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EBV编码潜伏膜蛋白2A抗原表位的串联表达及其免疫原性分析被引量：2: 2013年; 目的:制备具有免疫原性的EB病毒潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)的表位串联蛋白并分析其免疫学特性。方法:用DNAstar软件分析LMP2A的抗原表位,将预测的免疫原性较强的两个表位通过基因合成串联在一起,克隆到原核表达载体pET28a中,经大肠杆菌BL21表达并纯化。制备的含LMP2A表位重组蛋白经SDS-PAGE、Western blot鉴定后,免疫小鼠制备多克隆抗体,以ELISA检测抗体的效价,免疫组织化学法检测该抗体对天然LMP2A的特异性。结果:通过原核表达与纯化,获得高纯度的表位融合蛋白,经小鼠免疫并制备效价高且特异性的小鼠抗LMP2A的多克隆抗体,该抗体可用于ELISA和免疫组织化学分析。结论:本研究制备的表位融合蛋白,具有天然抗原的免疫原性,可制备能特异性识别天然LMP2A分子的多克隆抗体,为利用表位融合蛋白筛选全人源基因工程抗体奠定了基础。; 曹清唐小军李文杰熊四平毛园熊林刘玉王长军冯振卿陈仁杰; 关键词：鼻咽癌 EB病毒多克隆抗体重组基因

T淋巴细胞相关免疫失调在帕金森病发生发展中的作用及机制研究: 帕金森病(PD)是最常见的运动障碍疾病之一,是一种以黑质纹状体系统多巴胺缺失为特征的神经退行性疾病,主要的临床表现包括静息性震颤、肌肉强直、和运动迟缓。目前,帕金森的精准诊断和治疗都缺乏有效的手段,主要原因是这种神经元退...; 李文杰; 关键词：帕金森病 T淋巴细胞 TH1细胞调节性T细胞细胞间粘附分子

抗EB病毒LMP2A单克隆抗体的制备及免疫学特性分析: 2014年; 目的:利用杂交瘤技术制备抗EB病毒潜伏膜蛋白2A(LMP2A)单克隆抗体并分析其免疫学特性。方法:以LMP第2和第5胞外区表位串联制备的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,制备抗LMP2A的单克隆抗体。通过ELISA、Western blot、免疫荧光、免疫组化、流式细胞术等方法鉴定单抗的免疫学特性。结果:获得1株稳定并持续分泌抗LMP2A单克隆抗体的稳定杂交瘤细胞株,所分泌的单克隆抗体5C12-C4-A6能够特异性识别鼻咽癌细胞膜表面的LMP2A蛋白。结论:本文制备了能够特异性识别鼻咽癌细胞膜表面LMP2A蛋白的单克隆抗体,为进一步进行鼻咽癌临床早期诊断和分子靶向治疗奠定了基础。; 徐鑫唐小军熊林王欢李文杰高畅熊四平仇镇宁Tan Min HanVo Jess Honganh冯振卿陈仁杰; 关键词：EB病毒 LMP2A 单克隆抗体免疫学特性

EBV特异性CTL的制备及其对EBV阳性肿瘤细胞杀伤效应的研究: EB病毒(Epstein-barr virus, EBV)属于人类疱疹病毒γ家族,广泛存在人群中,成人感染率达到90%以上,是第一个公认的致肿瘤病毒。鼻咽癌和淋巴瘤是常见的恶性肿瘤,是EBV潜伏感染、环境和宿主基因遗传等...; 李文杰; 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白细胞毒性T细胞; 文献传递

重组豹蛙酶的制备及其生物学特性分析被引量：5: 2013年; 目的:通过构建豹蛙酶原核表达载体pColdⅡ-Rap,表达、纯化豹蛙酶并研究其生物学活性。方法:合成豹蛙酶全基因序列,克隆于原核表达载体pColdⅡ中,鉴定正确后转化至大肠杆菌BL21,用SDS-PAGE和Western blot验证豹蛙酶的表达;大量表达重组豹蛙酶融合蛋白(Rap-His),通过MTT法分析Rap-His对乳腺癌细胞增殖的影响。结果:成功构建了pColdⅡ-Rap原核表达载体,经优化表达、纯化的条件,获得纯度较高的Rap-His;MTT法检测结果表明,该融合蛋白在320、160μg/ml时对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的抑制率在加药后4 d达到93.49%。结论:本研究制备的重组Rap-His融合蛋白能够抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖。这为进一步与肿瘤特异抗体偶联,构建肿瘤特异性靶向药物的研究奠定了基础。; 汪楠唐小军熊四平郑峰张慧林高畅李文杰董华朱进; 关键词：融合蛋白细胞增殖抑制

LMPs特异性T淋巴细胞对鼻咽癌细胞的杀伤作用: 2014年; 目的:研究树突状细胞负载EB病毒潜伏膜蛋白(latent membrane proteins,LMPs)介导生成的LMPs特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)LMPs-CTL的生物学特性,观察其对LMPs阳性鼻咽癌细胞SUNE的杀伤作用。方法:用淋巴细胞分离液分离人外周血单核细胞,采用贴壁分离及白细胞介素(interleukin,IL)-4、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)等细胞因子诱导成熟树突状细胞(dendritic cell,DC),通过DC细胞负载LMPs多肽抗原并递呈给同源T淋巴细胞,制备LMPs-CTL。CCK8法检测LMPs-CTL对SUNE细胞的杀伤作用;ELISA和羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(carboxy fluoroscein succinimidyl ester,CFSE)染色法检测LMPs-CTL分泌IFN-γ及其增殖。结果:LMPsCTL对SUNE细胞的杀伤率在12 h和24 h分别为(43.47±1.93)%和(77.15±3.18)%,显著高于对照组的(11.45±3.06)%和(24.27±13.20)%(P<0.05)。SUNE细胞刺激后,LMPs-CTL增殖能力较对照组有明显增强,IFN-γ分泌量达到(613.40±121.77)pg/ml,显著高于对照组(86.90±3.70)pg/ml(P<0.05)。结论:通过DC细胞负载LMPs混合多肽可诱导生成LMPsCTL,对LMPs阳性鼻咽癌细胞有较强的杀伤作用。; 李文杰唐小军熊四平陈志蒋帅冯振卿朱进陈仁杰; 关键词：潜伏膜蛋白细胞毒性T细胞鼻咽癌细胞免疫治疗

甲氟喹在防治全身代谢性炎症疾病中的应用: 本发明公开了制备甲氟喹在防治全身代谢性炎症疾病中的应用。甲氟喹在制备抑制NLRP3炎症小体相关炎性疾病的药物中的应用。甲氟喹在制备防治全身性炎症的药物中的应用。本发明筛选出的甲氟喹可以与NLRP3结合，施加LPS/ATP...; 鲁明杜仁红李文杰刘阳王聪胡刚

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李文杰