力为导向的形成性与终结性相结合的评定体系。宁夏医科大学在病原生物学与医学免疫学教学中,努力探索,实施了一系列改革措施,以适应培养卓越医学人才的要求。
- 韩梅王浩摆茹赵嘉庆万巧凤张炜杨志伟王琦
- 关键词：病原生物学医学免疫学教学改革
- 细粒棘球绦虫rP29重组疫苗诱导免疫小鼠脾脏免疫细胞及相关细胞因子水平的变化
- 囊型包虫病主要是细粒棘球绦虫感染所引起的、一种严重危害健康的人兽共患病,为社会、家庭带来了沉重的负担。利用疫苗抵御疾病,已成为一种行之有效的方法,本文旨在观察重组疫苗P29刺激机体产生的免疫应答,为研究包虫病候选疫苗提供...
- 马锐万巧凤张炜黄菱
- 文献传递
- 结核分枝杆菌Ag85B蛋白真核表达质粒构建及其对小鼠肺免疫功能影响被引量：1
- 2023年
- 目的构建结核分枝杆菌Ag85B的真核表达质粒pcD-Ag85B,经肌肉免疫小鼠,观察其对小鼠肺免疫功能及下呼吸道菌群的影响。方法将信号肽基因及编码Ag85B的基因共963 bp核苷酸序列与pcDNA3.1^(+)连接,构建真核表达质粒pcD-Ag85B,经双酶切及测序鉴定后体外转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),并验证其表达;用该质粒经肌肉注射免疫C57BL/6J小鼠,42 d时收集小鼠呼吸道灌洗液,采用间接ELISA法测定SIgA及IgG特异性抗体效价。取小鼠右肺,分离淋巴细胞,采用流式术检测分泌IFN-γ的CD4^(+)T及CD8^(+)T细胞比例;取小鼠左肺,提取核酸进行16S RNA高通量测序及菌群结构分析。结果成功构建真核表达质粒pcD-Ag85B并检测到Ag85B蛋白的表达。ELISA检测pcD-Ag85B免疫C57BL/6J小鼠呼吸道灌洗液SIgA及特异性IgG抗体效价分别为1∶640和1∶400;流式细胞术检测Ag85B能诱导分泌IFN-γ的CD4^(+)T及CD8^(+)T细胞增殖,所占百分比分别为0.72%和0.57%;16S RNA高通量测序分析显示免疫鼠呼吸道菌群多样性增加,厚壁菌门-乳杆菌属丰富度增高(P<0.05)。结论成功构建重组表达载体pcD-Ag85B,该重组载体表达的Ag85B蛋白能诱导小鼠呼吸道粘膜产生适应性免疫效应,增加下呼吸道菌群的多样性并改善益生菌群,为开展Ag85B DNA疫苗抗结核分枝杆菌感染的保护性实验奠定了基础。
- 张炜李慧杨雨欣姚思王天松万巧凤
- 关键词：结核分枝杆菌AG85B真核表达载体适应性免疫益生菌
- 结核分枝杆菌Ag85B-Fc2a DNA疫苗的免疫原性及免疫保护性评价
- 2024年
- 目的 评价结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)Ag85B-Fc2a DNA疫苗在小鼠体内产生的免疫原性及免疫保护性,以期为该疫苗的研发提供实验依据。方法 将重组质粒pcD-Ag85B-Fc2a经双酶切和测序鉴定后,转染CHO-K1细胞,采用Western blot法检测融合蛋白Ag85B-Fc2a的表达。将载体pcDNA3.1(+)及重组质粒pcD-Ag85BFc2a经大腿肌内分别注射雌雄C57BL/6J小鼠(对照组及免疫组),每组10只,初次免疫后2周进行加强免疫。初次免疫后14、28及42 d,经小鼠眼眶采血,分离血清,采用间接ELISA法检测血清中IgG抗体效价;初次免疫后42 d,无菌取小鼠脾脏,制备为单细胞悬液,采用流式细胞术检测CD4^(+)及CD8^(+)T细胞比例;初次免疫后42 d,经尾静脉注射M.tb H37Ra,10~6 CFU/只,攻毒28 d后,断颈处死小鼠,无菌分离小鼠肺脏及脾脏,采用平板法检测左侧肺脏及脾脏荷菌数,金胺O荧光染色法检测右侧肺脏的荷菌情况。结果 经双酶切及测序鉴定,重组质粒pcD-Ag85B-Fc2a构建正确,转染CHO-K1细胞后,可检测到相对分子质量约70 000的融合蛋白Ag85B-Fc2a。初次免后14、28、42d,免疫组小鼠血清Ag85B特异性IgG抗体效价分别为1:3 200、1:12 160、1:12 800,对照组小鼠血清中均未检测到抗体效价。初次免疫后42 d,对照组及免疫组小鼠脾脏中CD4+T细胞比例分别为(23.61±0.64)%及(26.92±0.80)%,CD8^(+)T细胞比例分别为(14.12±0.87)%及(18.78±0.94)%,差异均有统计学意义(t分别为3.23和3.64,P均<0.05)。M.tb H37Ra感染28 d,对照组及免疫组小鼠左侧肺脏荷菌数分别为(4.73±0.13)及(3.81±0.14) CFU,脾脏荷菌数分别为(5.02±0.19)及(4.30±0.13) CFU,差异均有统计学意义(t分别为4.65和3.12,P均<0.01);右侧肺脏荷菌情况与左侧一致。结论 Ag85B-Fc2a DNA疫苗在小鼠体内可诱导特异性体液及细胞免疫效应,对M.tb H37Ra感染可产生良好的保护力。
- 王天松杨媛姚思杨雨欣王婧张炜万巧凤
- 关键词：结核分枝杆菌DNA疫苗体液免疫保护力
- 一种结核分枝杆菌Ag85B DNA疫苗及其制备方法和应用
- 本发明涉及生物疫苗技术领域，具体公开了一种结核分枝杆菌Ag85BDNA疫苗及其制备方法和应用，将HSV2gD信号肽基因和Rv1886c基因连接于载体pcDNA3.1+上的HindⅢ/Xbal之间，获得pcD‑sRv188...
- 万巧凤杨雨欣李慧刘琼张炜
