王少华 作品数:48 被引量:129 H指数:5 供职机构: 河南省疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 河南省医学科技攻关计划项目 河南省科技攻关计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
利福平依赖结核杆菌筛选及分子生物学特征初步鉴定 2013年 目的筛选利福平依赖结核杆菌,并对其分子生物学特征进行初步鉴定。方法用含利福平(200μg/mL)的酸性罗氏培养基分离培养疑似结核病人的痰液,对筛选出菌株的rpoB基因进行测序分析。结果筛选出5株利福平依赖菌株,测序结果表明所有菌株在rpoB的核心突变区内均有突变发生。结论本研究筛选的利福平依赖菌株在ropB核心突变区内均有突变发生,但仍需进一步研究利福平依赖菌株的其他分子生物学特征。 石洁 马晓光 李辉 闫国蕊 王少华 邢进 刘国栋 靳晓伟 李峰关键词:分子生物学特征 河南省结核病分子诊断技术能力验证结果分析 被引量:1 2018年 目的了解河南省结核病实验室分子检测能力现状。方法对河南省参加全国第四轮结核病分子诊断技术能力验证的结果进行分析。结果 1个省级和19个市级实验室100.0%通过测试,51个县级结核病实验室40个通过测试,通过率78.4%。结论省市级结核病实验室分子检测能力较强;县级结核病实验室的分子检测能力不足,需要进一步加强自身的能力建设。 李辉 朱岩昆 郑丹薇 马晓光 石洁 王少华 闫国蕊关键词:结核病 分子诊断 2022年河南省结核病检测专业知识水平及影响因素 被引量:1 2023年 目的了解河南省结核病实验室检测专业技术人员理论知识水平及影响因素,为提升结核病检测专业技术人员技能提供科学依据。方法测评对象为河南省18个地市及10个省直管县结核病实验室354名专业技术人员,2022年5月18日利用问卷星软件发放调查问卷,收集测评对象人口统计学特征及答题情况。采用多元线性回归分析测评得分影响因素。结果共收回有效问卷354份。结核病防治政策、结核病病原学基础知识、痰涂片镜检、分离培养知识、药敏技术知识、分子生物学诊断技术、实验室质量控制和生物安全得分率分别为64.00%,59.31%,80.46%,76.91%,57.25%,58.90%,69.31%,60.36%;测评平均分为(71.63±14.00)分,不同学历、职称、专业、单位级别平均得分结果显示本科及以上学历(76.41±12.88)分高于大专及以下(66.20±13.25)分,中级及以上(74.82±12.87)分高于初级及以下(70.09±14.28)分,临床医学检验专业(73.41±13.94)分高于其他专业(67.93±13.45)分,市级(78.50±13.26)分高于县级(67.73±12.89)分,差异均有统计学意义(P<0.05);不同机构类型实验室平均得分结果显示独立结核病防治所(独立结防所)(80.04±10.74)分、结核病定点医院(76.69±14.03)分、综合医院(71.60±13.93)分、疾病预防控制中心(疾控中心)(67.16±12.97)分,组间差异有统计学意义(P<0.05);多元线性回归分析结果显示,影响结核病检测专业技术人员测评得分的主要因素为学历(95%CI:3.353~9.497)、机构类型(95%CI:4.662~13.600)、单位级别(95%CI:0.880~8.669)。结论河南省结防机构检测人员在结核病理论知识掌握上总体良好,但仍需要重点加强对结核病病原学基础知识、药敏检测技术及分子诊断技术知识培训学习。此外,不同学历人群、机构类型及单位级别实验室对知识掌握情况存在差异,需要精准加强对大专及以下学历与疾控中心实验室技术指导与培训,同时发挥省、市� 苏茹月 朱岩昆 常文静 陈瑞琴 郑丹薇 孙国清 王少华 石洁 马晓光 孙定勇关键词:测评 影响因素 河南省某结核病专科医院57例非结核分枝杆菌肺病患者临床特征及临床分离株鉴定 被引量:2 2022年 目的了解非结核分枝杆菌肺病(NTM-PD)患者的临床特征及临床分离株菌种分布。方法对2019年河南某结核病专科医院57例NTM-PD患者临床资料进行回顾性分析。结果57例NTM-PD患者中,男性占78.9%(45例),≥50岁占78.9%(45例)。临床分离株中,胞内分枝杆菌占57.9%(33株),其次为脓肿分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌及鸟分枝杆菌,分别占19.3%、10.5%和8.8%。NTM-PD患者的临床症状主要为咳嗽、咳痰、发热、胸闷、气喘、咯血等呼吸道症状;男性和女性患者咳血率分别为4.4%(2/45)和58.3%(7/12),两者差异有统计学意义(χ^(2)=16.837,P<0.001)。患者胸部影像学表现最多的为肺部空洞,占57.9%(33例),其次为肺部结节和淋巴结肿大,分别占29.8%(17例)和14.0%(8例);男性和女性患者肺部空洞率分别为66.7%(30/45)和25.0%(3/12),肺部结节率分别为20.0%(9/45)和66.7%(8/12),差异均有统计学意义(P均<0.05)。患者有既往病史或合并症的患者比例为75.4%(43例),其中30例(52.6%)有既往结核病史,13例(22.8%)合并支气管扩张;男性和女性患者合并支气管扩张率分别为11.1%(5/45)和66.7%(8/12),差异有统计学意义(P<0.001)。结论NTM-PD患者以中老年男性为主;患者临床症状特异性差,类似结核病;有既往病史或合并症的比例较高,对有相关病史及合并症的疑似病例应开展NTM-PD筛查,以指导临床治疗。 王少华 可春梅 孙国清 孙定勇关键词:非结核分支杆菌 非结核分支杆菌肺病 菌种鉴定 两种痰标本分子检测方法诊断菌阴肺结核的价值 被引量:1 2019年 目的探讨痰标本分子检测方法利福平耐药实时荧光定量核酸扩增(XpertMTB/RIF)和恒温扩增荧光检测试剂盒(RealAmp)在菌阴肺结核快速诊断中的应用价值。方法研究组选取2014年10月~2015年10月永城市结核病防治所确诊的涂阴肺结核患者91例;对照组选取同一时期就诊期间诊断为肺部其他疾病患者31例,两组均进行XpertMTB/RIF和RealAmp检查,比较两种方法的敏感性、特异性。结果菌阴肺结核组痰XpertMTB/RIF和RealAmp的敏感性分别为70.3%,60.4%;XpertMTB/RIF和RealAmp相比明显差异无统计学意义(P>0.05);特异性分别为93.5%,83.9%。结论痰XpertMTB/RIF和RealAmp两种检测方法在菌阴肺结核诊断中都具有较高的灵敏度和特异性在临床中应用能提高菌阴肺结核的病原学检出率。 王少华 郑丹薇 朱岩坤 马晓光 石洁 李辉 张国龙关键词:结核分枝杆菌 菌阴肺结核 维生素D受体基因rs2222570位点多态性与结核发病相关性的meta分析 被引量:4 2016年 目的:判断维生素D受体(VDR)基因rs2222570位点多态性与结核发病风险的关联性。方法:用关键词"维生素D受体多态性"和"结核病"搜索数据库中相关研究,根据各研究间的异质性,使用随机或固定效应模型进行meta分析。最终有20篇文献纳入研究。对基因型以及合并后产生的遗传模型和等位基因多态性与结核发病的相关性进行分析。结果:F等位基因携带者结核发病风险降低(OR=0.84,95%CI=0.73~0.95);显性模型遗传模式降低结核发病风险(OR=0.74,95%CI=0.60~0.92)。结论:VDR基因rs2222570位点多态性与结核发病风险有关。 石洁 朱岩昆 郑丹薇 马晓光 王少华 李辉 邢进 吴彩霞关键词:结核病 维生素D受体基因 META分析 氧化还原指示剂法检测结核分枝杆菌药物敏感性的研究 目的:
评价氧化还原指示剂法(CRI,colorimetric redox indicator)检测结核分枝杆菌对一线抗结核药物敏感性的效能.
方法:
使用国家结核病参比实验室下发的结核分枝... 王少华 朱岩昆 郑丹薇 马晓光 石洁 李辉 邢进关键词:耐药结核病 抗结核药物 敏感性 结核分枝杆菌 文献传递 河南省结核菌分离株26位点MIRU-VNTR和Spoligotyping分子分型及耐药分析 被引量:4 2018年 目的探讨河南省结核杆菌的遗传多样性。方法使用26位点(经典24位点和其他2位点)的分支杆菌散在重复单元中数目可变串联重复序列(mycobacterium interspersed repetitive unit-variable number tandem repeat,MIRU-VNTR)和间隔区寡核苷酸分型(spoligotyping)对来自2015年期间河南省不同地区的668株结核杆菌分离株进行分型分析。对结核菌spoligotype类型和耐药表型的相关性进行分析。结果 Spoligotyping分析表明668株结核杆菌被分到10个不同的基因簇中。北京家族基因型是河南地区结核杆菌中的优势菌株。北京家族基因型菌株对四种一线药全耐药以及耐多药菌株比例明显高于非北京型菌株。668株结核杆菌通过26位点VNTR被分为567个不同的基因型。26个位点中15个位点具有高度或适中的分辨能力。10个分辨能力最强位点的组合分辨力能与26位点相当。结论北京家族是河南省最流行的结核杆菌基因型。10位点VNTR和spoligotyping相结合可有效地用于河南省结核杆菌进化遗传学研究。 石洁 郑丹薇 朱岩昆 马晓光 王少华 李辉 张国龙关键词:间隔区寡核苷酸分型 结核分枝杆菌早期分泌靶抗原和抗原85B融合蛋白的原核表达及其在血清学检测中的初步应用 被引量:5 2015年 目的原核表达结核分枝杆菌抗原早期分泌抗原靶6ku蛋白和抗原85B融合蛋白,建立融合抗原对结核病人快速诊断方法。方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中PCR扩增ag85B和Rv3875基因并构建表达载体pGEX4T-1上,转化BL21经IPTG诱导表达GST-85B-ESTA-6融合蛋白,对包涵体进行变性和透析复性后进行GST亲和层析纯化,纯化的可溶性目的蛋白用聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行鉴定;以融合蛋白为抗原,采用ELISA检测结核病人血清抗体。结果成功构建了结核分枝杆菌ag85B和Rv3875融合基因原核表达载体,转化大肠埃希菌BL21后经诱导产生了高水平的GST-85B-ESTA-6,该蛋白存在于菌体沉淀中,以包涵体形式居多。包涵体经变性、复性后用GST亲和层析纯化,纯化蛋白仍能与结核病患者血清反应,即可用于病人血清抗体检测。结论成功构建了pGEX4T-1-ag85B-Rv3875重组质粒,并诱导表达了含有GST-标签的ESAT-6-85B融合蛋白,为进一步研究结核菌的免疫机制奠定了基础。 石洁 朱岩昆 马晓光 王少华 李辉 邢进 闫国蕊关键词:结核分枝杆菌 原核表达 河南省维生素D受体基因rs2222570和rs731236位点多态性与结核病的易感性 被引量:5 2017年 目的:探讨河南省人群维生素D受体(VDR)基因多态性和结核病易感性之间关系。方法:采用病例对照研究方法,病例组纳入260个结核病患者,并以年龄和性别相匹配纳入260名健康人作为对照组。采用PCR-SSCP法对VDR基因位点多态性进行分析。应用SPSS 19.0对数据进行统计分析,SHEsis在线分析2个位点单倍体型和结核病发病的关联,MDR软件3.0.2分析基因和环境交互作用对结核病发病的影响。结果:VDR基因rs2222570位点多态性与结核病发病风险相关,野生型C/C降低了结核病发病50%的风险(校正OR=0.501,95%CI:0.343~0.709),并且该位点等位基因C在对照组中高于病例组(校正OR=0.632,95%CI:0.493~0.868);而VDR基因的rs731236位点突变基因型C/C增加结核病发病风险(校正OR=2.001,95%CI:1.838~2.191)。VDR基因单倍体型CT、TT和TC与结核病发病相关[CT:OR(95%CI)=0.673(0.521~0.847),P<0.001;TT:OR(95%CI)=1.332(1.043~1.711),P=0.032;TC:OR(95%CI)=6.561(2.366~18.143),P<0.001]。MDR结果表明VDR基因rs2222570和rs731236位点多态性、吸烟、结核病患者密切接触史4个因素交互作用增加了结核病发病风险[OR(95%CI)=7.619(2.201~26.354),P<0.001]。结论:VDR基因多态性与结核病发病风险相关,且VDR基因rs2222570和rs731236位点多态性、吸烟、结核病患者密切接触史存在交互作用。 石洁 朱岩昆 郑丹薇 马晓光 王少华 李辉 邢进 吴彩霞关键词:结核病 维生素D受体基因 单核苷酸多态性 多因子降维法