宋振华
- 作品数:6 被引量:13H指数:2
- 供职机构:北京大学第三医院更多>>
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- Periostin干扰质粒对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成的影响1
- 目的检测periostin在人过度增生性瘢痕成纤维细胞中的表达及其对瘢痕疙瘩成纤维细胞功能的影响,探讨periostin在过度增生性瘢痕形成中的作用。方法组织块培养法培养瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFb)、增生性瘢痕成纤维细胞...
- 秦泽莲宋振华陈力扬黄似建
- 关键词:瘢痕疙瘩成纤维细胞PERIOSTIN胶原蛋白干扰质粒
- 文献传递
- 一种用于抑制过度增生性瘢痕成纤维细胞增殖的药物
- 本发明公开了一种用于抑制过度增生性瘢痕成纤维细胞增殖的药物。该药物活性成分为抑制氨基酸序列如GenBank No.NM_006475所示的蛋白的编码基因表达的核酸。实验证明,本发明的抑制过度增生性瘢痕成纤维细胞增殖的药物...
- 秦泽莲宋振华
- 文献传递
- periostin在人瘢痕成纤维细胞中的表达及氢化可的松对其表达的影响被引量:9
- 2008年
- 目的:通过检测periostin在人过度增生性瘢痕成纤维细胞中的表达及其对氢化可的松作用的反应,探讨periostin在瘢痕形成中的作用。方法:采用组织块培养法体外培养原代成纤维细胞,以RT-PCR及免疫细胞化学技术分别检测24例人瘢痕和正常皮肤成纤维细胞中periostin的mRNA和蛋白的表达,氢化可的松(0.1 g/L)的作用时间为96 h。结果:periostin的mRNA在瘢痕疙瘩成纤维细胞(1.645±0.549)和增生性瘢痕成纤维细胞(1.084±0.396)中的表达均高于正常皮肤成纤维细胞(0.274±0.215;P<0.05),两者分别增加83%和75%。氢化可的松作用后,瘢痕疙瘩成纤维细胞中和增生性瘢痕成纤维细胞中periostin的mRNA表达量分别减少32%和47%,两者与氢化可的松作用前相比差异均有统计学意义。Periostin蛋白主要分布在成纤维细胞核周围的胞浆中,它在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的成纤维细胞中的表达(分别为91.815±0.961和70.166±2.250)高于在正常皮肤成纤维细胞中的表达(41.011±1.576,P<0.01),两者分别增加55%和42%。结论:periostin在过度增生性瘢痕成纤维细胞中的表达增高,氢化可的松可能抑制其基因的表达;periostin可能影响过度增生性瘢痕成纤维细胞的功能,它可能是一种瘢痕相关基因。
- 宋振华秦泽莲
- 关键词:成纤维细胞瘢痕疙瘩
- 一种用于抑制过度增生性瘢痕成纤维细胞增殖的药物
- 本发明公开了一种用于抑制过度增生性瘢痕成纤维细胞增殖的药物。该药物活性成分为抑制氨基酸序列如GenBank No.NM 006475所示的蛋白的编码基因表达的核酸。实验证明,本发明的抑制过度增生性瘢痕成纤维细胞增殖的药物...
- 秦泽莲宋振华
- 文献传递
- periostin在人瘢痕成纤维细胞中的表达及其对瘢痕疙瘩成纤维细胞功能的影响
- 目的:检测periostin在人过度增生性瘢痕成纤维细胞中的表达及其对瘢痕疙瘩成纤维细胞功能的影响,探讨periostin在过度增生性瘢痕形成中的作用。结论:干扰periostin表达影响KFb功能向SFb转变,peri...
- 秦泽莲宋振华陈力扬黄似建
- 关键词:增生性瘢痕成纤维细胞细胞功能
- 文献传递
- 人periostin干扰载体的构建及其对成纤维细胞目的基因表达的影响被引量:6
- 2010年
- 目的:为了研究人成骨细胞特异因子-2(periostin,POSTN)基因对瘢痕疙瘩成纤维细胞功能的影响,构建shRNA质粒和慢病毒载体,观察其对293T细胞和瘢痕疙瘩成纤维细胞的POSNT基因表达的抑制作用,检测shRNA慢病毒载体对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响。方法:设计特异性干扰人POSTN基因的小发卡RNA序列,合成含有干扰序列的双链DNAoligo,与经双酶切后的质粒连接,转化感受态大肠杆菌DH5α并对阳性克隆进行PCR扩增测序鉴定。将构建的质粒采用脂质体共转染入293T细胞,36~48h后采用Westernblot的方法检测目的蛋白的表达情况,进而判断不同靶点的干扰效果。将干扰效果最好的序列包装shRNA质粒和慢病毒载体,利用生成的POSTNshRNA质粒和慢病毒分别感染293T细胞和原代瘢痕疙瘩成纤维细胞,检测两种细胞目的基因、蛋白的表达,进而观察基因干扰后瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖变化。结果:转染干扰质粒原代瘢痕疙瘩成纤维细胞、感染空质粒阴性对照细胞和正常皮肤成纤维细胞的POSTNmRNA表达分别为1.98±0.03、1.12±0.03和1.08±0.03,实验组对比阴性对照组细胞的敲减率为43%(F=688.291,P<0.001)。感染干扰慢病毒原代瘢痕疙瘩成纤维细胞、感染空病毒阴性对照细胞和正常皮肤成纤维细胞的POSTNmRNA表达分别为0.44±0.09、0.81±0.07和0.37±0.05,实验组对比阴性对照组细胞的敲减率为46%(F=90.06,P<0.001)。实验组POSTN蛋白表达水平(0.29±0.04)比阴性对照组细胞(0.53±0.09)的表达降低45%(F=33.43,P<0.001),正常皮肤成纤维细胞POSTN蛋白的表达水平为0.23±0.02。感染干扰质粒和慢病毒的原代瘢痕疙瘩成纤维细胞与空质粒转染的对照细胞相比,POSTN蛋白和mRNA的表达水平亦明显降低,并趋近正常皮肤成纤维细胞的表达。从感染慢病毒48h开始,干扰组瘢痕疙瘩成纤维细胞与空质粒转染的对照组细胞相比增殖明显减慢,抑制率达19%。�
- 刘畅宋振华秦泽莲
- 关键词:PERIOSTIN成纤维细胞RNA干扰瘢痕疙瘩慢病毒属