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中国大陆H9N2亚型禽流感病毒HA基因遗传分析及抗原相关性研究被引量：6: 2010年; 为研究我国大陆H9N2亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的分子进化及抗原相关性,本研究对来自15个省、市、自治区的34株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因进行了测序及系统发育分析,并采用交叉血凝抑制试验及交叉攻毒保护试验对不同遗传分支下毒株间抗原相关性进行了分析.结果表明,所有34个毒株HA基因均符合低致病性禽流感病毒的特征,但毒株间变异程度增加.系统发育分析表明,我国大陆H9N2亚型禽流感病毒主要分为三个系列,各系列内毒株没有明显的地区及时间特征.抗原相关性研究表明,不同遗传系列下的毒株其抗原相关性明显低于同一系列内部毒株间的抗原相关性,说明我国H9N2亚型禽流感病毒抗原性差异较大.此外,本研究同时筛选得到了用于制备多价苗的代表毒株.; 岳华汤承杨发龙李明义吴海燕宫晓; 关键词：H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因

应用聚合酶链式反应检测细胞培养物和细胞培养用小牛血清支原体污染被引量：2: 2005年; 支原体污染是细胞培养中普遍存在的突出问题,直接影响细胞培养的成败以及以细胞培养为基础的科学实验结果的准确性。本试验用聚合酶链式反应(套式PCR)对实验室中生长不良的3种细胞系、11种细胞培养用小牛血清进行了检测。结果显示,3种细胞系的第一次PCR扩增结果为全部为阳性,检出率为100%;11种细胞培养用小牛血清第一次PCR扩增后8种样品为阳性,对第一次PCR扩增为阴性的血清样品进行第二次PCR扩增结果全部为阳性,检出率100%。传统的支原体检测繁琐、费时、周期长而受到限制,本试验使用的套式PCR法为细胞培养工作中检测支原体污染提供了一种敏感、快速、特异的方法。; 郭玉广南文龙张春艳宫晓李金积张文学李明义范根成杜元钊; 关键词：聚合酶链式反应牛血清细胞培养物 PCR扩增血清样品

禽流感病毒HB株HA全基因克隆与序列分析: 为进一步分析禽流感病毒H9N2 HB分离株血凝素(HA)基因的特性,本研究参照已发表H9亚型禽流感HA基因序列设计了1对引物,采用RT-PCR技术,以禽流感病毒H9N2 HB分离株RNA为模板,扩增了HA全基因并进行同源...; 李明义范根成刘新文宫晓郭玉广; 关键词：禽流感病毒 H9N2亚型 HA基因; 文献传递

猪瘟灭活疫苗抗体消长规律动态研究被引量：29: 2005年; 本试验采用IHA试验方法,对经猪瘟灭活疫苗免疫的猪抗体产生的水平进行了监测,并对仔猪母源抗体的消长规律进行了研究。结果表明仔猪母源抗体水平与母猪抗体水平呈正相关,其首次免疫抗体增长幅度与母源抗体呈负相关,但其抗体水平与免疫次数呈正相关。主要免疫的抗体效价与免疫剂量呈正相关,而与首免日龄无关。攻毒结果表明:当IHA<6 log2时,仅能抗死亡;当IHA≥7 log2时,可抗感染。; 李明义白志娟王莉娟赵雪丽朱岩丽邹丽红宫晓刘志军张春艳郭玉广范根成杜元钊; 关键词：免疫抗体消长规律母源抗体正向间接血凝试验

禽流感病毒A/Ostrich/Denmark/72420/96(LPAI-H_5N_2)株HA全基因克隆与序列分析: 2006年; 为进一步分析禽流感病毒(AIV)H5N2分离株血凝素(HA)基因的特性,参照已发表H5亚型禽流感HA基因序列设计了1对引物,采用RT-PCR技术,以禽流感病毒A/Ostrich/Denmark/72420/96(D96)RNA为模板,扩增了HA全基因并进行核苷酸同源性比较,氨基酸编码分析,绘制系统发育进化树。结果表明,扩增片段长1737个核苷酸,包含了完整的HA基因的开放阅读框架,与Genbank已发表的H5N1和H5N2分离株的HA基因序列比较,发现与国内H5N1分离株同源性较低,只有80%左右,而与H5N2各株序列具有很高的同源性,最高达97.5%,印证了AIV基因组8个片段间频繁的重组及AIV高变异性的特点。推导的氨基酸序列分析表明,HA蛋白裂解位点上游丢失了4个连续碱性氨基酸(R-R-R-K),裂解位点处氨基酸序列为E-T-R,仅包含一个碱性氨基酸(R-)残基,符合低致病性毒株的特征,证明为低致病性毒株。其HA推导后氨基酸序列与H5N1AIV的同源性接近90%,以其研究的疫苗,可以有效抵御我国流行的H5亚型AIV病毒的感染,同时因为是弱毒株,以其研制的疫苗具有更好的安全性,也更符合公共卫生学的要求。; 李明义于树涛刘新文宫晓郭玉广隋国宁; 关键词：禽流感病毒 H5N2亚型 HA基因

猪瘟抗体消长规律动态研究被引量：24: 2004年; 采用IHA实验方法监测猪瘟灭活疫苗免疫的猪抗体产生水平 ,并对仔猪母源抗体的消长规律进行了研究。结果表明仔猪母源抗体水平与母猪抗体水平呈正相关 ,其首次免疫抗体增长幅度与母源抗体呈负相关 ,但其抗体水平与免疫次数呈正相关。主动免疫的抗体效价与免疫剂量呈正相关。; 李明义白志娟赵雪丽朱岩丽邹丽红宫晓刘志军张春艳郭玉广范根成杜元钊; 关键词：猪瘟抗体监测主动免疫

禽流感H_5亚型油乳剂灭活疫苗抗体消长规律的研究被引量：15: 2004年; 用禽流感H5N2 亚型毒株接种 10日龄SPF鸡胚 ,收获尿囊液 ,经甲醛灭活后与优质矿物油佐剂混合乳化制成油乳剂灭活疫苗。抽取其中三批 ,接种 2 8日龄非免疫鸡 10 0羽 ,4天后检测抗体 ,以后每隔 1周或 2周采血检测H5亚型HI抗体 ,并于抗体水平为 2log2、4log2、6log2左右时攻毒。结果表明 ,免疫后 4天即能检测出抗体 ,之后逐渐上升 ,至第 5周抗体水平达到高峰且较稳定 ,然后缓慢下降 ,110天后抗体降至临界值以下。攻毒结果表明 ,能使鸡抵抗强毒攻击的抗体临界值为 6log2。; 李明义白志娟宫晓王莉娟赵雪丽朱岩丽刘志军张春艳郭玉广范根成杜元钊; 关键词：禽流感灭活疫苗抗体

鸡肾型传染性支气管炎病毒SF分离株的鉴定被引量：1: 2008年; 对分离的疑似肾型鸡传染性支气管炎病毒（IBV）作了进一步的鉴定。鸡胚盲传至第5代时开始出现死亡和侏儒胚,胚体肾脏肿大有尿酸盐沉积;电镜观察可见80-120 nm的病毒粒子;分离病毒在鸡胚上可干扰新城疫病毒Lasota株的增殖,本身也能被AEV病毒所干扰;SF5株分离毒与部分标准IBV毒株的血清进行中和试验,结果显示与Ark99株有部分交叉保护;经过一系列实验,确定了所分离病毒为肾型IBV,定名为SF株。; 朱岩丽李明义宫晓; 关键词：IBV

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宫晓