龚璞
- 作品数：24 被引量：107H指数：4
- 供职机构：浙江省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省重大科技专项基金更多>>
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- 创伤弧菌脉冲场凝胶电泳分子分型方法的验证与应用
- ：建立与验证创伤弧菌脉冲场凝胶电泳(Pulsed-field gelelectrophoresis,PFGE)分子分型方法. 方法：以分子分型监测网络PulseNet中霍乱弧菌的PFGE标准方法为基础,选用限制性内...
- 潘军航陈建才张俊彦龚璞占利梅玲玲
- 关键词：创伤弧菌脉冲场凝胶电泳分子分型
- 香港海鸥型菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测技术研究
- 目的 利用TaqMan-MGB探针的实时荧光定量PCR方法,建立一种简便、快速,特异,灵敏的香港海鸥型菌检测方法.方法 根据香港海鸥型菌16S rDNA的保守区域设计特异性引物和探针.用不同浓度、不同温度对反应体系引物量...
- 梅玲玲张俊彦龚璞潘军航占利张云怡杨勇
- 关键词：TAQMAN-MGB探针实时荧光PCR
- 两种方法同步检测禽样品沙门菌结果分析被引量：2
- 2011年
- 目的:应用LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification)快诊技术及国标(GB)传统分离方法对杭州市不同来源75份新鲜禽(鸡)样品进行沙门菌检测,并对结果进行分析。方法:在应用GB法对禽样品进行传统分离、生化及血清学鉴定的同时,利用LAMP快诊技术同步检测沙门菌属invA基因及O9群抗原因子基因,并对两种方法检出率及效率进行比较。结果:GB法检出3份阳性,阳性率4.00%;LAMP快诊检测阳性结果因不同增菌液其检测结果不同,检测阳性率最高达17.33%。结论:禽样品可能受沙门菌污染量较低,以致GB法检出率相对较低,但LAMP技术的检测敏感性明显偏高,两种方法同步应用能全面、合理、科学地反映食品中目标菌的污染程度,建议基层实验人员尝试使用。
- 朱水荣潘军航朱敏张俊彦龚璞梅玲玲
- 关键词：环介导等温扩增技术沙门菌
- Taq Man-MGB探针实时荧光PCR快速检测副溶血性弧菌的方法研究被引量：3
- 2013年
- 副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)为广泛分布于沿海地区的革兰氏阴性嗜盐菌,属弧菌科(Vibrio)弧菌属,是食源性疾病的重要致病菌之一.尤其在夏秋季节,经常由于食用带有大量副溶血性弧菌的海产品或被此菌污染的食品,引起暴发性食物中毒[1],在细菌性食物中毒中比例高、危害大.患者可出现腹泻、肠痉挛、恶心、呕吐和发烧等典型胃肠炎反应.因此在饮用水、食品检测和食物中毒源调查、传染病源调查工作中,常需要对副溶血性弧菌进行检测.传统的检测法需要增菌培养、分纯、镜检和生化试验等步骤;该法的阳性检出周期至少要72 h,操作烦琐,且容易出现假阴性[2].因为在营养不足或应激的情况下,副溶血性弧菌很容易进入不可培养状态.本试验旨在建立一套利用Taq Man-MGB探针实时荧光PCR快速检测副溶血性弧菌的方法,为临床和环境检测副溶血性弧菌提供方法,现将结果报道如下.
- 龚璞梅玲玲
- 关键词：副溶血性弧菌实时荧光MAN
- 检测沙门氏菌的实时荧光PCR试剂盒及检测方法
- 本发明提供了一种检测沙门氏菌(Salmonella)的实时荧光PCR试剂盒及其检测方法。所述试剂盒主要包括特异性引物和荧光探针、PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物和DNA聚合酶，所述特异性引物和荧光探针序列如下：上游引物...
- 程苏云梅玲玲朱敏龚璞
- 文献传递
- 一种香港海鸥型菌的实时荧光PCR检测试剂盒及应用
- 本发明公开了一种香港海鸥型菌的实时荧光PCR检测试剂盒及应用，所述试剂盒包括PCR扩增反应液、阳性对照和阴性对照，所述PCR扩增反应液包括特异性上游引物、特异性下游引物、荧光探针、PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物和DN...
- 梅玲玲张俊彦占利朱敏潘雪霞潘军航龚璞汪炜杨勇
- 文献传递
- 浙江省209株沙门菌PFGE指纹图谱研究
- 目的建立浙江省沙门菌PFGE指纹图谱资料库,为查明沙门菌食源性疾病污染源,确定各病例之间的病原学关系,及时处理大范围内呈散发特征的沙门菌事件提供科学依据。方法收集、提取全省历年来在各类食品和腹泻病人中分离的209株沙门菌...
- 梅玲玲罗芸叶菊莲朱敏张俊彦潘军航龚璞杨婷婷
- 文献传递
- 环介导恒温核酸扩增技术快速检测志贺菌研究被引量：4
- 2011年
- 目的:建立一种快速检测志贺菌的环介导恒温核酸扩增(LAMP)技术,为志贺菌食源性疾病监测、诊断提供技术支撑。方法:在对志贺菌基因序列进行分析、对比基础上,根据志贺菌ipaH基因序列保守区域设计6条特异性引物;通过对LAMP技术反应条件优化,实现对志贺菌的快速检测;用不同来源志贺菌及沙门菌、大肠杆菌、副溶血性弧菌、柠檬酸杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等菌株验证方法的敏感性和特异性。结果:当25μl反应体系中含1.6μmol/L内引物(FIP、BIP)、0.2μmol/L外引物(F3、B3)、0.2μmol/L环引物(LF、LB)、1 mmol/L dNTP、6 mmol/L Mg-SO4,0.8 mol/L甜菜碱、1×反应缓冲液、DNA模版,8 U Bst DNA聚合酶,扩增条件为60℃,60 min时,LAMP技术对志贺菌最低检测浓度为200 CFU/ml,经8 h增菌,最低检测浓度可达到20 CFU/ml。对32株不同来源的志贺菌检测结果,所有反应管内肉眼观察有混浊,为阳性,而13种139株其它非志贺菌株反应结果均呈透明为阴性。对50件食品检测结果与常规培养方法及实时荧光PCR方法相比无显著性差异(P>0.05,χ2=0.27)。结论:本研究建立的志贺菌LAMP检测方法具有特异性强、灵敏度高、方便快捷、成本低等特点,适合在基层、小型实验室以及无条件购买荧光定量PCR仪的病原微生物检验检测机构推广使用。
- 梅玲玲朱敏占利龚璞张俊彦
- 关键词：志贺菌IPAH基因
- 一种职业卫生监管方法及系统
- 本发明公开了一种职业卫生监管方法及系统。其中，该方法包括接收用人单位输入的用人单位档案，生成所述用人单位的唯一标识；生成所述用人单位的职业病危害因素检测方案；生成所述用人单位的职业病危害因素检测报告；生成所述用人单位的职...
- 周振张美辨曹艺耀高向景任鸿邹华楼晓明龚璞张念华张远志
- 浙江省209株沙门菌PFGE指纹图谱研究被引量：13
- 2009年
- 目的：建立浙江省沙门菌PFGE指纹图谱资料库,为查明沙门菌食源性疾病污染源,确定各病例之间的病原学关系,及时处理大范围内呈散发特征的沙门菌事件提供科学依据。方法：收集、提取全省历年来在各类食品和腹泻病人中分离的209株沙门菌的DNA,用限制性内切酶Xbal切割,脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术建立PFGE指纹图谱,用BioNu-merics V5.1软件UPGMA方法进行聚类分析。结果：209株沙门菌分成10个基因型别160种PFGE基因指纹图谱。其中67株德尔卑沙门菌可分为6个型别35种PFGE指纹图谱,主要集中在1个PFGE指纹图谱型别中。14株肠炎沙门菌分属3个型别8种PFGE指纹图谱,相似系数在0.800-1.000之间。鼠伤寒沙门菌间的PFGE指纹图谱差异较大。结论：PFGE指纹图谱与血清学型别无相关性,该方法在研究沙门菌分子流行病学、确定各病例之间的病原学关系效果良好。
- 梅玲玲罗芸叶菊莲朱敏张俊彦潘军航龚璞杨婷婷
- 关键词：沙门菌脉冲凝胶电泳
