郭玉广
- 作品数：13 被引量：105H指数：5
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪瘟灭活疫苗抗体消长规律动态研究被引量：29
- 2005年
- 本试验采用IHA试验方法,对经猪瘟灭活疫苗免疫的猪抗体产生的水平进行了监测,并对仔猪母源抗体的消长规律进行了研究。结果表明仔猪母源抗体水平与母猪抗体水平呈正相关,其首次免疫抗体增长幅度与母源抗体呈负相关,但其抗体水平与免疫次数呈正相关。主要免疫的抗体效价与免疫剂量呈正相关,而与首免日龄无关。攻毒结果表明:当IHA<6 log2时,仅能抗死亡;当IHA≥7 log2时,可抗感染。
- 李明义白志娟王莉娟赵雪丽朱岩丽邹丽红宫晓刘志军张春艳郭玉广范根成杜元钊
- 关键词：免疫抗体消长规律母源抗体正向间接血凝试验
- 华东地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌的流行病学
- 本文对华东地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌进行了流行病学研究,并对调查结果进行了讨论,为制定防制措施提供了依据.
- 陈祥高崧王雷施慧郭玉广张如宽焦新安刘秀梵
- 关键词：流行病学PCR
- 文献传递
- 鸡传染性鼻炎的诊断与防治
- 2010年
- 鸡传染性鼻炎是由嗜血杆菌引起的急性传染病。主要发生于青年鸡、产蛋鸡和肉用种鸡．该病的潜伏期为1-3天，发病率高，传播速度快，但死亡率不高，如并发其他疫病时，死亡率增高。
- 庞建庆郭焕金郭玉广
- 关键词：鸡传染性鼻炎急性传染病嗜血杆菌肉用种鸡死亡率
- 应用聚合酶链式反应检测细胞培养物和细胞培养用小牛血清支原体污染被引量：2
- 2005年
- 支原体污染是细胞培养中普遍存在的突出问题,直接影响细胞培养的成败以及以细胞培养为基础的科学实验结果的准确性。本试验用聚合酶链式反应(套式PCR)对实验室中生长不良的3种细胞系、11种细胞培养用小牛血清进行了检测。结果显示,3种细胞系的第一次PCR扩增结果为全部为阳性,检出率为100%;11种细胞培养用小牛血清第一次PCR扩增后8种样品为阳性,对第一次PCR扩增为阴性的血清样品进行第二次PCR扩增结果全部为阳性,检出率100%。传统的支原体检测繁琐、费时、周期长而受到限制,本试验使用的套式PCR法为细胞培养工作中检测支原体污染提供了一种敏感、快速、特异的方法。
- 郭玉广南文龙张春艳宫晓李金积张文学李明义范根成杜元钊
- 关键词：聚合酶链式反应牛血清细胞培养物PCR扩增血清样品
- 致断奶仔猪腹泻、水肿病大肠杆菌F18菌毛a因子单克隆抗体的研制及其初步应用被引量：8
- 2004年
- 以表达 F18ac菌毛参考菌株 2 134(O15 7∶ H19)为研究对象 ,摸索出了 F18ac菌毛表达的最佳条件 ,采用热洗脱法获得了较纯的 F18ac菌毛 ,并以之免疫小鼠 ,利用淋巴细胞杂交瘤技术 ,用直接玻板凝集法筛选出 1株杂交瘤细胞株 19B4 ,能稳定分泌针对 F18ac菌毛和 F18ab菌毛共同抗原表位 a因子的单克隆抗体。细胞培养上清对 F18ac菌毛参考菌株 2 134和 F18ab菌毛参考菌株 10 7/ 86的直接凝集价均可达 1∶ 8,腹水单抗直接凝集效价可达 1∶ 10 2 4 ,而与猪源产 F4、F5、F6和 F4 1粘附素大肠杆菌菌株、鸡源产 型菌毛大肠杆菌菌株及沙门氏菌不发生凝集反应。免疫印迹试验结果显示 ,腹水单抗可同时特异识别 F18ac菌毛 170 0 0和 F18ab菌毛 15 0 0 0左右的主要亚单位多肽。应用所研制的单抗对 2 15株断奶仔猪腹泻大肠杆菌分离株进行了检测 ,结果上述分离株 TSB培养物的 F18菌毛的检出率为13.4 % ,TSA培养物的检出率为 8.4 %。F18菌毛阳性分离株的 O血清型除了常见血清型 O139、O14 1外 ,还有非常见血清型 O10 7、O131和 O9等。TSB培养物的 F18菌毛检出率明显高于 TSA培养物的检出率 ,表明 F18菌毛在 TSB培养基中比在 TSA培养基上更容易表达 ,TSB培养基是适合 F18菌毛检测。
- 郭玉广高崧刘秀梵
- 关键词：断奶仔猪腹泻水肿病大肠杆菌F18菌毛单克隆抗体
- 禽流感病毒HB株HA全基因克隆与序列分析
- 为进一步分析禽流感病毒H9N2 HB分离株血凝素(HA)基因的特性,本研究参照已发表H9亚型禽流感HA基因序列设计了1对引物,采用RT-PCR技术,以禽流感病毒H9N2 HB分离株RNA为模板,扩增了HA全基因并进行同源...
- 李明义范根成刘新文宫晓郭玉广
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型HA基因
- 文献传递
- 布鲁氏菌环介导等温扩增(LAMP)可视化检测方法的建立被引量：26
- 2011年
- 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了布鲁氏菌可视化快速检测方法。针对布鲁氏菌外膜蛋白OMP25基因保守区设计6条特异引物,反应前加入染料羟基萘芬蓝(HNB)作为LAMP扩增的指示剂,63℃恒温反应60min,根据HNB的颜色变化进行结果判定。分别评价所建立LAMP方法的特异性和灵敏性,并对60份牛布鲁氏菌病虎红平板凝集试验(RBT)阳性血清样本,经LAMP和B4/B5-PCR方法进行平行检测。结果显示,本方法最低检出限约为17fg布鲁氏菌基因组DNA。本方法特异性良好,布鲁氏菌反应管均出现特异性LAMP扩增反应,而猪大肠杆菌K99、巴氏杆菌C48-1、猪链球菌ST171、绿脓杆菌等对照组均未出现扩增。针对60份RBT阳性血清的平行检测结果显示,LAMP和B4/B5-PCR这两种方法间的结果符合率为85.0%。B4/B5-PCR检测为阳性的43份样品,经本方法检测全部为阳性;B4/B5-PCR检测为阴性的17份样品,经本方法检测,9份为阳性,8份为阴性。LAMP的敏感性高于B4/B5-PCR方法。实验表明,本文所建立的基于颜色判定的布鲁氏菌LAMP检测方法具有特异、灵敏、设备要求简单等特点,适用于基层兽医部门进行布鲁氏菌的快速检测。
- 许邹亮南文龙周洁陆明哲郭玉广谭鹏飞毛开荣彭大新陈义平
- 关键词：布鲁氏菌
- 猪瘟兔化组织灭活疫苗的研制被引量：2
- 2004年
- 李明义宫晓白志娟郭玉广刘志军赵雪丽朱岩丽
- 关键词：猪瘟猪瘟病毒安全性试验免疫效力试验保存期试验
- 禽流感病毒HB株HA全基因克隆与序列分析
- 为进一步分析禽流感病毒H9N2HB分离株血凝素(HA)基因的特性,参照已发表H9亚型禽流感HA基因序列设计了1对引物,采用RT-PCR技术,以禽流感病毒H9N2 HB分离株RNA为模板,扩增了HA全基因并进行同源性比较,...
- 李明义范根成刘新文宫晓郭玉广
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型HA基因
- 禽流感病毒A/Ostrich/Denmark/72420/96(LPAI-H_5N_2)株HA全基因克隆与序列分析
- 2006年
- 为进一步分析禽流感病毒(AIV)H5N2分离株血凝素(HA)基因的特性,参照已发表H5亚型禽流感HA基因序列设计了1对引物,采用RT-PCR技术,以禽流感病毒A/Ostrich/Denmark/72420/96(D96)RNA为模板,扩增了HA全基因并进行核苷酸同源性比较,氨基酸编码分析,绘制系统发育进化树。结果表明,扩增片段长1737个核苷酸,包含了完整的HA基因的开放阅读框架,与Genbank已发表的H5N1和H5N2分离株的HA基因序列比较,发现与国内H5N1分离株同源性较低,只有80%左右,而与H5N2各株序列具有很高的同源性,最高达97.5%,印证了AIV基因组8个片段间频繁的重组及AIV高变异性的特点。推导的氨基酸序列分析表明,HA蛋白裂解位点上游丢失了4个连续碱性氨基酸(R-R-R-K),裂解位点处氨基酸序列为E-T-R,仅包含一个碱性氨基酸(R-)残基,符合低致病性毒株的特征,证明为低致病性毒株。其HA推导后氨基酸序列与H5N1AIV的同源性接近90%,以其研究的疫苗,可以有效抵御我国流行的H5亚型AIV病毒的感染,同时因为是弱毒株,以其研制的疫苗具有更好的安全性,也更符合公共卫生学的要求。
- 李明义于树涛刘新文宫晓郭玉广隋国宁
- 关键词：禽流感病毒H5N2亚型HA基因
