李国华
- 作品数：6 被引量：1H指数：1
- 供职机构：延安职业技术学院更多>>
- 发文基金：延安市科学技术研究与发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- TIG-Fc真核表达载体的构建及其对自然杀伤细胞功能的影响
- 2020年
- T细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制性基序结构域[T-cell immunoglobulin and immunoreceptor tyrosinebased inhibitory motif(ITIM)domain,TIGIT]是一种新型的免疫抑制性受体,在机体的免疫调节网络中扮演着重要角色。为了进一步探究TIGIT对自然杀伤(natural killer,NK)细胞的免疫调节功能,构建了融合蛋白TIGIT胞外段(即TIGIT第1~135位氨基酸,以保留功能结构域Ig V区,此胞外段简称为TIG)-人免疫球蛋白G3(immunoglobulin G3,Ig G3)Fc段的真核表达载体,并对TIG-Fc融合蛋白的表达及其对NK-92细胞功能的影响进行了初步研究。利用分子生物学方法,将携带人TIG与人Ig G3 Fc段的基因融合,然后插入真核表达载体pc DNA3.1(-)中,以构建重组质粒pc DNA3.1(-)-TIGFc。随后将重组质粒转染至人胚肾细胞HEK-293T中,通过流式细胞仪和Western blot检测TIG-Fc融合蛋白在293T细胞中的表达;再将重组质粒转染至NK-92细胞中,通过WST-1检测TIG-Fc融合蛋白对NK-92细胞增殖的影响,并利用ELISA法检测TIG-Fc融合蛋白对NK-92细胞分泌IFN-γ的水平的影响。结果成功构建了人TIG与人Ig G3 Fc融合表达的真核表达载体,且TIG-Fc融合蛋白的表达能够显著抑制NK-92细胞的增殖和分泌IFN-γ的能力(P<0.05),为后期TIGIT的功能研究奠定了重要基础。
- 李国华高锦伟周希胜王霞程伟华
- 关键词：融合蛋白真核表达自然杀伤细胞
- 治疗风寒型支气管哮喘的中药方剂
- 本发明公开了一种治疗风寒型支气管哮喘的中药方剂，其特征在于，由麻黄、桂枝、细辛、干姜、白芥子、苦杏仁、薯蓣、苏子、五味子、法夏、黄芪、白术、山萸肉、太子参、枸杞配伍组成。本发明的有益之处在于：治疗风寒型支气管哮喘效果好，...
- 李国华李亚芳康健军阮彩莲程伟华胡国柱李娜
- 文献传递
- 抗TIGIT单克隆抗体的制备及活性鉴定
- 2020年
- 目的制备新型抑制剂膜分子TIGIT(T cell immunoglobulin and ITIM domain)的单克隆抗体并鉴定其在心脏移植免疫耐受中的作用.方法用人TIGIT-GST重组蛋白免疫小鼠并制备单克隆抗体,抗体特异性实验检测抗体与TIGIT的结合能力.运用重导向杀伤实验检测TIGIT抗体对NK细胞杀伤P815的作用.通过酶吸收法检测TIGIT活化性抗体对CTLs及CD8 Treg细胞活性的影响.结果成功制备得到一株非活化的抗TIGIT的抗体7M13和一株活化性的抗TIGIT抗体4D9.抗体特异性实验表明抗体7M13和4D9均能与人和小鼠的TIGIT结合.重导向杀伤实验表明该抗体7M13对NK细胞杀伤P815细胞的功能没有显著抑制作用,说明7M13可以与TIGIT结合而不活化TIGIT;而4D9则可以显著抑制NK细胞的杀伤功能.从37例心脏移植患者中分离CTLs及CD8 Treg,采用TIGIT活化性抗体处理对细胞生存能力无显著影响,但可明显抑制CTLs的增殖能力,而对CD8 Treg的增殖能力无显著影响.结论分别成功获得非活化的抗TIGIT抗体7M13和活化性的抗TIGIT抗体4D9,并且4D9可显著抑制NK细胞的杀伤功能.
- 李国华程伟华康建军王航辉姜丽
- 关键词：心脏移植TIGHTIMMUNOGLOBULINITIM单克隆抗体
- 一种治疗慢性咽喉炎的中药及其制备方法
- 本发明公开了一种治疗慢性咽喉炎的中药和制备方法，本发明提供的中药由包括下述的重量份的原料制成：生地912份，麦冬912份，玄参912份，黄芩915份，桑白皮915份，枇杷叶915份，贝母68份，桔梗610份，射干35份，...
- 李国华康建军李亚芳
- 文献传递
- 肉制品中猪源性成分相对定量检测方法研究被引量：1
- 2019年
- 目的建立一种肉制品中猪源性成分的相对定量检测方法。方法针对猪的ER-beta基因的mRNA序列设计了特异性引物与探针序列,并对引物和探针的特异性进行了验证。构建重组质粒,利用质粒拷贝数的log值和Ct值构建标准曲线。通过标准曲线计算各个样本拷贝数,将待测样本和标准种源样本的拷贝数进行比较,确定检测样本的猪源性含量。结果实际掺加量分别为20%、40%、50%和60%的混合样品经该方法检测所得掺假量均值为猪体系24.8%、53.1%、53.1%、61%,检测结果与其实际含量基本一致。结论该方法基本能实现肉制品中猪源性成分的相对定量检测。
- 李国华高锦伟南丽娟张建芳
- 关键词：肉制品重组质粒
