张晓娟
- 作品数：10 被引量：25H指数：3
- 供职机构：沈阳市胸科医院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 中国部分地区耐利福平耐药基因的检测被引量：1
- 2003年
- 目的 研究中国部分地区耐利福平 (RFP)结核分支杆菌临床分离株rpoB基因突变情况并评价其耐药分子机制。方法 采用聚合酶链反应 -单链构象多态性 (PCR -SSCP)对 45 3株结核分支杆菌临床分离株 (其中敏感株 14 8株 ,耐RFP或含耐RFP株 3 0 5株 )rpoB基因进行检测。并对其中 12株SSCP阴性的耐药株用双脱氧末端终止法进行测序分析。结果 北京市、上海市、河北省、河南省、辽宁省、吉林省、安徽省 ,结核分支杆菌耐RFP临床分离株rpoB基因突变率分别为 90 % ,92 % ,90 % ,90 % ,92 % ,94% ,93 %。经统计学处理不同地区间差异无显著性 ( χ2 =0 3 1,P >0 0 5 )。同时敏感株均无突变 ,特异性为 10 0 %。 12株SSCP阴性耐药株中经测序 4株在 5 3 1位密码子TCG→TTG ,1株 5 2 6位密码子CAC→TAC ,1株发生在 5 16位密码子GAC→GTC ,6株未改变。结论 中国不同地区耐利福平耐药基因突变率大致相同 ,rpoB基因突变是耐RFP结核分支杆菌耐药性的主要分子机制 ,PCR
- 陈红兵王仲元张小刚何秀云董亚俊张晓娟
- 关键词：利福平耐药基因结核分支杆菌基因突变
- DNA探针杂交技术与涂片镜检法检测结核杆菌对比分析被引量：3
- 2008年
- 目的:评价DNA探针杂交技术检测TB的临床应用价值。方法:应用DNA探针杂交法和涂片镜检法检测330份痰液标本。结果:检测治疗前、后结核病患者标本,DNA探针杂交法阳性检出率分别为56.7%、24.2%,明显高于涂片法检出率(P<0.01);两种方法检测90份非结核病患者痰液标本符合率均为100%。结论:DNA探针杂交技术适用于结核病诊断、药物疗效判断等方面。
- 张晓娟
- 关键词：DNA探针原位杂交
- DNA探针杂交检测结核分支杆菌的研究被引量：4
- 2005年
- 张晓娟董亚俊张小刚何秀云陈红兵
- 关键词：结核分支杆菌DNA探针杂交检测生物素标记PCR产物显色反应
- 应用PCR-反向斑点杂交快速鉴定分枝杆菌菌种被引量：6
- 2010年
- 目的:应用聚合酶链反应-反向斑点杂交法(PCR-RDBHA)快速鉴定分枝杆菌至种的水平。方法:以分枝杆菌rpoβ基因编码序列为靶基因,应用PCR-RDBHA检测126株分枝杆菌临床分离株。以PCR-DNA测序为对照,对经PCR-RDBHA鉴定为非结核分枝杆菌(NTM)的临床分离株进行PCR-DNA测序。结果:126株临床分离株中,经鉴定115株(91.3%)为结核分枝杆菌复合群(MTC),11株(8.7%)为NTM。NTM中,4株胞内分枝杆菌,1株堪萨斯分枝杆菌,1株戈登分枝杆菌,2株瘰疬分枝杆菌,3株脓肿分枝杆菌。11株NTMPCR-RDBHA与PCR-DNA测序结果一致。结论:PCR-RDBHA能鉴定分枝杆菌临床分离株至种的水平,方法简便、快速,结果准确,具有良好的临床应用价值。
- 张晓娟
- 关键词：分枝杆菌菌种鉴定聚合酶链反应反向斑点杂交
- 结核分支杆菌耐利福平耐药基因检测研究被引量：2
- 2004年
- 目的 评价应用DNA序列分析方法和聚合酶链反应 -单链构象多态性 (PCR -SSCP)技术检测rPOB基因突变在结核分支杆菌耐利福平 (RFP)耐药性测定中的应用价值。方法 采用DNA序列分析法和PCR -SSCP法对 80株结核分支杆菌临床分离株 (其中药物敏感株 32株 ,耐RFP或含耐RFP耐多药株 4 8株 )rpoB基因核心区域的突变情况进行检测。 结果 以结核分支杆菌H37RV为对照 ,所有 32株药物敏感株的rPOB基因均无突变。用DNA序列分析方法检测 4 8株耐药株中 4 4株发生突变 ,敏感性为 91.7% (44 /48) ,其中最常见的突变位点是 5 31位丝氨酸和 5 2 6位组氨酸。PCR -SSCP检测 4 8株耐RFP分离株中 ,4 5株rPOB基因SSCP图谱异常 ,其敏感性为 93.1% (45 /48)。结论 DNA序列分析可指导临床用药 ,PCR -SSCP可快速检测结核分支杆菌RFP耐药性。
- 张晓娟张小刚董亚俊何秀云吕树峰陈小冬
- 关键词：DNA序列分析结核分支杆菌
- 结核分支杆菌rpoB基因突变与耐利福平的临床应用被引量：1
- 2006年
- 目的:研究结核分支杆菌耐利福平(RFP)分离株rpoB基因突变情况并评价其应用价值。方法:采用聚合酶链反应—单链构象多态性(PCR-SSCP)方法对355株结核分支杆菌临床分离株(其中敏感株109株,耐RFP或含耐RFP株246株)rpoB基因进行检测,并对其中17株耐药株用双氧末端终止法进行测序分析。结果:以结核分支杆菌H37RV为对照,109株药物敏感株的rpoB基因均无突变,特异性100%;246株耐药株中,225株rpoB基因SSCP图谱异常,其敏感性91.5%。17株耐药株(其中SSCP异常11株,正常6株)PCR扩增产物经测序证实,11株在531位密码子TCG-TTG,4株在526位密码子CAC-TAC,1株在516位密码子GAC-GTC,1株未改变。结论:rpoB基因突变是耐RFP结核分支杆菌耐药性的主要分子机制;其最常见的突变位点是531位色氨酸和526位组氨酸,应用PCR-SSCP技术可快速检测结核分支杆菌对RFP的耐药性。
- 董亚俊张晓娟
- 关键词：分支杆菌结核RPOB基因DNA序列分析
- 结核分支杆菌耐药分子机制的检测技术的研究被引量：3
- 2003年
- 目的 :探讨结核分支杆菌对异烟肼、利福平耐药的分子机制 ,建立快速检测耐药分支杆菌基因型的分子生物学方法。方法 :采用聚合酶链反应 -单链构象多态性 (PCR -SSCP)同时检测结核分支杆菌敏感株和耐异烟肼、利福平耐药株的KatG基因、rpoB基因突变。结果 :78株结核分支杆菌临床分离株均未发现KatG、rpoB基因缺失。以结核分支杆菌H37RV为对照 ,3 6株药物敏感株的KatG、rpoB基因SSCP图谱均正常。 42株同时耐异烟肼和利福平的多耐药株中 ,KatG和rpoB基因突变率分别为 66.7% (2 8/4 2 ) ,90 .5 % (3 8/4 2 )。结论 :结核分支杆菌耐异烟肼、利福平耐药性的产生是由于KatG基因和rpoB基因突变所致。应用PCR -SSCP技术可同时快速检测结核分支杆菌异烟肼。
- 张小刚何秀云陈红兵王仲元张晓娟李书琳
- 结核分支杆菌利福平和链霉素耐药基因的快速检测被引量：2
- 2002年
- 目的 :评估采用聚合酶链反应 -单链构象多态性 (PCR SSCP)同时检测rpsL基因、rpoB基因突变在结核分支杆菌耐链霉素 (SM )和利福平 (RFP)耐药性测定中的应用价值。方法 :采用PCR SSCP技术对 86株结核分支杆菌临床分离株rpsL基因、rpoB基因突变同时进行检测。即首先用PCR方法同时扩增RFP、SM的rpoB基因和rp sL基因 ,然后进行SSCP分析。结果 :以结核分支杆菌H3 7RV为对照 ,41株药物敏感株的rpsL基因、rpoB基因均未见SSCP图谱异常。特异性为 10 0 %。 45株同时耐链霉素和利福平的耐药株中 ,3 4株 (75 6% )有rpsL基因图谱异常 ;41株 (90 1% )有rpoB基因图谱异常。结论 :rpoB基因突变和rpsL基因突变与结核分支杆菌耐利福平和链霉素密切相关 ,应用PCR SSCP技术可同时快速检测结核分支杆菌对链霉素和利福平耐药性。
- 张小刚何秀云陈红兵李书琳张永胜张晓娟
- 关键词：结核分支杆菌链霉素聚合酶链反应-单链构象多态性药物耐受性RPSL基因
- 耐多药结核分支杆菌耐药分子机制的研究被引量：2
- 2004年
- 目的 研究耐多药结核病 (MDR TB)临床分离株rPOB、KatG和rpsL基因突变在耐药性检测中的应用价值及鉴定是否含有质粒。方法 采用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)技术分析了 4 6株同时耐异烟肼 (INH)、利福平 (RFP)、链霉素 (SM)的多耐药临床分离株和 6 2株药物敏感株的rPOB、KatG、rpsL基因突变。同时对 78株结核分支杆菌临床分离株按碱性溶菌法抽提分离并鉴定是否含有质粒。结果 以结核分支杆菌H37RV为对照 ,6 2株药物敏感株的rPOB、rpsL基因SSCP图谱正常 ,其特异性为 10 0 %。KatG基因有 2株图谱异常 ,特异性为 96 8%。rPOB、KatG、rpsL基因突变率分别为 91 3%、6 0 9%、71 7%。结核分支杆菌 30株药物敏感株和 37株同时INH、RFP、SM的多耐药临床分离株均未提取分离与鉴定含有质粒。结论 结核分支杆菌耐RFP、INH、SM耐药性的产生主要是由于rPOB、KatG和rpsL基因突变所致。未发现结核分支杆菌含有质粒及由质粒介导的耐药机制。
- 张晓娟董亚俊张小刚何秀云陈红兵
- 关键词：结核分支杆菌耐药RPSL基因INHRFP质粒介导
- 结核分枝杆菌CFP10和ESAT6优势肽段融合蛋白的表达及其免疫学研究被引量：1
- 2010年
- 目的:构建结核分枝杆菌分泌蛋白的重组质粒及工程菌,获得纯化的CFP10-ESAT6P蛋白抗原,制备初步用于检测结核病患者的特异性抗体。方法:根据编码结核分枝杆菌基因序列设计引物,克隆表达结核CFP10-ESAT6重组蛋白,表达产物免疫新西兰大白兔,其中80%可产生高价的抗体。利用产物建立IgG间接ELISA方法鉴定其抗原性及实用性。结果:应用ELISA法,通过检测113例结核病患者、82例非结核病患者及健康献血员,CFP10-ESAT6P和对照PPD对结核病患者血清检测的敏感性分别为89.4%和79.6%,特异性分别为96.3%和93.9%。结论:高效表达纯化的CFP10-ESAT6蛋白抗原性强,可用于结核病患者抗体的检测,用于结核病的辅助诊断。
- 张晓娟刘爱忠于庭张岩峰包洪
- 关键词：结核分枝杆菌CFP10ESAT6抗体
