韩骅
- 作品数：293 被引量：809H指数：12
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学经济管理更多>>
- PBL教学法在医学遗传学课程中的应用被引量：5
- 2013年
- 医学遗传学一门基础学科和临床学科的桥梁学科,课程中存在大量的可供讨论的病例。在医学遗传学教学中尝试应用PBL教学法,能有效激发学生学习的积极性,培养学生的自学能力和综合素质,从而提高了教学质量。
- 张萍曹秀丽刘向东魏亚宁冯蕾秦鸿雁韩骅
- 关键词：医学遗传学PBL教学教学方法
- 鼠抗hTNF-α单克隆抗体重链基因片段的克隆和cDNA序列测定被引量：1
- 1997年
- 采用反转录ＰＣＲ方法，以一对锚ＰＣＲ引物和一对针对鼠ＩｇＶＨ区基因的引物，从分泌鼠抗ｈＴＮＦ－α单克隆抗体的Ｅ６杂交瘤细胞株中，分别扩增和克隆了自５′非翻译区至Ｃγ１近３′端的重链基因片段和重链可变区基因片段，并测定了其核苷酸序列。计算机分析表明，系重排的鼠Ｉｇ重链基因。
- 邓健蓓韩骅苏成芝
- 关键词：HTNF-Α单克隆抗体核苷酸序列
- TAT蛋白转导结构域介导的BCR/ABL融合蛋白在小鼠体内的跨膜转运被引量：4
- 2002年
- 目的 探讨HIV 1反式激活蛋白 (TAT)的蛋白转导结构域 (PTD)介导的BCR ABL(TATPTD BCR ABL)融合蛋白在小鼠体内的跨膜转运和通过血脑屏障作用。方法 在大肠杆菌中表达PTD BCR ABL融合蛋白 ,经Ni NTA树脂亲合层析 ,纯化后的融合蛋白经小鼠尾静脉注射体内 ,用免疫组织化学方法对小鼠组织细胞内的PTD BCR ABL融合蛋白进行检测。结果 ①表达和纯化了分子量为 2 3× 10 3的PTD BCR ABL融合蛋白 ;②在接受融合蛋白的小鼠肝、脾、肾及心肌组织的细胞内检测到了PTD BCR ABL融合蛋白 ;③接受融合蛋白的小鼠脑组织细胞中可以检测到融合蛋白的存在。结论 PTD可在体内介导较大分子量的融合蛋白进入组织细胞和通过血脑屏障 。
- 梁英民蒋珊珊孙强刘利刘强陈任安李巧娥韩骅
- 关键词：蛋白转导组织细胞血脑屏障TAT蛋白跨膜转运
- HCV E1/E2-Fc融合基因真核载体的构建及表达产物的鉴定
- 2004年
- 目的 构建表达HCV包膜糖蛋白 E1+E2661及E2661与人IgG Fc融合蛋白的真核表达载体并在COS-7中表达E1+E2661及E2661与人IgG Fc的融合蛋白,为研究HCV包膜糖蛋白的功能及其与细胞表面受体相互作用奠定基础。方法 利用PCR 方法从HCV基因组序列中扩增出编码HCV包膜糖蛋白El+E2661及E2661的基因,再将两段基因片段亚克隆到含有人IgG Fc基因的Pblue-scriptⅡSK-hc γ1载体中,获取El+E2661及E2661与hc γ1的融合基因并插入真核表达载体pEF BOSneo,构建表达HCV E1+E2661及E2661与 hc γ1的融合蛋白的真核表达载体;用脂质体介导转染COS-7细胞;RT-PCR检测COS-7细胞内融合基因,直接免疫荧光、ELISA、Western blot检测COS-7细胞培养上清及细胞内融合蛋白的表达。结果DNA测序结果证实插入片段即是HCV E1+E2661及E2661与HC γ1的融合基因;直接免疫荧光、ELISA、Western blot均检测到融合蛋白的表达。结论 pEF BOSHCV E1+E2661/Fc pEF—BOSHCV E2661/Fc真核表达载体构建成功,并能够在COS-7细胞中表达分泌性有活性的融合蛋白。
- 杜德伟贾战生秦鸿雁刘秋平周永兴韩骅
- 关键词：HCV
- 引入文献专题课,提高分子遗传学教学质量被引量：8
- 2010年
- 依据自主和交互式学习原则,在分子遗传学教学中引入了文献专题课,极大地激发了学生的学习兴趣,培养了学生的批判性阅读能力,训练了学生的实证式科研思维能力,取得了良好的教学效果。
- 张萍叶晓龙冯蕾魏亚宁郑敏化梁亮韩骅
- 关键词：分子遗传学教学方法
- hJagged1^(ext)-Fc融合蛋白真核表达载体的构建和表达被引量：2
- 2004年
- 目的 :构建含人Jagged1胞外段 IgFc融合基因片段的质粒 ,并在真核细胞中表达。方法 :从人骨髓细胞中用RT PCR扩增hJagged1基因的胞外段。经DNA测序后 ,将hJagged1基因的胞外段插入改造过的质粒pBluescriptskⅡ中 ,获得hJagged1ext Fc融合基因。将融合基因插入真核表达载体pEF BOSneo ,构建真核表达载体pEF BOSneo hJagged1ext Fc。以其瞬时转染COS7细胞 ,应用RT PCR、细胞免疫荧光技术 ,及夹心ELISA检测融合蛋白的表达。结果 :hJagged1基因的胞外段被有效地扩增。DNA序列分析表明 ,所构建的含hJagged1ext Fc融合基因的质粒与设计相同 ,hJagged1ext Fc融合蛋白得到正确表达。结论 :成功地构建了hJagged1ext Fc融合基因的真核表达载体 ,并在真核细胞中正确表达 ,为进一步研究Jagged1在造血干 /祖细胞的体外扩增奠定了基础。
- 贾洪霞张萍周鹏李军锋韩骅梁英民
- 关键词：NOTCHJAGGED1融合蛋白
- 转染PF4 cDNA的GRC-1细胞培养液对于ECV-304细胞生长及VEGF表达的影响
- 2004年
- 目的 :构建真核表达载体pcDNA3 PF4 SS ,检测稳定转染后的GRC 1细胞的培养上清对于血管内皮细胞ECV30 4的生长以及转染细胞中血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。方法 :构建真核表达载体pcDNA3 PF4 SS ,并经BglⅡ/BamHI双酶切鉴定。通过脂质体介导 ,以该载体稳定转染GRC 1细胞 ,转染细胞中VEGF因子的表达情况用免疫组化染色法检测 ,转染细胞的培养上清对于ECV30 4细胞生长的影响用MTT法检测。结果 :经BglⅡ /BamHI双酶切证实 ,hPF4cDNA已成功地克隆到真核表达载体pcDNA3 CD34 SS中。RT PCR法检测证实 ,hPF4cDNA已成功地转染GRC 1细胞。免疫组化染色检测显示 ,转染PF4基因的GRC 1细胞的胞浆及胞膜均有VEGF表达 ,但较转染前明显减弱。细胞计数及MTT法显示 ,转染后GRC 1细胞的培养上清对ECV30 4细胞的生长具有抑制作用 ,吸光度值 (A)明显降低。结论 :构建了真核表达载体pcDNA3 PF4 SS ,并稳定转染GRC 1细胞。转染细胞的培养上清对ECV30 4细胞的生长及VEGF的表达 ,均具有明显的抑制作用 ,为探讨抗肿瘤生长机制和肿瘤疫苗的研制奠定了一定的基础。
- 常征刘凡韩骅孙强
- 关键词：血小板因子4
- 抗黑色素瘤单链抗体在大肠杆菌中的表达
- 1997年
- 单链抗体是用一段连接肽将抗体重、轻链可变区连接而成的抗体片段,大小为完整抗体的六分之一。具有分子小,免疫原性低,容易进入实体瘤周围微循环,有很强的肿瘤组织穿透力,血循环和全血廓清快,半衰期短,肾脏蓄积少,无Fc段不易与非靶细胞结合,肿瘤/正常组织分布率高,定位成像时本底低,易于基因操作和大量生产等诸多优点。
- 王字玲韩骅邓健蓓陈萍苏成芝
- 关键词：单链抗体抗黑色素瘤肠杆菌外壳蛋白基因抗体基因抗体片段
- 天然角蛋白自身反应性B细胞亚群及功能的分析被引量：2
- 2005年
- 目的:明确天然角蛋白反应性B细胞的亚群及解剖定位,初步分析其分泌天然抗角蛋白自身抗体(anti-keratinautoantibody,AKautoAb)的能力。方法:取SPF级C57BL/6小鼠的脾细胞和腹腔细胞,荧光抗体染色后用流式细胞仪分析角蛋白反应性B细胞亚群。将脾脏和腹腔淋巴细胞体外培养后,用ELISA分析AKautoAb的滴度,用ELISPOT法分析分泌AKautoAb的B细胞数。结果:腹腔中几乎所有结合角蛋白的B细胞均为B-1a细胞,脾脏中结合角蛋白的B细胞以边缘带B细胞为主。腹腔细胞中分泌AKautoAb的细胞数显著多于脾细胞,其培养上清中AKautoAb的滴度显著高于脾细胞。结论:角蛋白反应性B细胞存在于3个成熟B细胞亚群:B-1细胞、滤泡B细胞和边缘带B细胞,其中CD5+的B-1a细胞具有活跃的分泌AKautoAb的能力。
- 邢影李巍付萌韩骅王刚刘玉峰
- 关键词：天然自身抗体角蛋白
- 带有蛋白转导结构域的Bcr/Abl癌蛋白片段的表达及其跨膜转运被引量：10
- 2001年
- HIV 1编码的反式激活蛋白TAT具有将细胞外蛋白转导进入细胞的基序 ,称为蛋白转导结构域 (PTD) .为研究PTD介导的PTD Bcr Abl融合蛋白的跨膜转运 ,合成了编码PTD的基因片段 ,并与PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白bcr abl基因片段融合 .在大肠杆菌中表达纯化了融合蛋白 ,将纯化的融合蛋白加入培养的HL60细胞和C2C12细胞后 ,发现PTD基序可以介导Bcr Abl蛋白自由从细胞外跨膜转导进入细胞内 .研究结果可能为用外源蛋白负载 (loading)免疫活性细胞如抗原提呈细胞提供新的途径 .
- 梁英民孙强蒋姗姗陈萍王冀姝李荣周鹏王键黄红艳韩骅
- 关键词：蛋白转导结构域BCR/ABL慢性粒细胞白血病癌蛋白
