陆蕴松
- 作品数：7 被引量：19H指数：2
- 供职机构：吉林大学中日联谊医院更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家高技术研究发展计划吉林省科技厅科研基金更多>>
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- 重组HIF-1α真核表达质粒转染成骨细胞的条件优化
- 2009年
- 目的优化重组低氧诱导因子(HIF)-1α真核表达质粒转染成骨细胞的条件,为进一步检测重组HIF-1α真核表达质粒对成骨细胞功能的调控作用提供基础。方法将连有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的重组HIF-1α真核表达质粒转染进成骨细胞中,应用不同量的质粒和脂质体在转染24 h后在荧光显微镜下观察并计算转染效率。结果在24孔培养板中,转染24 h后10μg质粒和5μl脂质体的条件下转染效率最高。结论通过对转染条件的优化,可提高转染效率。
- 陆蕴松刘光耀高忠礼
- 关键词：成骨细胞
- 重组人HIF-1α真核表达质粒的构建和鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:构建重组人HIF-lα真核表达质粒,为进行人HIF-lα基因的克隆与表达做准备。方法:从人外周血细胞中提取总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法反转录合成cDNA。分别以含有绿色荧光蛋白(EGFP)片段的质粒PIREGFP质粒和反转录合成的cDNA为模板,加入所设计的3对引物[EGFP-linker、HIF-1α)上游(up)和下游(down)引物]所扩增目的基因片段分别与T载体连接后转化大肠杆菌DH5α,LB/Amp平板培养基筛选菌落,提取质粒。测序正确后经酶切先后克隆进入pVAX1载体。结果:通过聚合酶链反应(PCR)分别获得约870、1199和672bp的特异性DNA片段,分别与T载体连接后测序,测序结果与GenBank所提供的基因序列相同。将以上3个片段依次连入pVAX1载体后,所得质粒经酶切鉴定后获得约1800bp片段,与预想结果一致。结论:成功构建了重组人HIF-1α真核表达质粒pVAX1-EGFP-linker-HIF-1α。
- 陆蕴松高忠礼刘光耀
- 关键词：缺氧诱导因子1质粒
- 低氧诱导因子-1对血管内皮生长因子的调控被引量：11
- 2009年
- 陆蕴松高忠礼刘光耀
- 关键词：低氧诱导因子血管内皮生长因子血管新生
- MMP-9和TIMP-1在高危骨肉瘤中的表达及其诊断意义被引量：2
- 2009年
- 目的研究高危骨肉瘤中MMP-9和TIMP-1的表达情况,探讨MMP-9/TIMP-1失衡在高危骨肉瘤中的诊断意义。方法对14例高危骨肉瘤、41例恶性程度低的骨肉瘤和I5例正常骨组织行MMP-9和TIMP-1免疫组织化学染色,并对染色情况进行分析。结果高危骨肉瘤组的MMP-9的表达率为100%,呈普遍过表达,明显高于低恶性骨肉瘤组的73.2%的阳性率(P<0.05),而高危骨肉瘤组的TIMP-1的阳性率明显低于低恶性骨肉瘤组(P<0.05)。高危骨肉瘤组的MMP-9/TIMP-1表达失衡率为42.8%,明显高于低恶性骨肉瘤组的12.2%(P<0.05)。结论MMP-9与TIMP-1可作为诊断骨肉瘤的辅助指标。
- 陆蕴松金燕刘光耀高忠礼
- 关键词：骨肉瘤MMP-9TIMP-1免疫组织化学
- 含Apoptin基因重组腺病毒的构建及鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的:构建携凋亡素(Apoptin)基因重组腺病毒,为进一步研究Apoptin基因抗肿瘤作用分子机制建立基础.方法:利用BamHⅠ和SpeⅠ双酶切质粒pVAX1-Apoptin,获得Apoptin片段并连接入pacAd5 CMV K-N pA,构建含Apoptin基因的穿梭质粒pacAd5-Apoptin.利用PacⅠ单酶切对pacAd5-Apoptin和腺病毒基因组质粒(pAd5)进行线性化处理后应用脂质体介导法共转染AAV-293细胞,分别利用蚀斑纯化和RT-PCR、Western blot等方法对重组病毒进行筛选和鉴定,并测定所获得重组病毒的滴度.结果:所构建重组腺病毒中的Apoptin基因得到了正确转录,表达产物的相对分子质量约为13kDa,与CVA阳性对照一致;所获得重组腺病毒可有效表达Apoptin蛋白,该蛋白与CAV阳性血清具有反应原性,重组病毒滴度为1011PFU/L.结论:成功构建含Apoptin基因的重组腺病毒,所获得重组病毒的滴度可以满足体内外实验要求.
- 陈漉金宁一李霄刘立明贾鹏刘妍高鹏陆蕴松迟宝荣
- 关键词：腺病毒载体逆转免疫印迹法
- 重组低氧诱导因子-1α对成骨细胞功能调控的实验研究
- 低氧诱导因子-1α是在缺氧条件下的一个重要的氧依赖转录激活因子,在低氧状态下对成骨细胞的功能有调控作用,在常氧下极易降解,与其降解有关的结构域称之为氧依赖的结构域。本研究通过分子克隆的方法体外重组低氧诱导因子-1α,删除...
- 陆蕴松
- 关键词：低氧诱导因子-1Α成骨细胞
- 文献传递
- 含新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶基因重组腺病素的构建及鉴定被引量：4
- 2009年
- 目的：构建表达新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶（Hemagglutinin—neuramidinase，FIN）基因的重组腺病毒，为进一步研究HN基因对消化道肿瘤的抑制作用及分子机制建立基础。方法：用BamHI和XbaⅠ双酶切质粒pVHN，将获得的HN基因片段连接入穿梭质粒pacAd5 CMV K-N pA，构建含HN基因的穿梭质粒pacAd5-HN。利用PacI单酶切对pacAd5-HN和腺病毒基因组质粒（pAd5）进行线性化处理后应用脂质体介导法共转染AAV-293细胞，分别利用蚀斑纯化和RT-PCR、Western blot等方法对重组病毒进行筛选和鉴定，并测定所获得重组病毒的滴度。结果：所构建重组病毒可有效表达HN基因，表达产物分子量约为63kD，重组病毒滴度为10^8～10610PFU／ml。结论：成功构建含HN基因的重组腺病毒，所获得重组病毒的滴度可以满足体内外实验要求。
- 陈漉金宁一李霄刘立明贾鹏刘妍高鹏陆蕴松李明迟宝荣
- 关键词：NDVHN基因重组腺病毒抗肿瘤
